在食品加工和儲(chǔ)藏過(guò)程中,酪氨酸極易被氧化產(chǎn)生酪氨酸氧化產(chǎn)物（OTPs）。前期有研究發(fā)現(xiàn)攝入OTPs會(huì)引起機(jī)體組織器官（如肝臟、腎臟、心肌、胰腺、腦和腸道）的氧化應(yīng)激,造成組織損傷。而雙酪氨酸（Dityr）作為OTPs的主要成分,具有與甲狀腺激素類似的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。故本研究將60只健康雌性昆明小鼠,隨機(jī)分成3組,空白對(duì)照組（Con）;OTPs組和Dityr組,每天分別灌胃生理鹽水、960μg/kg?bw的OTPs、320μg/kg?bw的Dityr,連續(xù)灌胃6周和10周,對(duì)生理生化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),來(lái)探究Dityr對(duì)小鼠心肌功能損傷及能量代謝的影響。首先對(duì)灌胃6周的小鼠血漿和尿液進(jìn)行代謝組學(xué)分析,結(jié)果表明,OTPs和Dityr灌胃可誘導(dǎo)小鼠血漿和尿液中氧化應(yīng)激和能量代謝相關(guān)的小分子代謝物變化,血漿和尿液中顯著增加的氧化三甲胺（TMAO）的含量,提示OTPs和Dityr灌胃可能會(huì)引起小鼠心肌損傷;OTPs和Dityr灌胃還會(huì)引起小鼠腸道微生物群功能改變、膽堿生物利用度降低、氨基酸代謝改變等多種代謝途徑的變化。隨后檢測(cè)灌胃10周的小鼠血漿和心肌組織的生化指標(biāo),結(jié)果表明,OTPs和Dityr灌胃均導(dǎo)致... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略語(yǔ)對(duì)照表
1 緒論
    1.1 雙酪氨酸概述
        1.1.1 食品中蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生
        1.1.2 酪氨酸氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生
        1.1.3 雙酪氨酸的產(chǎn)生
        1.1.4 雙酪氨酸與氧化應(yīng)激
        1.1.5 雙酪氨酸與疾病的關(guān)系
    1.2 氧化應(yīng)激與心肌
        1.2.1 氧化應(yīng)激與心血管疾病
        1.2.2 氧化應(yīng)激與心肌炎癥
        1.2.3 氧化應(yīng)激與心肌能量代謝
    1.3 甲狀腺激素與心肌
    1.4 代謝組學(xué)的簡(jiǎn)介及在營(yíng)養(yǎng)學(xué)中的應(yīng)用
    1.5 立題意義與主要研究?jī)?nèi)容
        1.5.1 立題意義
        1.5.2 本文主要研究?jī)?nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        2.1.1 主要原料與主要試劑
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 動(dòng)物灌胃實(shí)驗(yàn)
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及灌胃
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)樣品采集
    2.3 代謝組學(xué)檢測(cè)
        2.3.1 血漿和尿液代謝組學(xué)樣品的處理
        2.3.2 血漿和尿液樣品~1H-NMR檢測(cè)
        2.3.3 血漿和尿液樣品~1H-NMR圖譜解析
        2.3.4 血漿和尿液代謝組學(xué)樣品的~1H-NMR數(shù)據(jù)分析
    2.4 生化指標(biāo)檢測(cè)
        2.4.1 血液及心肌組織ROS水平的測(cè)定
        2.4.2 血漿和心肌組織的氧化還原指標(biāo)的測(cè)定
        2.4.3 血漿和心肌組織的蛋白氧化產(chǎn)物和脂質(zhì)過(guò)氧化物含量的測(cè)定
        2.4.4 心肌組織石蠟包埋和切片染色
        2.4.5 血漿中炎性因子含量的測(cè)定
        2.4.6 心肌損傷相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定
        2.4.7 血漿和心肌組織FFA和ATP酶活力的測(cè)定
        2.4.8 心肌ATP含量的測(cè)定
        2.4.9 血漿甲狀腺激素水平的測(cè)定
        2.4.10 RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄
        2.4.11 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    2.5 雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)
        2.5.1 雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)活性檢測(cè)原理
        2.5.2 PsiCHECK2-TRE載體構(gòu)建
        2.5.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.5.4 雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)活性檢測(cè)
    2.6 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與討論
    3.1 雙酪氨酸對(duì)小鼠血漿和尿液小分子代謝物的影響
        3.1.1 雙酪氨酸對(duì)6周小鼠體重的影響
        3.1.2 雙酪氨酸對(duì)小鼠血漿和尿液樣品代謝組的影響
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)組小鼠血漿樣品代謝組數(shù)據(jù)的模型驗(yàn)證和代謝物的變化
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)組小鼠尿液樣品代謝組數(shù)據(jù)的模型驗(yàn)證和代謝物的變化
        3.1.5 討論
        3.1.6 小結(jié)
    3.2 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌氧化還原狀態(tài)的影響
        3.2.1 雙酪氨酸對(duì)10周小鼠體重的影響
        3.2.2 雙酪氨酸對(duì)小鼠血液和心肌ROS水平的影響
        3.2.3 雙酪氨酸對(duì)小鼠血漿和心肌氧化還原狀態(tài)的影響
        3.2.4 雙酪氨酸對(duì)小鼠血漿和心肌蛋白氧化產(chǎn)物和脂質(zhì)氧化產(chǎn)物含量的影響
        3.2.5 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌DT沉積量的影響
        3.2.6 小結(jié)
    3.3 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌炎癥的影響
        3.3.1 雙酪氨酸對(duì)小鼠血漿炎性因子含量的影響
        3.3.2 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌炎性基因表達(dá)的影響
        3.3.3 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌組織形態(tài)的影響
        3.3.4 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌損傷相關(guān)指標(biāo)的影響
        3.3.5 小結(jié)
    3.4 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌能量代謝的影響
        3.4.1 雙酪氨酸對(duì)小鼠血漿和心肌游離脂肪酸含量的影響
        3.4.2 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌ATP含量的影響
        3.4.3 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌ATP酶活性的影響
        3.4.4 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌能量代謝調(diào)節(jié)因子基因表達(dá)的影響
        3.4.5 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌脂肪酸代謝基因表達(dá)的影響
        3.4.6 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌糖代謝基因表達(dá)的影響
        3.4.7 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌三羧酸循環(huán)基因表達(dá)的影響
        3.4.8 小結(jié)
    3.5 雙酪氨酸對(duì)小鼠甲狀腺激素水平及其生理作用的影響
        3.5.1 雙酪氨酸對(duì)小鼠血漿甲狀腺激素水平的影響
        3.5.2 雙酪氨酸對(duì)小鼠心肌甲狀腺激素生理作用基因表達(dá)的影響
        3.5.3 重組載體質(zhì)粒測(cè)序結(jié)果
        3.5.4 雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)活性檢測(cè)結(jié)果
        3.5.5 小結(jié)
主要結(jié)論與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3663059