發(fā)布時間：2022-02-09 23:50

　　地塞米松是一種強效的人工合成糖皮質(zhì)激素,由于其具有強大的抗炎、抗休克和免疫抑制的功能而被廣泛使用。然而長期或者過量使用地塞米松也會伴隨肌肉萎縮等副作用,目前肌肉萎縮的治療仍是一個亟待解決的問題,急需新的有效的治療方法。而MicroRNA（miRNA）作為近些年的熱點研究內(nèi)容,很可能給地塞米松誘導(dǎo)的肌肉萎縮提供新的治療手段。miRNA是內(nèi)源性的、小片段的、非編碼RNA,通過與靶基因的mRNA的3?非翻譯區(qū)（3?UTR）結(jié)合抑制靶基因表達。在已有的文獻報道中,miRNA在地塞米松處理的C2C12肌管的表達量差異已被研究人員使用miRNA微陣列檢測過。該實驗結(jié)果顯示,在地塞米松處理的C2C12肌管中,miR-322等miRNA的表達量明顯增加。本研究利用地塞米松處理C2C12成肌細胞分化成的C2C12肌管。免疫熒光實驗顯示地塞米松使C2C12肌管直徑縮小（p<0.01）。實時熒光定量PCR實驗結(jié)果顯示肌萎縮的標(biāo)記基因Atrogin-1和MuRF-1的表達量升高（p<0.05）。這些結(jié)果表明地塞米松誘導(dǎo)C2C12肌管發(fā)生萎縮。在地塞米松誘導(dǎo)的C2C12肌管中檢測miR-322的表達... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

地塞米松對C2C12肌管萎縮的影響

除了從細胞形態(tài)方面檢測C2C12肌管的萎縮以外,我們還檢測了肌肉萎縮的標(biāo)志基因Atrogin-1和 MuRF-1[7]。各種肌肉萎縮的模型中都發(fā)生了Atrogin-1和 MuRF-1表達量的升高(P<0.01)。實驗結(jié)果如圖1.2所示,我們發(fā)現(xiàn) Atrogin-1(P<0.001)和 MuRF-1(P<0.05)的表達被上調(diào)。這一結(jié)果和C2C12肌管直徑減小是一致的,共同說明了地塞米松成功地誘導(dǎo)了C2C12肌管萎縮。1.3.2 地塞米松誘導(dǎo)C2C12肌管萎縮對miR-322表達量的影響

以前的研究表明miR-322的表達量在地塞米松誘導(dǎo)的C2C12肌管中被明顯上調(diào)[103]。這表明miR-322可能在這一過程中扮演重要角色。也有相關(guān)研究已經(jīng)證明了miR-322對于調(diào)控肌肉萎縮有一定作用[104],但是其作用機制還知之甚少。我們的研究旨在探究miR-322在地塞米松誘導(dǎo)C2C12肌管萎縮這一過程中的作用。由于miRNA較小,無法直接檢測,所以我們設(shè)計了miR-322特異性的莖環(huán)引物來輔助檢測miR-322的表達量變化,這一方法被廣泛應(yīng)用于絕大部分miRNA的研究中[105]。我們的檢測結(jié)果與前人的實驗結(jié)果相似,如圖1.3所示,miR-322的表達量在地塞米松誘導(dǎo)C2C12肌管萎縮的過程中被明顯上調(diào)(P<0.05)。1.3.3 過表達miR-322對地塞米松誘導(dǎo)的C2C12肌管萎縮的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Apoptosis in skeletal muscle and its relevance to atrophy[J]. Esther E Dupont-Versteegden.  World Journal of Gastroenterology. 2006(46)



本文編號：3617863