研究背景:甲基苯丙胺（METH）是苯丙胺類的中樞精神興奮劑,是目前危害最嚴(yán)重和最廣泛的毒品之一。METH誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性、成癮性和依賴性是全球共同面臨的重大公共衛(wèi)生課題和研究熱點(diǎn)之一。METH具有多種藥理學(xué)、毒理學(xué)特性,長(zhǎng)期濫用可引起神經(jīng)生物學(xué)、病理學(xué)和行為學(xué)的改變。近年來研究顯示,METH有較強(qiáng)的神經(jīng)毒性,可引起神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能損傷性改變,誘發(fā)大腦發(fā)生與阿爾茨海默�。ˋD）和帕金森病等神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病類似的病理學(xué)改變。目前的研究提示METH的神經(jīng)毒性機(jī)制主要包括:氧化應(yīng)激損傷、體溫平衡失調(diào)、興奮性神經(jīng)毒性及炎性反應(yīng)等。盡管如此,因METH引起神經(jīng)損傷的多樣化,機(jī)制的復(fù)雜化,METH引起神經(jīng)毒性的損傷特點(diǎn)及機(jī)制仍需進(jìn)一步觀察和深入闡述。本研究擬從METH影響神經(jīng)元活力及凋亡為切入點(diǎn),觀察不同濃度梯度METH暴露對(duì)海馬神經(jīng)元損傷情況,體外實(shí)驗(yàn)探討胰島素通路參與介導(dǎo)METH神經(jīng)毒性導(dǎo)致神經(jīng)元受損的毒理機(jī)制,以期為METH神經(jīng)毒理機(jī)制提供新的理論方向,為進(jìn)一步對(duì)METH引發(fā)神經(jīng)毒性進(jìn)行藥物干預(yù)提供理論參考。研究目的:建立原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元METH染毒模型,觀察METH對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞活力及凋亡的影... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

胰島素信號(hào)通路與AD樣改變關(guān)系圖

南京究結(jié)果也表明，由一些神經(jīng)毒性環(huán)境內(nèi)分泌活 GSK3β 磷酸化，導(dǎo)致 tau 蛋白磷酸化增表明，胰島素信號(hào)通路功能通過維持適當(dāng)?shù)年P(guān)重要，從而影響學(xué)習(xí)和記憶能力[38,39]。因島素抵抗可能導(dǎo)致神經(jīng)退行性樣疾病[40]。島素通路參與介導(dǎo)了 METH 引發(fā) AD 樣改與 METH 的神經(jīng)毒性導(dǎo)致神經(jīng)退行疾病的驗(yàn)室前期探索的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討 MET的神經(jīng)作用靶點(diǎn)，闡述胰島素通路在 MET作用及機(jī)制，為 METH 的治療提供新的理

紅色熒光顯示與 MAP2 抗體特異性的結(jié)合于神經(jīng)元細(xì)胞（圖3A），其熒光主要分布于神經(jīng)元的胞體，軸突及樹突，而在核中沒有表達(dá)。而藍(lán)色的熒光顯示與 DAPI 特異性結(jié)合的細(xì)胞核（圖 3B）。隨機(jī) 10 個(gè)視野，重復(fù) 3次，通過計(jì)算 MAP2 標(biāo)記的神經(jīng)元和 DAPI 標(biāo)記計(jì)算的總細(xì)胞數(shù)，進(jìn)而判斷培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元的純度（MAP2 標(biāo)記的細(xì)胞/DAPI 核染的細(xì)胞×100%）。實(shí)驗(yàn)顯示，按照我們的海馬神經(jīng)元的分離培養(yǎng)方法，得到的海馬神經(jīng)元的純度達(dá) 95%以上（圖 3C），符合后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求。A B C圖 3 海馬神經(jīng)元的鑒定和純度判斷（放大 400 倍）A：MAP2 特異性結(jié)合于神經(jīng)元細(xì)胞；B：DAPI 特異性結(jié)合神經(jīng)元胞核；C：合并圖2．原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)觀察剛接種的海馬神經(jīng)元為圓形，體積較小，胞體透亮，光暈明顯，細(xì)胞單個(gè)均勻分布，10 天時(shí)胞體最為豐滿


本文編號(hào)：3415388