目的探討氯胺酮提高星形膠質(zhì)細(xì)胞抗氧化應(yīng)激水平的作用及分子機(jī)制。方法氯胺酮（50μmol/L）處理人星形膠質(zhì)細(xì)胞（HA1800）后,分別使用比色法、WST-1法及鉬酸胺法檢測谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）和過氧化氫酶（CAT）活力等氧化應(yīng)激指標(biāo)的改變。Western blot檢測轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）、蛋白組乙�；蚄AT6B蛋白水平。免疫熒光染色檢測乙�；胶蚇rf2在星形膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)及定位。RT-PCR檢測氯胺酮對KAT6B基因的mRNA和circRNA表達(dá)的影響。KAT6B基因siRNA轉(zhuǎn)染沉默基因表達(dá),復(fù)合氯胺酮處理,檢測Nrf2、蛋白質(zhì)乙�；�、GSHPx、T-SOD和CAT水平。結(jié)果 50μmol/L氯胺酮處理12 h可顯著提高HA1800細(xì)胞GSH-Px、T-SOD和CAT活力（P <0.05）。50μmol/L氯胺酮處理3,6,12,24 h,HA800細(xì)胞內(nèi)Nrf2、乙酰化和KAT6B的表達(dá)均明顯增加（P <0.05）,且以12 h最明顯。免疫熒光結(jié)果顯示,與0μmol/L比較,50μmol/L氯胺酮處理1... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,51(08)

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氯胺酮對HA800細(xì)胞抗氧化應(yīng)激酶活力的影響

50μmol/L氯胺酮處理HA1800細(xì)胞后，結(jié)果顯示Nrf2、KAT6B和乙�；骄@著提高(Nrf2:F(4,10)=93.53,P<0.000 1;KAT6B:F(4,10)=43.79,P<0.000 1;乙�；�:F(4,10)=40.51,P<0.000 1，見圖2)。免疫熒光結(jié)果分析也發(fā)現(xiàn)與0μmol/L比較，50μmol/L氯胺酮處理星形膠質(zhì)細(xì)胞12 h，乙酰化表達(dá)明顯增加(P=0.032 0，見圖3);使用50μmol/L氯胺酮處理HA1800細(xì)胞12 h,Nrf2蛋白聚集于細(xì)胞核周圍(見圖4)，提示該蛋白出現(xiàn)核轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。圖3 免疫熒光染色顯示氯胺酮對HA1800細(xì)胞乙�；磉_(dá)的影響

圖2 50μmol/L氯胺酮作用不同時(shí)間對HA1800細(xì)胞Nrf2、KAT6B及乙酰化蛋白表達(dá)的影響圖4 氯胺酮調(diào)節(jié)Nrf2蛋白在HA1800細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位


本文編號：3347223