目的:他克莫司是器官移植病人抗排斥治療中最為常用的免疫抑制劑。細(xì)胞色素P450 3A5（CYP3A5）是他克莫司個(gè)體化用藥中最重要的影響因素。CYP3A5基因是導(dǎo)致個(gè)體間CYP3A5蛋白差異表達(dá)的主要原因,CYP3A5基因分型結(jié)果對(duì)他克莫司的合理用藥來(lái)說(shuō)有重要參考意義。為了評(píng)估各大實(shí)驗(yàn)室對(duì)CYP3A5基因的檢測(cè)結(jié)果的一致性及準(zhǔn)確性,本研究制備了用于他克莫司CYP3A5基因突變個(gè)體化檢測(cè)的質(zhì)控物,并評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力,以提高CYP3A5基因分型檢測(cè)在臨床的合理應(yīng)用。方法:選取涵蓋常見(jiàn)的已知CYP3A5基因多態(tài)性的細(xì)胞株10株,采用Sanger測(cè)序法驗(yàn)證其多態(tài)性位點(diǎn)。驗(yàn)證通過(guò)后將10株細(xì)胞系進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)和基因組DNA的大量提取、稀釋和分裝。向參加室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的各實(shí)驗(yàn)室發(fā)放制備的質(zhì)控品,1周后回收回報(bào)表并對(duì)各實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),對(duì)檢測(cè)報(bào)告進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)室CYP3A5基因Sanger測(cè)序結(jié)果均符合預(yù)期。共有33家實(shí)驗(yàn)室參與本研究并回報(bào)數(shù)據(jù),檢測(cè)的靈敏度為95.9%（285/297個(gè)檢測(cè);95%置信區(qū)間:93.0–97.9%）,特異度為95.3%（346/363;95%置信... 

【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各細(xì)胞系擴(kuò)增片段電泳圖

圖 3-2 本實(shí)驗(yàn)室 10 株細(xì)胞系 Sanger 測(cè)序結(jié)果注：A. GM17289，第170號(hào)位點(diǎn)為AG型；B. GM16654，172號(hào)位點(diǎn)為GG型；C. GM17240，173 號(hào)位點(diǎn)為 GG 型；D. GM17215，170 號(hào)位點(diǎn)為 GG 型；E. GM16699，第 174 號(hào)位點(diǎn)為GG 型；F. GM 19178，第 169 號(hào)位點(diǎn)為 AA 型；G. GM 23275，第 169 號(hào)位點(diǎn)為 AA 型；H. GM10847，第 168 號(hào)位點(diǎn)為 GG 型；I. GM 11839，第 168 號(hào)位點(diǎn)為 AG 型；J. GM 12003，第 171號(hào)位點(diǎn)為 AG 型。3.1.2.2 部分參與實(shí)驗(yàn)室 CYP3A5 分型結(jié)果除個(gè)別實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)分型錯(cuò)誤之外，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的分型結(jié)果均正確，少數(shù)實(shí)驗(yàn)室在結(jié)果報(bào)告單中回報(bào)了 C1701 號(hào)樣本 CYP3A5 基因分型的結(jié)果圖，其檢測(cè)結(jié)果與本研究預(yù)期的基因型一致，如圖 3-3 及圖 3-4，提示本研究制備的質(zhì)控物在各臨床和商業(yè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)中得到進(jìn)一步驗(yàn)證。

圖 3-3 某臨床實(shí)驗(yàn)室 C1701 號(hào)樣本 Sanger 測(cè)序結(jié)果圖 3-4 某臨床實(shí)驗(yàn)室 C1701 號(hào)樣本焦磷酸測(cè)序結(jié)果3.2 室間質(zhì)量評(píng)價(jià)調(diào)查結(jié)果3.2.1 參與實(shí)驗(yàn)室與檢測(cè)方法在 33 家參與實(shí)驗(yàn)室中，有 15 家實(shí)驗(yàn)室屬于臨床實(shí)驗(yàn)室，其余 18 家實(shí)驗(yàn)室


本文編號(hào)：3407358