目的:制備穿膜肽GGPFV修飾的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體,對其處方進行優(yōu)化,并初步評價其對乳腺癌細胞的體外毒性。方法:采用薄膜分散法和硫酸銨水化法,將柔紅霉素和薯蕷皂苷包載其中,在表面以聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺2000(DSPE-PEG₂₀₀₀)-GGPFV修飾,制備GGPFV修飾的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體。以包封率為指標,采用Box-Behnken響應面法優(yōu)化處方中水化體積、膽固醇用量和柔紅霉素用量;測定按最優(yōu)處方制備的3批脂質體的包封率。比較柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體、GGPFV修飾的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體和空白脂質體作用后對人乳腺癌MDA-MB-435S細胞存活率的影響。結果:最優(yōu)處方為水化體積5 mL、膽固醇4 mg、蛋黃卵磷脂22 mg、柔紅霉素0.55 mg、薯蕷皂苷0.85 mg、DSPE-PEG₂₀₀₀3.5 mg、DSPE-PEG₂₀₀₀-GGPFV 2 mg。所制3批脂質體中,柔紅霉素的包封率為（96.21±1.54）%,薯蕷皂苷的包封率為（95.39±2.48）%。體外細胞毒性試驗顯示,GG... 

【文章來源】：中國藥房. 2020,31(21)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

高效液相色譜圖

根據(jù)表2結果，通過Design Expert 8.0.6軟件得到了Y的擬合方程：Y=46.480 1-8.522 5A-1.011 7B+159.423 3C+1.087 9AB+3.326 7AC+4.730 0BC+0.349 6A2-0.104 7B2-173.460 0C2(R2=0.918 2,P<0.05）。由此表明，該擬合模型可較好地反映響應值Y的變化，可用于篩選GGPFV修飾的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體的最佳處方。對上述擬合模型進行方差分析，結果見表3。由表3可知，B、C、AB、BC、B2、C2項對響應值Y具有顯著影響（P<0.05），而A、AC、A2項對其無顯著影響（P>0.05）。固定其中任一因素水平為0，即可生成其余2個因素對包封率影響的等高線圖（圖2）和響應面圖（圖3）。由圖2、圖3可見，在固定磷脂用量、柔紅霉素與薯蕷皂苷摩爾比的情況下，B和C對響應值Y的影響較大，而A對其無顯著影響。根據(jù)本課題組前期研究結果以及上述處方優(yōu)化結果，將GGPFV修飾的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體最優(yōu)處方確定為水化體積5 m L、膽固醇4 mg、EPC 22 mg、柔紅霉素0.55 mg、薯蕷皂苷0.85 mg,DSPE-PEG20003.5 mg、DSPE-PEG2000-GGPFV 2 mg。依照該處方平行制備3批GGPFV修飾的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體，并測定其包封率。結果顯示，柔紅霉素的包封率為（96.21±1.54）%，預測值為98.05%，相對誤差為1.91%；薯蕷皂苷的包封率為（95.39±2.48）%，預測值為82.71%，相對誤差為13.29%。另對按上述方法（不加DSPE-PEG2000-GGPFV）制備的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體的包封率進行了測定，結果顯示柔紅霉素的包封率為（91.38±2.53）%，薯蕷皂苷的包封率為（92.01±1.86）%，表明GGPFV修飾對兩藥的包封率無明顯影響。

根據(jù)本課題組前期研究結果以及上述處方優(yōu)化結果，將GGPFV修飾的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體最優(yōu)處方確定為水化體積5 m L、膽固醇4 mg、EPC 22 mg、柔紅霉素0.55 mg、薯蕷皂苷0.85 mg,DSPE-PEG20003.5 mg、DSPE-PEG2000-GGPFV 2 mg。依照該處方平行制備3批GGPFV修飾的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體，并測定其包封率。結果顯示，柔紅霉素的包封率為（96.21±1.54）%，預測值為98.05%，相對誤差為1.91%；薯蕷皂苷的包封率為（95.39±2.48）%，預測值為82.71%，相對誤差為13.29%。另對按上述方法（不加DSPE-PEG2000-GGPFV）制備的柔紅霉素/薯蕷皂苷脂質體的包封率進行了測定，結果顯示柔紅霉素的包封率為（91.38±2.53）%，薯蕷皂苷的包封率為（92.01±1.86）%，表明GGPFV修飾對兩藥的包封率無明顯影響。2.5 不同脂質體制劑對人乳腺癌MDA-MB-435S細胞的抑制作用


本文編號：3342016