本文關(guān)鍵詞：毛細(xì)管電泳對支鏈氨基酸分離檢測方法的研究及應(yīng)用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：支鏈氨基酸(BCAAs)是一類能夠促進人體肌肉合成和緩解疲勞,提高免疫力的重要氨基酸,是運動營養(yǎng)補劑中關(guān)鍵的功效成份,定量分析運動營養(yǎng)補劑中以及運動員尿樣中BCAAs的含量不僅能夠達到對運動營養(yǎng)補劑的質(zhì)量監(jiān)控和功效評價的目的,并且還能通過運動員BCAAs攝入量和排泄量的關(guān)系來為運動員營養(yǎng)補劑使用方案的開發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。另外,人體尿樣中BCAAs濃度的升高還是一些疾病的生物標(biāo)志(如楓糖尿病)。在眾多的氨基酸拆分方法中,毛細(xì)管電泳(CE)技術(shù)因其分析速度快、分離能力強、試劑消耗少等優(yōu)點而被廣大研究者廣泛應(yīng)用。紫外(UV)檢測器擁有價格低廉,應(yīng)用廣泛的優(yōu)勢。本課題旨在開發(fā)簡便的BCAAs的CE-UV分析方法以期應(yīng)用于上述方面。第一章中主要介紹了CE系統(tǒng)的構(gòu)造與基本原理,并重點闡述了BCAAs補充對運動員的重要作用和過度補充BCAAs(或蛋白質(zhì)類運動營養(yǎng)補劑)對人體的危害以及BCAAs需求量和最大可耐受攝入量的測定方法。提出了CE應(yīng)用于BCAAs分析以及運動員營養(yǎng)補劑使用方案開發(fā)的良好前景。第二章主要對六種背景吸光電解質(zhì)的紫外吸收性質(zhì)以及與幾種重要氨基酸的電泳淌度進行了考察與比對,并結(jié)合這六種電解質(zhì)的穩(wěn)定性,最終選擇了適用于bcaas間接紫外檢測的背景電解質(zhì)對氨基水楊酸(pas)。通過添加edta,亮氨酸(leu)和異亮氨酸(ile)能夠?qū)崿F(xiàn)部分分離,但l-ile的色譜峰卻始終與leu重疊,無法通過edta的添加實現(xiàn)分離。因此,后續(xù)的工作重點在于選擇合適的背景添加劑使leu和ile完全分離。第三章是bcaas的ce-間接紫外檢測方法的開發(fā)。通過對ph值、背景添加劑濃度以及背景紫外吸光電解質(zhì)濃度等影響條件的優(yōu)化以及影響機理的討論,最終確定了最優(yōu)分離條件為2.0mmna2hpo4,10.0mmpas,40.0mmβ-環(huán)糊精(β-cd),ph=12.2。在此條件下,leu和l-ile的分離度為1.0(樣品濃度均為0.5mm),方法的重現(xiàn)性良好(峰面積的rsd2.1%,n=5),靈敏度雖低于熒光、質(zhì)譜等檢測器,但本章中bcaas的分析方法可以避免繁雜的柱前衍生過程,并且價格低廉,可應(yīng)用范圍廣。第四章是基于bcaas在較低的紫外波長下(220nm)有一定的紫外吸收的原理,開發(fā)了bcaas低波長直接紫外檢測方法,在40.0mm硼砂,40.0mmβ-cd,ph=10.2的條件下,bcaas能夠得到完全分離。方法的背景電解質(zhì)組成更加簡單,同時檢測的靈敏度也要高于文獻報道的相似工作。第五章是間接檢測法和直接檢測法在運動營養(yǎng)補劑以及運動員尿液中bcaas分析中的應(yīng)用。間接檢測法獲得的補劑中bcaas含量的數(shù)據(jù)與文獻報道接近,而直接檢測法中l(wèi)-ile峰則受到了干擾。而運動員尿樣中未能檢測出bcaas,原因一方面可能是靈敏度不足,另一方面可能是因為運動員補充的BCAAs未達到可耐受攝入量。本章最后提出了BCAAs萃取的標(biāo)準(zhǔn)方法,有望解決以上所述的問題。
【關(guān)鍵詞】：毛細(xì)管電泳 支鏈氨基酸 營養(yǎng)補劑 紫外檢測
【學(xué)位授予單位】：東華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R927;O658.9
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-11
• 第一章 緒論11-28
• 1.1 毛細(xì)管電泳概述11-17
• 1.2 支鏈氨基酸與運動營養(yǎng)的關(guān)系17-24
• 1.3 支鏈氨基酸需求量及可耐受攝入量的測定24-26
• 1.4 毛細(xì)管電泳在支鏈氨基酸可耐受攝入量測定中的應(yīng)用前景26-28
• 第二章 背景吸光電解質(zhì)性質(zhì)考察及支鏈氨基酸的分離初探28-40
• 2.1 引言28-29
• 2.2 實驗儀器、試劑和方法29-30
• 2.3 結(jié)果與討論30-39
• 2.4 本章小結(jié)39-40
• 第三章 毛細(xì)管電泳分離-間接紫外檢測支鏈氨基酸40-48
• 3.1 前言40-41
• 3.2 實驗儀器、藥品與方法41-42
• 3.3 結(jié)果與討論42-47
• 3.4 本章小結(jié)47-48
• 第四章 毛細(xì)管電泳低波長紫外檢測支鏈氨基酸48-55
• 4.1 前言48-49
• 4.2 實驗儀器、藥品與方法49-50
• 4.3 結(jié)果與討論50-54
• 4.4 本章小結(jié)54-55
• 第五章 營養(yǎng)補劑和尿樣中支鏈氨基酸的分析及前處理方法研究55-64
• 5.1 前言55-56
• 5.2 實驗儀器、藥品與方法56-57
• 5.3 結(jié)果與討論57-63
• 5.4 本章小結(jié)63-64
• 參考文獻64-74
• 附錄一74-75
• 附錄二75-76
• 碩士期間發(fā)表的論文76-77
• 致謝77

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本文編號：352397