目的:腫瘤的存在已經(jīng)嚴(yán)重威脅到人類的健康以及生活質(zhì)量。我們通過研究炭角菌屬真菌Xylaria sp.DO1801的主要次生代謝產(chǎn)物（Secondary metabolites,SM）體內(nèi)外抗腫瘤作用,希望能夠?qū)M用于改善目前的腫瘤治療方法;并且對藥物處理后黑色素瘤細(xì)胞B16的代謝變化進(jìn)行探究,以求從中尋找出與抗腫瘤活性相關(guān)的代謝機(jī)制。方法:（1）首先,我們用核磁共振對從Xylaria sp.DO1801中提取分離得到的主要次級代謝產(chǎn)物,進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)檢測;（2）MTT法檢測SM對多種腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用,并且通過在C57小鼠的右側(cè)腋窩處皮下接種B16和LLC細(xì)胞構(gòu)建小鼠皮下移植瘤模型,評價四種SM對腫瘤生長的影響;（3）細(xì)胞松弛素處理后,檢測正常胰腺細(xì)胞HPDE6-C7和人胚腎上皮細(xì)胞HKC的細(xì)胞增殖以及正常小鼠脾細(xì)胞中CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺的細(xì)胞比例變化,以此評價藥物的細(xì)胞毒性和細(xì)胞選擇性;（4）計算細(xì)胞松弛素聯(lián)合紫杉醇給藥后對藥物敏感的乳腺癌細(xì)胞MCF-7的IC50（半數(shù)抑制濃度）... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

從炭角菌屬Xylariasp.DO1801真菌中提取的主要次級代謝產(chǎn)物，經(jīng)核磁共振鑒定這四種次級代謝產(chǎn)物分別為19，20-環(huán)氧細(xì)胞松弛素Q（ECQ）（A）；細(xì)胞松弛素Q（CQ）

23圖 2：四種主要次級代謝產(chǎn)物對不同腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用。不同劑量的細(xì)胞松弛素（0~50μm）處理腫瘤細(xì)胞后用 MTT 法檢測結(jié)腸癌細(xì)胞 CT-26（A）、黑色素瘤細(xì)胞 B16（B）肺癌細(xì)胞 LLC（C）、肝癌細(xì)胞 HepG2（D）、各種胰腺癌細(xì)胞 SW1990（E）、ASPC-1（F）Bxpc-3（G）、Panc02（H）的增殖情況。數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)。

華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文3.3 主要次級代謝產(chǎn)物的細(xì)胞選擇性作用為了考察細(xì)胞松弛素處理后腫瘤細(xì)胞的增殖抑制并非僅是由于細(xì)胞毒作用引起的，因此我們進(jìn)一步的檢測了四種細(xì)胞松弛素對正常胰腺細(xì)胞 HEDP-C6 和人源胚腎上皮細(xì)胞 HKC 的增殖影響（圖 3A，B），結(jié)果發(fā)現(xiàn)四種細(xì)胞松弛素處理正常細(xì)胞后細(xì)胞增殖有輕微的抑制，但并不顯著。進(jìn)一步地，我們將正常小鼠的脾臟制成單細(xì)胞懸液，用細(xì)胞松弛素處理 48 小時后，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測脾細(xì)胞中 CD3+CD4+或 CD3+CD4+陽性細(xì)胞的比例初步評價藥物對免疫細(xì)胞的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)（圖 3C），四種細(xì)胞松弛素并未明顯改變脾細(xì)胞中 CD4+或 CD8+細(xì)胞的比例。以上的結(jié)果說明四種細(xì)胞松弛素主要針對惡性增殖的腫瘤細(xì)胞發(fā)揮增殖抑制作用，對正常細(xì)胞的影響較小，具有一定程度的細(xì)胞選擇性。


本文編號：3312116