目的:探討達格列凈（Dapagliflozin,DAPA）對高糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）自噬的調(diào)控及機制。材料與方法:將HUVEC進行復(fù)蘇,培養(yǎng)、傳代,取對數(shù)增長期的HUVEC進行下列研究:1、觀察不同濃度DAPA作用不同時間后對高糖誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞活力的影響:分別處理24h和48h,每個時間點分8組:正常對照（5.5mM）組、高糖（30mM）組、高糖+DAPA（10μM,20μM,30μM,50μM,80μM,120μM）組。MTT檢測各組吸光光度值,確定達格列凈干預(yù)的最佳濃度及處理時間;2、探討DAPA對高糖誘導(dǎo)HUVEC自噬的影響及可能機制,分為5組:正常對照組（A組）、高糖組（B組）、高糖+DAPA_最佳濃度組（C組）、高糖+Rapamycin（雷帕霉素,100nM）組（D組）、高糖+DAPA_最佳濃度+Rapamycin組（E組）。Western Blot檢測自噬信號因子LC3-II/LC3-I、P62、AMPK和mTOR的蛋白表達水平,RT-... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組在OD568nm處的OD值（a）、（c）；達格列凈不同濃度組細(xì)胞存活率（b）、（d）（±s，n=3）

南華大學(xué)碩士學(xué)位論文14糖+DAPA80μM組OD值較高糖組明顯升高，細(xì)胞活力得到改善，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。（2）細(xì)胞處理48h后，MTT結(jié)果如圖3.1中（c）、（d）所示，與正常對照組比較，高糖組、高糖+DAPA各濃度組OD值均不同程度降低，存活率下降明顯，增殖受抑制，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。相比高糖組，不同濃度DAPA干預(yù)后的各組，OD值均升高，但DAPA10μl時OD值升高不明顯（P＞0.05），其余各組OD值均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。DAPA在一定濃度范圍內(nèi)（10-50μM），各組細(xì)胞OD值與濃度呈正相關(guān)（P＜0.05）�？傮w來說，DAPA高濃度組比低濃度組對細(xì)胞促增殖作用更明顯，且在DAPA50μM促細(xì)胞增殖作用最強。正常對照組高糖組高糖+DAPA10μM高糖+DAPA20μM高糖+DAPA30μM高糖+DAPA50μM高糖+DAPA80μM高糖+DAPA120μM圖3.2（48h）顯微鏡下各組HUVEC細(xì)胞學(xué)形態(tài)（100X）經(jīng)48h處理后各組細(xì)胞學(xué)形態(tài)（顯微鏡下觀察）：與正常對照組比較，高糖

各組LC3-II、LC3-I表達（a）、P62表達（c）；各組LC3-II/LC3-I值（b）、P62/β-actin值（d）（±s，n=3）


本文編號：3411243