目的:探討富氫水對大鼠離體心肌缺血再灌注損傷后MAPK-ERK1/2信號通路和JAK-STAT信號通路的調(diào)節(jié)作用。方法:將大鼠隨機分為對照組與富氫水組,兩組再分別隨機分成缺血前期、缺血期、缺血再灌注期。應(yīng)用Langendroff灌流裝置,對照組采用K-R液灌注,富氫水組采用K-R液+富氫水灌注,實驗完畢后取材,TUNEL法檢測各組心肌細胞凋亡率。采用Western Blot測定各組心肌凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、caspase3,MAPK-ERK1/2信號通路相關(guān)蛋白ERK1/2、p-ERK1/2等的表達水平。免疫組化法檢測各組心肌細胞p-ERK1/2蛋白表達。通過蛋白芯片技術(shù)對富氫水組和對照組缺血再灌注后心肌進行活性蛋白因子的篩選與分析,利用Gene Ontology（簡稱GO）富集原理得出具有差異的KEGG pathway。用Western Blot和免疫組化檢測兩組大鼠缺血再灌注后心肌JAK2、STAT1、STAT3、P-STAT1、P-JAK2、P-STAT3等的表達。結(jié)果:1.富氫水組缺血再灌注期與對照組缺血再灌注期比較,心肌細胞凋亡減少（P<0.01）;對照組缺血... 

【文章來源】：河北大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 研究問題的提出
    1.2 研究目的與意義
    1.3 國內(nèi)外研究綜述
        1.3.1 氫氣與自由基
        1.3.2 氫氣與炎癥反應(yīng)
        1.3.3 氫氣與細胞凋亡
        1.3.4 氫與信號通路相關(guān)研究
    1.4 研究思路與方法
        1.4.1 大鼠離體心臟灌注Langendorff模型的建立
        1.4.2 TUNEL方法檢測細胞凋亡
        1.4.3 蛋白芯片技術(shù)
        1.4.4 蛋白質(zhì)印跡法
        1.4.5 免疫組化法
    1.5 主要研究內(nèi)容
    1.6 研究的創(chuàng)新點
第二章 富氫水通過調(diào)節(jié)MAPK-ERK1/2 通路減輕MI/R損傷
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實驗分組及模型的建立
        2.2.1 實驗分組
        2.2.2 模型的建立
    2.3 指標檢測
        2.3.1 TUNEL法檢測各組心肌細胞凋亡率
        2.3.2 蛋白質(zhì)印跡法檢測ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax、caspase的表達
        2.3.3 免疫組織化學(xué)法檢測p-ERK1/2 的表達
        2.3.4 統(tǒng)計分析
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 富氫水對心肌缺血再灌注損傷細胞凋亡的影響
        2.4.2 富氫水對心肌組織凋亡相關(guān)蛋白的影響
        2.4.3 富氫水對心肌組織MAPK-ERK1/2 通路的影響
    2.5 討論
第三章 富氫水通過調(diào)節(jié)JAK-STAT通路減輕MI/R損傷
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器設(shè)備
    3.2 實驗分組及模型的建立
        3.2.1 實驗分組
        3.2.2 模型的建立
    3.3 實驗方法及檢測指標
        3.3.1 蛋白芯片篩選差異蛋白
        3.3.2 蛋白質(zhì)印跡法檢測JAK2、STAT1、STAT3、P-STAT1、P-JAK2、P-STAT3 蛋白的表達
        3.3.3 免疫組織化學(xué)法檢測P-STAT1、P-JAK2、P-STAT3 等蛋白表達
    3.4 數(shù)據(jù)分析
        3.4.1 原始數(shù)據(jù)的歸一化處理
        3.4.2 表達差異基因篩選
        3.4.3 差異基因GO富集分析
        3.4.4 差異蛋白KEGG pathway富集分析
        3.4.5 統(tǒng)計學(xué)方法
    3.5 結(jié)果
        3.5.1 心肌I/R損傷后差異蛋白的表達
        3.5.2 心肌I/R損傷后差異蛋白GO分析
        3.5.3 心肌I/R損傷后差異蛋白KEGG pathway富集分析
        3.5.4 心肌I/R損傷后JAK-STAT信號通路的表達
    3.6 討論
第四章 結(jié)論
第五章 綜述:氫氣在治療疾病方面的研究
    5.1 氫氣在治療呼吸系統(tǒng)疾病方面的研究
    5.2 氫氣在治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病方面的研究
    5.3 氫氣在治療循環(huán)系統(tǒng)疾病方面的研究
    5.4 氫氣在治療消化系統(tǒng)疾病方面的研究
    5.5 氫氣治療腫瘤方面的研究
參考文獻
致謝
攻讀碩士期間取得的學(xué)術(shù)成果


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3642834