目的:制備以可溶微針貼片為釋藥載體的蜂毒肽可溶微針貼片治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠模型。通過各項(xiàng)微針評價(jià)考察其穿刺皮膚的性能;通過模擬熒光藥物的體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)考察其經(jīng)皮給藥后藥物的擴(kuò)散行為;通過皮膚愈合試驗(yàn)和對炎癥細(xì)胞增值抑制的實(shí)驗(yàn)考察其經(jīng)皮給藥的安全性;通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探究其抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的抗炎效應(yīng)。以期能為新型關(guān)節(jié)炎治療劑型的開發(fā)奠定基礎(chǔ),為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病的治療提供新的思路和策略。方法:1.通過兩步干燥法制備蜂毒肽可溶微針貼片,對三種備選輔料進(jìn)行處方研究。利用光學(xué)顯微鏡、掃描電子顯微鏡觀察其外觀形態(tài);建立可溶微針貼片中蜂毒肽含量測定方法,探究其在輔料溶液中的穩(wěn)定性和微針貼片中蜂毒肽的含量;離體鼠皮的穿刺實(shí)驗(yàn)探究微針輔料的比例。2.通過處方篩選得到本實(shí)驗(yàn)制備微針?biāo)璧妮o料及配置濃度,對最優(yōu)處方制備得的可溶微針貼片進(jìn)行表面規(guī)整度、載藥量、穿刺性能、皮內(nèi)溶蝕、體內(nèi)藥物擴(kuò)散、皮膚愈合等方面的綜合評價(jià)。3.以SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對象,制備佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠模型。以蜂毒肽（Mel）為治療藥物,觀察實(shí)驗(yàn)各組AA大鼠的相關(guān)體征變化、關(guān)節(jié)腫脹情況、大鼠腿部骨質(zhì)流失情況、滑膜治療情況、相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)等指標(biāo)。旨在... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

蜂毒肽的分子結(jié)構(gòu)

17取出旋轉(zhuǎn)180度放置，3000g力下離心2min。離心結(jié)束后將模具取出刮去模具上方表面的制針原液，置于干燥箱中干燥12h，再加120μl基層原液，相同條件下再次離心，離心結(jié)束后立即放入干燥箱中，室溫干燥完全后脫模即得。圖1-3微針的制備過程Figure1-3FabricationprocessofDMNPs1.2.2.5Mel在不同輔料溶液中的穩(wěn)定性精密稱取蜂毒肽10mg，置于50ml容量瓶中，用流動(dòng)相A溶解并定容至刻度，配制濃度為200μg/ml的Mel貯備液。精密稱取DEX，CS，PVP，HA各100mg分別置于50ml容量瓶中，用流動(dòng)相A溶解并定容至刻度，配制濃度為2mg/ml的輔料貯備液。按照表1-5配制藥物輔料混合溶液，按1.1.2.1項(xiàng)下條件進(jìn)樣。分別于不同時(shí)間點(diǎn)（0h，1h）每個(gè)樣品連續(xù)進(jìn)樣三次，取平均值。表1-5混合溶液樣品配制方法Table1-5Preparationmethodsofsample1.2.2.6Mel與不同輔料制備微針的外觀形態(tài)精密稱取50mgmelittin粉末于1ml去離子水中充分溶解成50mg/ml的藥物原液，分別稱取300mgDEX、CS、HA粉末于1ml藥物原液中，將未溶脹ExcipientsDrug:ExcipientVolume(mL）Mel（200μg/mL）Dex（2mg/mL）CS（2mg/mL）PVP（2mg/mL）HA（2mg/mL）DexCSPVPHA1:101:101:101:1011111111Mix

56圖1蜂毒肽的分子結(jié)構(gòu)蜂毒肽在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的研究中所表現(xiàn)出來的這些藥理活性，使其成為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療藥物開發(fā)的極有潛力的活性成分。然而，蜂毒肽屬于生物大分子多肽，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，口服易被胃腸蛋白酶破壞分解，臨床使用受到很大限制[9]。目前，在臨床前研究蜂毒肽對于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的文獻(xiàn)報(bào)道中多采用皮下注射給藥。注射給藥是生物利用度較高的藥物遞送方式，可以避免口服給藥的諸多缺陷，但也存在自身的一些缺陷：注射給藥通常需要經(jīng)過特定培訓(xùn)專業(yè)技術(shù)人員；注射過程會造成給藥部位疼痛，并有出血、感染等風(fēng)險(xiǎn)，因而患者順應(yīng)差；注射后廢棄針頭等還可能造成二次危害[10,11]。市售蜂毒肽制劑為涂抹劑，經(jīng)皮給藥安全可靠，患者順應(yīng)性好，可以克服注射給藥存在的問題，然而，皮膚角質(zhì)層的屏障作用，使大分子多肽難以有效透過皮膚，傳遞進(jìn)入體內(nèi)，導(dǎo)致生物利用度極低[12]，無法達(dá)到治療的效果。如果能為蜂毒肽找到一種合適的藥物遞送方式，既具有注射給藥的高生物利用度又兼有經(jīng)皮給藥的方便安全順應(yīng)性好的特點(diǎn)，必將大大有利于蜂毒肽類生物大分子抗關(guān)節(jié)炎藥物的開發(fā)，將類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療推上一個(gè)新的臺階�？扇芪⑨樈�(jīng)皮給藥系統(tǒng)就是這樣一種給藥方式。3.治療RA藥物的劑型使用天然產(chǎn)品治療疾病的主要挑戰(zhàn)是由于生物利用度低和藥效的喪失，并且需要消耗大量天然產(chǎn)物以實(shí)現(xiàn)所需的治療效果。劑量的增加會導(dǎo)致不必要的毒性[13-15]。因此，需要用于遞送天然產(chǎn)物的新方法以改善治療功效并降低毒性。納米技術(shù)在這方面是一種有吸引力的方法[16,17]。目前，有許多類型的納米顆粒已被批準(zhǔn)用于臨床，并且這些納米顆粒用于治療和診斷[17,18]。將生物活性天然產(chǎn)物包封到納米顆粒中可以增加它們的體內(nèi)穩(wěn)定性，延長它們的循環(huán)時(shí)間，并允許它

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]可系統(tǒng)性給藥的蜂毒肽脂質(zhì)納米顆粒及其抗黑色素瘤作用研究[D]. 黃川.華中科技大學(xué) 2015
[2]基于蜂毒肽的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎基因治療研究[D]. 李晶華.第四軍醫(yī)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]蜂毒活性肽的分離純化及生理功能研究[D]. 孫敏.濟(jì)南大學(xué) 2017
[2]蜂毒制劑“神蜂精”對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠治療作用的研究[D]. 龔雁.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[3]基于介孔硅的蜂毒肽控制釋放研究[D]. 楊小浪.福建農(nóng)林大學(xué) 2014



本文編號：2983129