發(fā)布時間：2021-08-18 22:58

　　近年來,將化療藥物和光敏劑整合至多功能的納米載體中,以獲得更優(yōu)異的抗腫瘤療效,同時降低化療藥物對正常組織的毒副作用,已經(jīng)成為腫瘤治療領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。本研究借助天然紅細(xì)胞膜的優(yōu)異生物學(xué)特性,應(yīng)用納米共擠出工藝和配體修飾策略,構(gòu)建了一種具有長循環(huán)和腫瘤靶向的新型光熱響應(yīng)性紅細(xì)胞膜納米囊泡雙載藥遞釋系統(tǒng)（DIRNPs）。該系統(tǒng)可特異性定位于腫瘤組織,釋放化療藥物并對近紅外線刺激迅速響應(yīng),可實(shí)現(xiàn)腫瘤化療和熱療的優(yōu)勢結(jié)合,達(dá)到提升協(xié)同療效的目的。本文主要研究內(nèi)容如下:采用納米沉積技術(shù)制備了負(fù)載雙藥（阿霉素和吲哚菁綠）的聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）納米粒,通過外層包被天然紅細(xì)胞膜并表面修飾靶向性配體（DSPE-PEG2000-FA）和長循環(huán)配體（DSPE-PEG2000）,應(yīng)用納米擠出技術(shù)最終構(gòu)建了具有光熱響應(yīng)性的紅細(xì)胞膜納米囊泡雙載藥遞釋系統(tǒng)（DIRNPs）。該納米載藥系統(tǒng)平均粒徑為158.4±2.6 nm,表面電位為-5.79 mV,藥物包封率為61.78±1.37%（阿霉素）和62.4±3.73%（吲哚菁綠）。研究結(jié)果表明,DIRNPs體系具有良好的光熱轉(zhuǎn)換效率,經(jīng)近紅外激光（1.5 ... 

【文章來源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

光熱響應(yīng)性紅細(xì)胞膜納米囊泡雙載藥遞釋系統(tǒng)的構(gòu)建和治療機(jī)制圖

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文122.3結(jié)果和討論2.3.1阿霉素的含量測定方法專屬性考察：PLGA溶解性較差，為了破壞納米粒充分提取藥物，嘗試了多種破壞溶劑，經(jīng)對比發(fā)現(xiàn)乙腈可破壞PLGA基質(zhì)，并沉淀紅細(xì)胞膜蛋白，同時加入酸性溶液后可將微脫鹽的阿霉素酸化，最終選擇用乙腈：2%磷酸=10:9溶液作為溶劑破壞納米粒。將各測定樣品破壞提取后的上清液進(jìn)行熒光掃描，結(jié)果如圖2-1（A）所示。結(jié)果顯示激發(fā)波長為490nm，發(fā)射波長為550nm時，PLGA材料和紅細(xì)胞膜及配體修飾基團(tuán)不會干擾阿霉素的含量測定，方法的專屬性良好。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：以阿霉素濃度為橫坐標(biāo)，其熒光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo)繪制濃度-熒光強(qiáng)度曲線。圖2-2（B）結(jié)果顯示阿霉素在0.5~6.0μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，線性方程為y=28.98164x+5.32108（R2=0.9998）。圖2-1（A）鹽酸阿霉素和各制劑的全波長掃描圖譜，(B)鹽酸阿霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。精密度和回收率：將低中高三個濃度的DOX溶液連續(xù)測定三天，其日內(nèi)和日間精密度的RSD值及納米粒中DOX的回收率測定結(jié)果如表2-1所示,均符合測定要求。表2-1DOX精密度和回收率（n=5）C（μg/mL)RSDofintra-dayRSDofinter-dayAbsoluterecovery0.81.78%4.68%92.34±1.21%41.42%1.28%85.74±1.22%80.31%0.45%84.46±0.76%2.3.2吲哚菁綠的含量測定方法專屬性考察：將吲哚菁綠和各含吲哚菁綠納米制劑經(jīng)有機(jī)試劑破壞后的上清液進(jìn)行紫外-可見全波長掃描，圖2-2（A）為其全波長掃描結(jié)果，結(jié)果顯示測定

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文13波長為780nm時，PLGA和紅細(xì)胞膜及各配體修飾基團(tuán)并不會干擾藥物吲哚菁綠的含量測定，此方法的專屬性良好，因此可以確定吸收波長為780nm。ICG的標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:以系列ICG濃度為橫坐標(biāo)，ICG的OD值為縱坐標(biāo)繪制濃度-吸光值曲線。圖2-2（B）結(jié)果顯示ICG在0.5～4.0μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，線性方程為y=0.21392x-0.01532（R2=0.99958）。圖2-2吲哚菁綠和各制劑的全波長掃描圖譜（A）；吲哚菁綠標(biāo)準(zhǔn)曲線圖（B）2.3.3DNPs的制備及工藝考察本文采用改進(jìn)的乳化溶劑揮發(fā)法——納米沉積技術(shù)制備載藥納米粒。納米沉積法的原理是將水溶性溶劑與另一脂溶性溶劑混合在一起作為油相，再將要包載的藥物溶解或者分散于這一混合油相中，納米沉積技術(shù)突出的特點(diǎn)是重復(fù)性好，得到的納米粒粒徑大小均勻，包封率高[76]。本文將聚合物PLGA與模型藥物DOX攪拌制成單乳，采用探頭超聲進(jìn)一步減小乳滴半徑，超聲之后室溫條件下連續(xù)攪拌乳液使丙酮和二氯甲烷充分?jǐn)U散進(jìn)入連續(xù)相，并通過連續(xù)相和空氣的界面蒸發(fā)，充分去除有機(jī)溶劑，使納米粒緩慢固化，再經(jīng)過清洗、離心超濾得到成品載藥納米�；鞈乙�。對工藝參數(shù)的單因素考察結(jié)果見表2-2。有機(jī)溶劑影響：二氯甲烷脂溶性強(qiáng)可以減少阿霉素在水中的分配比，從而提高納米粒包封率，并且二氯甲烷沸點(diǎn)低，揮發(fā)快，可使聚合物快速沉淀包載藥物，而丙酮水溶性好，藥物在油相和水相可以很好地分散，制備的納米粒粒徑會比較校在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用二氯甲烷作為有機(jī)相溶劑時，納米粒的載藥量和包封率較高，分別為8.616%、86.16%，但同時納米粒粒徑較大且納米粒分布不均勻（131.1nm，PDI=0.204），而單用丙酮作為油相溶劑時粒徑較�。�100.7nm），但是載藥量和包封率較低（LC%=4.257%，EE%=42.57%?


本文編號：3350785