伴隨著當(dāng)今社會(huì)人們的快節(jié)奏生活,由于膽固醇攝入過(guò)量引發(fā)的心腦血管疾病日益高發(fā)并嚴(yán)重威脅人類健康和生命。藥物治療是當(dāng)前有效醫(yī)治方式,但伴隨著一系列副作用且效果不穩(wěn)定,微生態(tài)制劑輔助藥物治療是一種安全有效的降血清膽固醇手段。本論文從生活在海平面300米以深大型海洋哺乳動(dòng)物柏式中喙鯨內(nèi)臟中分離出一株具高效降膽固醇功能的乳酸菌HJ-S2,從生長(zhǎng)、益生、安全三方面特性對(duì)目標(biāo)菌株進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)研究,優(yōu)化其發(fā)酵條件,從不同角度探討其體外降解機(jī)制,最后構(gòu)建高脂小鼠模型評(píng)估其在體內(nèi)發(fā)揮的作用,以期為開發(fā)新型功能微生態(tài)制劑提供理論參考。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:（1）菌株的分離篩選及性能研究。采用傳統(tǒng)乳酸菌篩選法聯(lián)合鄰苯二甲醛法從喙鯨內(nèi)臟中得到一株體外膽固醇降解率達(dá)48.82±0.21%的乳酸菌,且分泌膽鹽水解酶,經(jīng)鑒定為植物乳桿菌,并命名為HJ-S2（NCBI登錄號(hào):MK248728;CGMCC No:17720）,構(gòu)建了其進(jìn)化發(fā)育樹。對(duì)目標(biāo)菌株HJ-S2進(jìn)行三方面性能研究,首先研究了菌株HJ-S2生長(zhǎng)特性,測(cè)定了菌株的生長(zhǎng)曲線,HJ-S2具一定產(chǎn)酸能力且在衰亡期42 h時(shí)體外膽固醇降解率達(dá)到最高為45.06%。其次... 

【文章來(lái)源】：自然資源部第三海洋研究所福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

內(nèi)源性膽固醇合成途徑Fig.1-1Synthesispathwayofendogenouscholesterol

第二章降膽固醇乳酸菌的篩選鑒定、性能研究及機(jī)制初探194.2菌株的BSH酶特性BSH酶是一種催化水解結(jié)合膽鹽為氨基酸和游離膽鹽（膽酸）的酶[86]，乳桿菌屬和雙歧桿菌屬調(diào)節(jié)血清膽固醇水平的方式即是通過(guò)產(chǎn)BSH酶直接影響宿主膽鹽代謝[74]。Jones[87]及Lambert等[88]對(duì)益生菌L.plantarum80和L.plantarumWCFS1的研究發(fā)現(xiàn)，菌體所分泌的BSH酶在降解過(guò)程中扮演重要角色。菌株所產(chǎn)BSH酶能分解膽鹽成膽酸，與Ca2+結(jié)合成白色沉淀，可作為依據(jù)判斷菌株是否具BSH活性的依據(jù)。對(duì)菌株HJ-S2進(jìn)行BSH酶活測(cè)定，結(jié)果如圖2-1所示，HJ-S2孔外圈出現(xiàn)白色沉淀，表明菌株具有BSH活性。圖2-1菌株BSH酶活檢測(cè)結(jié)果Fig.2-1Theresultofbilesalthydrolaseactivity4.3菌株的鑒定結(jié)果4.3.1形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果菌株HJ-S2在MRS平板上培養(yǎng)后，觀察菌株形態(tài)如圖2-2中A所示，HJ-S2菌落直徑0.5~2.0mm，乳白色，規(guī)則圓形，有突起。菌株染色后的菌體形態(tài)如圖2-2中B所示，長(zhǎng)3.0~8.0μm，寬0.9~1.2μm，圓端直桿狀，單個(gè)或成鏈狀，為無(wú)芽孢的革蘭氏陽(yáng)性桿菌。

第二章降膽固醇乳酸菌的篩選鑒定、性能研究及機(jī)制初探20圖2-2菌株HJ-S2的菌落和菌體形態(tài)圖（×1000）Fig.2-2MorphologyofHJ-S2colonyandbacteria注：A、B分別為菌落和菌體的形態(tài)圖。4.3.2API50CH鑒定結(jié)果按3.4.2方法對(duì)菌株HJ-S2進(jìn)行糖類發(fā)酵鑒定。結(jié)果如表2-3所示。將49種糖類發(fā)酵結(jié)果在APIPlus庫(kù)中進(jìn)行歸納分析，鑒定為植物乳桿菌（Lactobacillusplantarum），將其命名為植物乳桿菌HJ-S2。表2-3乳酸菌HJ-S2API50CH鑒定結(jié)果Table2-3TheAPI50CHresultofstrainHJ-S2碳水化合物HJ-S2碳水化合物HJ-S2碳水化合物HJ-S2碳水化合物HJ-S2碳水化合物HJ-S2D-阿拉伯糖－D-龍膽二糖+D-蜜二糖－木糖醇－甲基-D-吡喃甘露糖苷－L-阿拉伯糖+D-甘露糖+D-海藻糖+水楊苷+甲基-D-吡喃葡萄糖苷－D-巖藻糖－D-來(lái)蘇糖－D-塔格糖－山梨醇－甲基-β-D-吡喃木糖苷－L-巖藻糖－D-核糖+D-乳糖－S甘露醇+七葉靈檸檬酸鐵銨+D-木糖－L-山梨糖－D-果糖+甘露醇－2-酮基-葡萄糖酸鹽－L-木糖－L-鼠李糖－D-蔗糖+菊糖－5-酮基-葡萄糖酸鹽+D-葡萄糖+D-麥芽糖+衛(wèi)茅醇－淀粉+D-側(cè)金盞花醇I－D-半乳糖+D-棉子糖－苦杏仁甙+糖原+N-乙酰-葡糖胺－D-土倫糖+D-松三糖+赤藻糖醇－ARBULIN+葡萄糖酸鉀+D-纖維二糖+注：＋為陽(yáng)性；-為陰性。


本文編號(hào)：3321169