在食品加工和儲藏過程中,酪氨酸極易被氧化產(chǎn)生酪氨酸氧化產(chǎn)物（OTPs）。前期有研究發(fā)現(xiàn)攝入OTPs會引起機體組織器官（如肝臟、腎臟、心肌、胰腺、腦和腸道）的氧化應激,造成組織損傷。而雙酪氨酸（Dityr）作為OTPs的主要成分,具有與甲狀腺激素類似的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。故本研究將60只健康雌性昆明小鼠,隨機分成3組,空白對照組（Con）;OTPs組和Dityr組,每天分別灌胃生理鹽水、960μg/kg?bw的OTPs、320μg/kg?bw的Dityr,連續(xù)灌胃6周和10周,對生理生化指標進行檢測,來探究Dityr對小鼠心肌功能損傷及能量代謝的影響。首先對灌胃6周的小鼠血漿和尿液進行代謝組學分析,結(jié)果表明,OTPs和Dityr灌胃可誘導小鼠血漿和尿液中氧化應激和能量代謝相關(guān)的小分子代謝物變化,血漿和尿液中顯著增加的氧化三甲胺（TMAO）的含量,提示OTPs和Dityr灌胃可能會引起小鼠心肌損傷;OTPs和Dityr灌胃還會引起小鼠腸道微生物群功能改變、膽堿生物利用度降低、氨基酸代謝改變等多種代謝途徑的變化。隨后檢測灌胃10周的小鼠血漿和心肌組織的生化指標,結(jié)果表明,OTPs和Dityr灌胃均導致... 

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略語對照表
1 緒論
    1.1 雙酪氨酸概述
        1.1.1 食品中蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生
        1.1.2 酪氨酸氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生
        1.1.3 雙酪氨酸的產(chǎn)生
        1.1.4 雙酪氨酸與氧化應激
        1.1.5 雙酪氨酸與疾病的關(guān)系
    1.2 氧化應激與心肌
        1.2.1 氧化應激與心血管疾病
        1.2.2 氧化應激與心肌炎癥
        1.2.3 氧化應激與心肌能量代謝
    1.3 甲狀腺激素與心肌
    1.4 代謝組學的簡介及在營養(yǎng)學中的應用
    1.5 立題意義與主要研究內(nèi)容
        1.5.1 立題意義
        1.5.2 本文主要研究內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實驗試劑與儀器
        2.1.1 主要原料與主要試劑
        2.1.2 主要實驗儀器
    2.2 動物灌胃實驗
        2.2.1 實驗動物分組及灌胃
        2.2.2 實驗樣品采集
    2.3 代謝組學檢測
        2.3.1 血漿和尿液代謝組學樣品的處理
        2.3.2 血漿和尿液樣品~1H-NMR檢測
        2.3.3 血漿和尿液樣品~1H-NMR圖譜解析
        2.3.4 血漿和尿液代謝組學樣品的~1H-NMR數(shù)據(jù)分析
    2.4 生化指標檢測
        2.4.1 血液及心肌組織ROS水平的測定
        2.4.2 血漿和心肌組織的氧化還原指標的測定
        2.4.3 血漿和心肌組織的蛋白氧化產(chǎn)物和脂質(zhì)過氧化物含量的測定
        2.4.4 心肌組織石蠟包埋和切片染色
        2.4.5 血漿中炎性因子含量的測定
        2.4.6 心肌損傷相關(guān)指標的測定
        2.4.7 血漿和心肌組織FFA和ATP酶活力的測定
        2.4.8 心肌ATP含量的測定
        2.4.9 血漿甲狀腺激素水平的測定
        2.4.10 RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄
        2.4.11 實時熒光定量PCR
    2.5 雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測
        2.5.1 雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)活性檢測原理
        2.5.2 PsiCHECK2-TRE載體構(gòu)建
        2.5.3 細胞培養(yǎng)
        2.5.4 雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)活性檢測
    2.6 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與討論
    3.1 雙酪氨酸對小鼠血漿和尿液小分子代謝物的影響
        3.1.1 雙酪氨酸對6周小鼠體重的影響
        3.1.2 雙酪氨酸對小鼠血漿和尿液樣品代謝組的影響
        3.1.3 實驗組小鼠血漿樣品代謝組數(shù)據(jù)的模型驗證和代謝物的變化
        3.1.4 實驗組小鼠尿液樣品代謝組數(shù)據(jù)的模型驗證和代謝物的變化
        3.1.5 討論
        3.1.6 小結(jié)
    3.2 雙酪氨酸對小鼠心肌氧化還原狀態(tài)的影響
        3.2.1 雙酪氨酸對10周小鼠體重的影響
        3.2.2 雙酪氨酸對小鼠血液和心肌ROS水平的影響
        3.2.3 雙酪氨酸對小鼠血漿和心肌氧化還原狀態(tài)的影響
        3.2.4 雙酪氨酸對小鼠血漿和心肌蛋白氧化產(chǎn)物和脂質(zhì)氧化產(chǎn)物含量的影響
        3.2.5 雙酪氨酸對小鼠心肌DT沉積量的影響
        3.2.6 小結(jié)
    3.3 雙酪氨酸對小鼠心肌炎癥的影響
        3.3.1 雙酪氨酸對小鼠血漿炎性因子含量的影響
        3.3.2 雙酪氨酸對小鼠心肌炎性基因表達的影響
        3.3.3 雙酪氨酸對小鼠心肌組織形態(tài)的影響
        3.3.4 雙酪氨酸對小鼠心肌損傷相關(guān)指標的影響
        3.3.5 小結(jié)
    3.4 雙酪氨酸對小鼠心肌能量代謝的影響
        3.4.1 雙酪氨酸對小鼠血漿和心肌游離脂肪酸含量的影響
        3.4.2 雙酪氨酸對小鼠心肌ATP含量的影響
        3.4.3 雙酪氨酸對小鼠心肌ATP酶活性的影響
        3.4.4 雙酪氨酸對小鼠心肌能量代謝調(diào)節(jié)因子基因表達的影響
        3.4.5 雙酪氨酸對小鼠心肌脂肪酸代謝基因表達的影響
        3.4.6 雙酪氨酸對小鼠心肌糖代謝基因表達的影響
        3.4.7 雙酪氨酸對小鼠心肌三羧酸循環(huán)基因表達的影響
        3.4.8 小結(jié)
    3.5 雙酪氨酸對小鼠甲狀腺激素水平及其生理作用的影響
        3.5.1 雙酪氨酸對小鼠血漿甲狀腺激素水平的影響
        3.5.2 雙酪氨酸對小鼠心肌甲狀腺激素生理作用基因表達的影響
        3.5.3 重組載體質(zhì)粒測序結(jié)果
        3.5.4 雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)活性檢測結(jié)果
        3.5.5 小結(jié)
主要結(jié)論與展望
致謝
參考文獻
附錄:作者在攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文



本文編號：3663059