目的:對注射用胸腺法新中與胸腺法新主峰較難分離的雜質結構進行鑒定并測定7家企業(yè)樣品中雜質的含量。方法:結合使用基質輔助激光解析飛行時間串聯(lián)質譜（MALDI-TOF/TOF MS）和二維-超高效液相色譜-四級桿飛行時間質譜（2D-UPLC-Q-TOF）測定雜質分子量并對結構進行鑒定,同時采用與合成的雜質對照品通過保留時間比對進行結構確認,并且通過HPLC方法對雜質含量進行測定。結果:測得胸腺法新主峰前后5個雜質分別為3個異構體雜質（[D-Ser1]-胸腺法新、[D-Asp15]-胸腺法新、[D-Asn28]-胸腺法新）、1個缺失肽雜質（[Des-Ala3]-胸腺法新）和1個水解雜質（[Asp28]-胸腺法新）,雜質含量為0.1%～1.0%。結論:使用兩種質譜技術對雜質結構進行鑒定,結果可靠,本研究為完善質量標準以及制定合理的雜質限度提供了依據。 

【文章來源】：中國藥師. 2020,23(07)

【文章頁數】：6 頁

【部分圖文】：

雜質Ⅱ的一級與二級質譜圖

有關物質典型圖譜

使用質譜檢測時得到的是單同位素峰的相對分子質量，根據計算雜質峰Ⅰ的單同位素相對分子質量約為3 036.5Da。胸腺法新的平均相對分子質量為3 108.2Da，而其單同位素峰的相對分子質量為3 106.5Da，雜質峰Ⅰ與胸腺法新相比相對分子質量少約71Da，推測肽序在偶聯(lián)過程少連接1個丙氨酸(殘基理論相對分子質量71.07)。在胸腺法新序列中共有3個丙氨酸，且其中2個是相連的，故可能的肽序有2種:肽序1為SDAVDTSSEITTKDLKEKKEVVEEAEN，肽序2為SDAAVDTSSEITTKDLKEKKEVVEEEN。對其進行二級質譜圖采集，并將譜圖與肽序1和肽序2產生的理論碎片離子進行比對。根據匹配結果，與肽序1的匹配度較高，可匹配上21個氨基酸，由此推測雜質Ⅰ的結構為SDAVDTSSEITT-KDLKEKKEVVEEAEN，即胸腺法新在3位或4位缺失一個丙氨酸。在質譜圖中除主峰外，還存在一些其他雜峰，根據其分子量推測，質荷比約為2 994.6的峰應為雜質Ⅰ脫去乙�；a生的峰;質荷比約為3 107.6的峰應為胸腺法新或其同分異構體的峰，這可能是由于在該色譜條件下收集的餾分峰里含有與胸腺法新相對分子質量一致的同分異構體峰所致;質荷比約為3 089.7的峰為3 107.6峰脫去一分子水產生的峰;質荷比約為3 048.5的峰應該是3 107.6峰脫去一分子水和乙�；a生的峰。因此，雜質Ⅰ中主要為3位或4位缺失一個丙氨酸的胸腺法新，并含有一定量胸腺法新的同分異構體。圖3 雜質Ⅱ的一級與二級質譜圖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]胸腺肽α1的功能研究進展[J]. 鄭立運.  中國處方藥. 2014(07)
[2]HPLC法對胸腺法新及其制劑中雜質檢查[J]. 程磊,唐洋明,殷果,畢開順,陳曉輝,王鐵杰.  藥物分析雜志. 2013(11)
[3]胸腺肽α1的特征與功能綜述[J]. 高德民,王鳳山.  中國生化藥物雜志. 2007(02)

碩士論文
[1]胸腺法新的質量分析研究[D]. 田妮娜.蘭州大學 2015



本文編號：3035863