【研究目的】探討多菌靈致小鼠睪丸支持細(xì)胞損傷作用的可能機(jī)制及MAPK信號通路在其中的作用,從而為多菌靈的危害防治提供理論依據(jù)�！狙芯糠椒ā窟x用小鼠睪丸支持細(xì)胞系（TM4）建立損傷模型,以不同濃度的多菌靈（1μM、2μM、5μM、10μM、20μM）作用于小鼠睪丸支持細(xì)胞24h、48h和72h,將含0.1%DMSO細(xì)胞組設(shè)為對照組,采用MTT法檢測細(xì)胞的存活率。以不同濃度的多菌靈（0μM、1μM、2μM、5μM）作用于TM4細(xì)胞48h,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平,qRT-PCR法檢測細(xì)胞Bax mRNA和Bcl-2 mRNA的表達(dá)水平。對數(shù)期TM4細(xì)胞,分別給予2μM ERK抑制劑U0126、5μM JNK抑制劑SP600125和10μM P38 MAPK抑制劑SB203580預(yù)處理1h,實驗分為四組:溶劑對照組、抑制劑組、5μM多菌靈組和抑制劑+5μM多菌靈組,采用MTT法檢測細(xì)胞存活率,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期分布和細(xì)胞凋亡情況,Western blot技術(shù)法檢測細(xì)胞ERK、JNK、P38 MAPK及其磷酸化蛋白的表達(dá)水平。【研究結(jié)果】1、多菌靈對TM4細(xì)... 

【文章來源】：濟(jì)南大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

多菌靈的結(jié)構(gòu)式

多菌靈對TM4細(xì)胞存活率的影響

多菌靈對TM4細(xì)胞周期分布影響的流式檢測圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微囊藻毒素-LR對睪丸支持細(xì)胞活性及凋亡基因表達(dá)的影響[J]. 易丹,張豐泉,李超鋒,段麗菊,程學(xué)敏,陳姜,崔留欣,張慧珍.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2011(24)
[2]多菌靈對大鼠睪丸發(fā)育和生精功能影響的研究[J]. 于功昌,謝琳,劉衍忠,王筱芬.  中華男科學(xué)雜志. 2009(06)
[3]細(xì)胞周期檢查點的分子機(jī)制[J]. 吳家睿.  生物工程進(jìn)展. 1999(04)



本文編號：3319322