目的:觀察WNT5A對(duì)血管平滑肌細(xì)胞（Vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖的影響,繼而探討WNT5A及其信號(hào)通路抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖的作用機(jī)制。方法:采用慢病毒載體構(gòu)建穩(wěn)定過(guò)表達(dá)WNT5A的VSMCs細(xì)胞株。采用MTT,平板克隆以及Edu等方法檢測(cè)WNT5A對(duì)VSMCs增殖的影響。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)WNT5A對(duì)細(xì)胞周期的影響。免疫熒光和免疫共沉淀驗(yàn)證WNT5A和Ror2的空間共定位以及結(jié)合情況。MTT,平板克隆,Edu以及流式細(xì)胞術(shù)等方法檢測(cè)si RNA敲低Ror2對(duì)VSMCs增殖。采用Western-blot檢測(cè)WNT5A/Ror2/PKC/P53/Cyclin D1信號(hào)通路等相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1)WNT5A在血清培養(yǎng)條件下的VSMCs中的表達(dá)明顯降低,且呈時(shí)間依賴(lài)性。過(guò)表達(dá)和外源性重組WNT5A抑制VSMCs的增殖。si RNA敲低WNT5A能夠促進(jìn)VSMCs的增殖。2)WNT5A能上調(diào)P53,下調(diào)Cyclin D1的表達(dá)進(jìn)而抑制VSMCs細(xì)胞周期G0向G1期的轉(zhuǎn)化。3)WNT5A能上調(diào)受體Ror2的表達(dá),并且WNT5A與Ror2之間存在空間... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
主要英文縮略語(yǔ)
主要實(shí)驗(yàn)儀器
摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 WNT5A對(duì)VSMCs增殖的影響
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
    2.3 結(jié)果與分析
    2.4 討論與結(jié)論
        2.4.1 討論
        2.4.2 結(jié)論
第三章 WNT5A對(duì)VSMCs增殖影響的作用機(jī)制研究
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 WNT5A對(duì)VSMCs細(xì)胞周期的影響
        3.3.2 WNT5A 對(duì)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白及其調(diào)控蛋白的影響
        3.3.3 WNT5A 通過(guò)與其受體 Ror2 的作用抑制 VSMCs 的增殖
    3.4 討論與結(jié)論
        3.4.1 討論
        3.4.2 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)（References）
碩士期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Wnt5a與炎癥信號(hào)在炎癥性疾病中的交叉互動(dòng)[J]. 劉征,吳洪濤,倪亞光,尹艷桃,李順祥,廖端芳,覃麗.  生理學(xué)報(bào). 2015(04)



本文編號(hào)：3065111