目的考察新型微管抑制劑2-甲氧基-5-（4-（3,4,5-三家氧基苯基）-1,3-硒唑-5-基）苯胺[2-methoxy-5-（4-（3,4,5-trimethoxyphenyl）-1,3-selenazol-5-yl）aniline,Yf9b]對多種人源性腫瘤細胞的抗腫瘤活性,并研究Yf9b抑制人宮頸癌Hela細胞增殖的機制。方法采用MTT法考察Yf9b對多種腫瘤細胞的增殖抑制作用。免疫熒光染色觀察Yf9b與康普瑞�。╟ombretastatin A-4,CA-4）對微管的抑制作用。流式細胞技術考察Yf9b與CA-4對Hela細胞周期的影響,并考察Yf9b誘導Hela細胞凋亡的情況。結(jié)果 Yf9b的作用時間與劑量依賴性地抑制Hela細胞增殖,半數(shù)抑制濃度（IC50）為（42.9±2.7）nmol·L-1。Yf9b同母體化合物CA-4一樣能抑制微管聚合,將Hela細胞阻滯在G2/M期,并最終誘導細胞凋亡。結(jié)論 Yf9b是一種新型微管抑制劑,能夠誘導Hela細胞G2/M期阻滯和凋亡。 

【文章來源】：沈陽藥科大學學報. 2017,34(01)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

康普瑞丁(1)和Yf9b(2)的化學結(jié)構(gòu)式

細胞24h，觀察到微管松散，并且細胞不能維持原有的形態(tài)。與母體化合物CA-4類似，Yf9b(80nmol·L－1)處理Hela細胞24h，觀察到微管斷裂成小點，彌散分布在細胞質(zhì)中，且細胞核凝聚、固縮(圖3中標尺=0.5μmol·L－1)。這些結(jié)果表明，Yf9b同CA-4一樣能夠抑制微管聚合，是一種潛在的微管靶向抑制劑。A—CellviabilitywasdeterminedbyMTTassayinHelacellstreatedwithvariousconcentrationsofYf9bforindicatedtimeperi-ods;B—HelacellsweretreatedwithYf9b(80nmol·L－1)orCA-4(60nmol·L－1)for0-48h.Morphologicalchangeswereob-servedunderphasecontrastmicroscope(scalebar=0.5μm)Fig．2Yf9binhibitstheproliferationofHelacells圖2Yf9b能抑制Hela細胞的增殖Fig．3Yf9binducesmicrotubuledisruptioninHelacells．Changesofcytoskeletonorganizationwereobservedbyconfo-calmicroscopyinHelacellstreatedwithYf9b(60nmol·L－1)orCA4(80mol·L－1)for24h．Microtubuleswerelabeledwithaprimarymouseanti-α-tubulinantibodyandFITC-conjugatedgoatanti-mouseIgG(green)andthenucleiwerestainedwithDAPI(blue)圖3Yf9b能破壞Hela細胞的微管形態(tài)。Yf9b(60nmol·L－1)或CA4(80mol·L－1)作用于Hela細胞24h后，用α-tu-bulin鼠源一抗和FITC連接的綠色熒光山羊抗鼠的二抗標記微管，DAPI藍色染料標記細胞核，在共聚焦顯微鏡下觀察細胞骨架的變化74沈陽藥科大學學報第34卷

結(jié)果表明，同母體化合物CA-4類似，Yf9b時間和劑量依賴的誘導Hela細胞阻滯在G2/M期，并隨著時間的增加誘導細胞凋亡。Fig．4CA-4inducesG2/MphasearrestandapoptosisofHelacellsinaconcentration-andtime-dependentmanner．ThecellcycledistributionofHelacellswasmeasuredbyflowcytometrywithPIstainingaftertreatmentwithCA-4(0－120nmol·L－1)for12horCA-4(60nmol·L－1)for0-48h.ＲepresentativefigureswereshowninFig．4A，andtheper-centageofHelacellsinspecificcellcyclecompartmentswasquantifiedasFig．4B圖4CA-4能時間和劑量依賴的誘導Hela細胞G2/M期周期阻滯和凋亡。CA-4(0～120nmol·L－1)作用于Hela細胞12h或者CA-4(60nmol·L－1)作用于細胞0～48h后，收集細胞，用PI細胞核染料染色，流式細胞術分析細胞周期的變化。原始峰形圖見圖4A，各細胞周期比例統(tǒng)計圖見圖4B第1期徐靜雯等:新型微管抑制劑Yf9b能夠誘導Hela細胞G2/M期阻滯和凋亡75


本文編號：3389577