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MAPK信號(hào)通路在多菌靈致小鼠睪丸支持細(xì)胞損傷中作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-03 08:49
  【研究目的】探討多菌靈致小鼠睪丸支持細(xì)胞損傷作用的可能機(jī)制及MAPK信號(hào)通路在其中的作用,從而為多菌靈的危害防治提供理論依據(jù)。【研究方法】選用小鼠睪丸支持細(xì)胞系(TM4)建立損傷模型,以不同濃度的多菌靈(1μM、2μM、5μM、10μM、20μM)作用于小鼠睪丸支持細(xì)胞24h、48h和72h,將含0.1%DMSO細(xì)胞組設(shè)為對(duì)照組,采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的存活率。以不同濃度的多菌靈(0μM、1μM、2μM、5μM)作用于TM4細(xì)胞48h,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平,qRT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞Bax mRNA和Bcl-2 mRNA的表達(dá)水平。對(duì)數(shù)期TM4細(xì)胞,分別給予2μM ERK抑制劑U0126、5μM JNK抑制劑SP600125和10μM P38 MAPK抑制劑SB203580預(yù)處理1h,實(shí)驗(yàn)分為四組:溶劑對(duì)照組、抑制劑組、5μM多菌靈組和抑制劑+5μM多菌靈組,采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期分布和細(xì)胞凋亡情況,Western blot技術(shù)法檢測(cè)細(xì)胞ERK、JNK、P38 MAPK及其磷酸化蛋白的表達(dá)水平�!狙芯拷Y(jié)果】1、多菌靈對(duì)TM4細(xì)... 

【文章來源】:濟(jì)南大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

MAPK信號(hào)通路在多菌靈致小鼠睪丸支持細(xì)胞損傷中作用的研究


多菌靈的結(jié)構(gòu)式

多菌靈,細(xì)胞存活率,細(xì)胞周期


多菌靈對(duì)TM4細(xì)胞存活率的影響

多菌靈,流式,組圖


多菌靈對(duì)TM4細(xì)胞周期分布影響的流式檢測(cè)圖

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]微囊藻毒素-LR對(duì)睪丸支持細(xì)胞活性及凋亡基因表達(dá)的影響[J]. 易丹,張豐泉,李超鋒,段麗菊,程學(xué)敏,陳姜,崔留欣,張慧珍.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2011(24)
[2]多菌靈對(duì)大鼠睪丸發(fā)育和生精功能影響的研究[J]. 于功昌,謝琳,劉衍忠,王筱芬.  中華男科學(xué)雜志. 2009(06)
[3]細(xì)胞周期檢查點(diǎn)的分子機(jī)制[J]. 吳家睿.  生物工程進(jìn)展. 1999(04)



本文編號(hào):3319322

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