目的:抑制細(xì)胞核苷酸代謝以促進(jìn)細(xì)胞凋亡是癌癥治療的一個(gè)重要方向。尋求高效低毒的化療藥物,延長患者生存期,是當(dāng)代藥物研發(fā)的主要目標(biāo)。胸苷酸合酶（Thymidylate synthase,TS）作為細(xì)胞DNA合成起始與修復(fù)中的關(guān)鍵限速酶,在細(xì)胞復(fù)制旺盛部位表達(dá)較高,直接影響細(xì)胞增殖與代謝過程。當(dāng)TS活性受到抑制,直接影響細(xì)胞周期進(jìn)程,阻止DNA修復(fù),最終誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。TS在癌組織與癌旁健康組織具有明顯的表達(dá)差異,使其成為化療藥物研發(fā)的經(jīng)典靶點(diǎn)之一。傳統(tǒng)的TS抑制劑副作用較多,因而開發(fā)具有新型結(jié)構(gòu)且高效低毒的TS抑制劑,具有重要的醫(yī)學(xué)意義。研究方法:本研究主要分為三部分:1.提取并結(jié)合目前臨床應(yīng)用最廣泛的兩種類型TS抑制劑的關(guān)鍵藥效團(tuán),設(shè)計(jì)并合成一系列新型TS抑制劑（A系列化合物）,通過MTT法進(jìn)行活性篩選以及藥物選擇指數(shù)（SI）進(jìn)行評(píng)估,并驗(yàn)證其抗癌機(jī)制。2.進(jìn)一步定向結(jié)構(gòu)優(yōu)化,設(shè)計(jì)并合成一系列具有多重作用的TS抑制劑（B系列化合物）。通過體外TS測(cè)定與MTT初步篩選,以及構(gòu)效關(guān)系研究,獲得具有最佳活性的化合物;通過分子對(duì)接研究,研究其在TS（PDB:IJUJ）活性口袋內(nèi)可能的作用方式;采... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：233 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

TS的表達(dá)特點(diǎn)與作用機(jī)制（A）從TCGA數(shù)據(jù)庫中篩選和比較腫瘤組織和正常組織中TS表達(dá)水平

本研究的實(shí)驗(yàn)流程示意圖

中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文30具有繼續(xù)深入研究的價(jià)值。圖1-3.化合物10l與PTX抑制A549細(xì)胞增殖能力的比較3.4化合物10l對(duì)A549細(xì)胞凋亡的影響TS在癌細(xì)胞中過度表達(dá)，TS抑制劑可以抑制DNA的合成和修復(fù)。只要DNA結(jié)構(gòu)不完整，就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[26]。根據(jù)MTT研究的結(jié)果，化合物10l可以有效抑制癌細(xì)胞的增殖，特別是對(duì)于A549細(xì)胞。在本研究中，選擇化合物10l并評(píng)估其對(duì)A549細(xì)胞生長的抑制機(jī)制。為了確定抗增殖和細(xì)胞死亡是否與凋亡相關(guān)，將A549細(xì)胞用不同濃度的化合物10l（0μM，0.5μM，1μM，1.5μM，3μM）處理24小時(shí)，然后收集并用AnnexinV-FITC/碘化丙啶（PI）染色。流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示每種濃度的細(xì)胞凋亡率分別為2.3％，8.5％，12.5％，22.1％和39.4％（圖1-4）。隨著濃度的增加，A549細(xì)胞凋亡率明顯增加，其中早期凋亡率分別為1.2％，6.9％，9.8％，19.6％和35.5％。提示化合物10l可通過誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡來抑制細(xì)胞增殖，其結(jié)果具有顯著差異（P<0.01）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MDM2拮抗劑對(duì)p53野生型急性髓系白血病細(xì)胞株殺傷作用機(jī)制探討[J]. 鄧素琪,賀伶俐,趙金榮,鄧漫漫,史鵬程,徐兵.  中華腫瘤防治雜志. 2018(07)



本文編號(hào)：3347045