目的:通過研究小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系HT22細(xì)胞糖氧剝奪（OGD）后凋亡/自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的變化,探討葡萄籽原花青素提取物（GSPE）預(yù)處理對OGD誘導(dǎo)的HT22細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。方法:將HT22細(xì)胞分為對照組、OGD組、OGD+GSPE組。CCK8法檢測OGD不同時間（4、6、8 h）干預(yù)后HT22細(xì)胞的活性,確定后續(xù)實(shí)驗(yàn)中OGD時間; CCK8法檢測同一OGD時間下,不同GSPE濃度（20、40、100、200μmol/L）處理后HT22細(xì)胞的活性,確定GSPE最佳濃度;免疫熒光技術(shù)標(biāo)記Tubulin蛋白,觀察細(xì)胞形態(tài)的改變; AnnexinⅤ-FITC/PI染色和TUNEL染色檢測細(xì)胞凋亡;免疫熒光技術(shù)檢測Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、LC3Ⅱ和Beclin1等蛋白的表達(dá)量變化; caspase-3活性檢測試劑盒檢測caspase-3相對活性。結(jié)果:觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)果表明:對照組細(xì)胞形態(tài)完整、胞體較大,OGD組中細(xì)胞大量皺縮成團(tuán)、胞體變小,OGD+GSPE組細(xì)胞狀態(tài)較OGD組明顯改善;觀察細(xì)胞凋亡情況結(jié)果表明:和OGD組相比,GSPE預(yù)處理后的HT22細(xì)胞... 

【文章來源】：神經(jīng)解剖學(xué)雜志. 2020,36(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 HT22細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 糖氧剝奪(OGD)模型的建立
        2.3 缺氧時間及給藥濃度探索
        2.4 細(xì)胞凋亡檢測
        2.5 免疫熒光染色
        2.6 caspase-3活性檢測
        2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1 OGD缺氧時間和GSPE濃度探索
    2 GSPE預(yù)處理可以通過抑制細(xì)胞凋亡減輕OGD對HT22細(xì)胞的損傷
    3 GSPE預(yù)處理通過抑制凋亡和自噬減輕OGD對HT22細(xì)胞的損傷
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]原花青素可抑制高糖誘導(dǎo)兔髓核細(xì)胞的凋亡[J]. 徐慶,房好林,劉陽,張存鑫,田寶方.  中國組織工程研究. 2019(21)
[2]薔薇紅景天低聚原花青素對動脈粥樣硬化大鼠肝臟的保護(hù)作用[J]. 韓雪,周茜,牛佳卉,吳夢穎,王亞旭,袁靜,趙文.  食品科學(xué). 2019(01)
[3]自噬與缺氧缺血性腦損傷[J]. 厲永強(qiáng),付蘇,王來,劉彬,石貞玉,鄧錦波.  生理學(xué)報(bào). 2017(03)



本文編號：3422372