目的:收集來源于黔北地區(qū)特殊生境土壤中的放線菌進行分離鑒定,發(fā)掘潛力菌株與新型菌株,為開發(fā)新型抗生素及活性次級代謝產(chǎn)物提供基因資源和放線菌種;對貴州特殊生境梵凈山來源鏈霉菌分離菌株Streptomyces sp.FJS 31-2菌株的次級代謝產(chǎn)物進行發(fā)酵,分離、純化,以期獲得結(jié)構新穎的活性次級代謝產(chǎn)物。方法:采集黔北地區(qū)鳳凰山、大板水、四洞溝和佛光巖等未經(jīng)人為破壞的特殊生境中的土樣,利用GYM培養(yǎng)基、自來水瓊脂培養(yǎng)基和ISP2,分離并純化單菌落;利用基因篩選和活性篩選相結(jié)合的方式篩選分離菌株抗MRSA的活性;對發(fā)酵產(chǎn)物進行活性測試,并借助高效液相對菌株活性部位的范圍進一步縮小;采取大規(guī)模發(fā)酵、萃取、正相硅膠柱層析、Sephadex LH-20葡聚糖凝膠柱層析及高效液相制備色譜法等手段分離、純化目標化合物。結(jié)果:分離純化獲得318株分離菌株,并篩選出一批擁有良好抗MRSA活性的菌株。此外通過對已知菌株16s RNA系統(tǒng)進化分析,發(fā)現(xiàn)新菌株12株;對其中99余株活性菌株進行了基因篩選和抗性測試;從鏈霉菌Streptomyces sp.FJS 31-2中分離得到兩個單體化合物。結(jié)論:16S ... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1分離菌株抗MRSA活性分析

醫(yī)學院碩士學位論文 林楠2 抗 MRSA 活性菌株 16s rRNA 系統(tǒng)進化分析根據(jù)形態(tài)初步篩選后選取赤水赤水佛光巖、赤水紅石野谷、赤水四水溝、大和鳳凰山等地區(qū)的 99 株放線菌形態(tài)的具有抗 MRSA 活性菌株進行了 16A 基因序列分析。將 PCR 產(chǎn)物測序結(jié)果在 NCBI 上通過 Blast 在線比對[18]， MEGA5.0 軟件同時根據(jù)活性測試結(jié)果進行系統(tǒng)進化樹的分析，可見這些不源的抗 MRSA 活性菌株可聚類為 5 大類群，而分離菌株 Streptomyces spS8-9 則聚類在所有類群之外（圖 2），與已發(fā)表分離菌株 A. sp. A23 聚類在一

凝膠電泳檢測，PKSⅠ基因呈初步從 64 株分離菌株中篩PCR 擴增產(chǎn)物測序結(jié)果聚類PKSⅠ 天 然 產(chǎn) 物 的 放 線 eptomyces. blastmyceticus NBRAB431752.1)和 Streptomyces sM1 2 3 4 5 6 7 8 9bp

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3625501