N-乙;返漠愒瓷锖铣珊鸵衷寤钚匝芯
發(fā)布時間:2022-07-03 19:46
目的 用Streptomyces lividans GX28異源合成N-乙;,并研究N-乙;返目钩喑痹寤钚浴7椒 前期研究發(fā)現(xiàn)Bacillus atrophaeus C89芳香族氨基酸脫羧酶(aromatic l-amino acid decarboxylase,AADC)能將L-色氨酸脫羧成L-色胺。氨基酸多序列比對發(fā)現(xiàn)S.lividans GX28基因組中存在使色胺乙;拿。通過克隆、重組將aadc基因轉(zhuǎn)入S.lividans GX28中構(gòu)建重組菌株,HPLC檢測目標(biāo)產(chǎn)物,NMR鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。檢測化合物對3種赤潮微藻的毒性。結(jié)果 S.lividans GX28中的蛋白WP015609847.1含有芳烷基胺N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(alkyl amine N-acetyltransferase,AANAT)的底物結(jié)合位點(P64和F188)和催化位點(Y168),推測其為AANAT。宿主的發(fā)酵產(chǎn)物中分離得到N-乙酰基色胺。N-乙酰基色胺對墨西哥原甲藻的生長具有較強的抑制作...
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 主要試劑與儀器
1.1.2 菌株、質(zhì)粒、引物和藻株
1.1.3 主要培養(yǎng)基
1.2 方法
1.2.1 氨基酸多序列比對推測S. lividans GX28中AANAT類乙酰轉(zhuǎn)移酶
1.2.2 aadc基因的克隆和重組表達載體pJNA2554的構(gòu)建
1.2.3 重組質(zhì)粒pJNA2554電轉(zhuǎn)化E. coli ET12567
1.2.4 重組質(zhì)粒pJNA2554轉(zhuǎn)移至S. lividans GX28
1.2.5 重組菌S. lividans SJNA18發(fā)酵產(chǎn)物分析與結(jié)構(gòu)鑒定
1.2.6 赤潮微藻的生物測定方法
2 結(jié)果與分析
2.1 氨基酸多序列比對推測結(jié)果
2.2 重組菌S. lividans SJNA18發(fā)酵產(chǎn)物的分析、提取與結(jié)構(gòu)鑒定
2.3 N-乙;穼3種赤潮微藻生長的影響
3 討論與結(jié)論
本文編號:3655532
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【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 主要試劑與儀器
1.1.2 菌株、質(zhì)粒、引物和藻株
1.1.3 主要培養(yǎng)基
1.2 方法
1.2.1 氨基酸多序列比對推測S. lividans GX28中AANAT類乙酰轉(zhuǎn)移酶
1.2.2 aadc基因的克隆和重組表達載體pJNA2554的構(gòu)建
1.2.3 重組質(zhì)粒pJNA2554電轉(zhuǎn)化E. coli ET12567
1.2.4 重組質(zhì)粒pJNA2554轉(zhuǎn)移至S. lividans GX28
1.2.5 重組菌S. lividans SJNA18發(fā)酵產(chǎn)物分析與結(jié)構(gòu)鑒定
1.2.6 赤潮微藻的生物測定方法
2 結(jié)果與分析
2.1 氨基酸多序列比對推測結(jié)果
2.2 重組菌S. lividans SJNA18發(fā)酵產(chǎn)物的分析、提取與結(jié)構(gòu)鑒定
2.3 N-乙;穼3種赤潮微藻生長的影響
3 討論與結(jié)論
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