目的:他克莫司是器官移植病人抗排斥治療中最為常用的免疫抑制劑。細胞色素P450 3A5（CYP3A5）是他克莫司個體化用藥中最重要的影響因素。CYP3A5基因是導致個體間CYP3A5蛋白差異表達的主要原因,CYP3A5基因分型結(jié)果對他克莫司的合理用藥來說有重要參考意義。為了評估各大實驗室對CYP3A5基因的檢測結(jié)果的一致性及準確性,本研究制備了用于他克莫司CYP3A5基因突變個體化檢測的質(zhì)控物,并評價各實驗室的檢測能力,以提高CYP3A5基因分型檢測在臨床的合理應(yīng)用。方法:選取涵蓋常見的已知CYP3A5基因多態(tài)性的細胞株10株,采用Sanger測序法驗證其多態(tài)性位點。驗證通過后將10株細胞系進行擴大培養(yǎng)和基因組DNA的大量提取、稀釋和分裝。向參加室間質(zhì)量評價的各實驗室發(fā)放制備的質(zhì)控品,1周后回收回報表并對各實驗室的檢測結(jié)果進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計,對檢測報告進行評估。結(jié)果:本實驗室CYP3A5基因Sanger測序結(jié)果均符合預(yù)期。共有33家實驗室參與本研究并回報數(shù)據(jù),檢測的靈敏度為95.9%（285/297個檢測;95%置信區(qū)間:93.0–97.9%）,特異度為95.3%（346/363;95%置信... 

【文章來源】：湖南師范大學湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各細胞系擴增片段電泳圖

圖 3-2 本實驗室 10 株細胞系 Sanger 測序結(jié)果注：A. GM17289，第170號位點為AG型；B. GM16654，172號位點為GG型；C. GM17240，173 號位點為 GG 型；D. GM17215，170 號位點為 GG 型；E. GM16699，第 174 號位點為GG 型；F. GM 19178，第 169 號位點為 AA 型；G. GM 23275，第 169 號位點為 AA 型；H. GM10847，第 168 號位點為 GG 型；I. GM 11839，第 168 號位點為 AG 型；J. GM 12003，第 171號位點為 AG 型。3.1.2.2 部分參與實驗室 CYP3A5 分型結(jié)果除個別實驗室出現(xiàn)分型錯誤之外，大多數(shù)實驗室的分型結(jié)果均正確，少數(shù)實驗室在結(jié)果報告單中回報了 C1701 號樣本 CYP3A5 基因分型的結(jié)果圖，其檢測結(jié)果與本研究預(yù)期的基因型一致，如圖 3-3 及圖 3-4，提示本研究制備的質(zhì)控物在各臨床和商業(yè)實驗室的檢測中得到進一步驗證。

圖 3-3 某臨床實驗室 C1701 號樣本 Sanger 測序結(jié)果圖 3-4 某臨床實驗室 C1701 號樣本焦磷酸測序結(jié)果3.2 室間質(zhì)量評價調(diào)查結(jié)果3.2.1 參與實驗室與檢測方法在 33 家參與實驗室中，有 15 家實驗室屬于臨床實驗室，其余 18 家實驗室


本文編號：3407358