染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白1（CRM1）也稱為核輸出蛋白1（XPO1）,是治療人類腫瘤的一個(gè)有前途的靶點(diǎn)。CRM1在胃癌、卵巢癌、胰腺癌、骨肉瘤、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和宮頸癌等腫瘤組織中表達(dá)過高,且與預(yù)后不良有關(guān)。目前,尚不清楚CRM1是否參與了人胃癌的病理生理過程,以及靶向抑制CRM1是否能成為治療胃癌的新型治療方式。近年來,許多研究表明CRM1抑制劑都具有α,β-不飽和δ-內(nèi)酯環(huán),包括Leptomycin B、Ratjadone等化合物。在本課題中,我們探討了M-5對(duì)胃癌細(xì)胞的抗腫瘤作用以及其可能的機(jī)制。主要結(jié)果如下:1.用MTT法檢測(cè)M-5對(duì)兩種胃癌細(xì)胞（MGC803和HGC27）和胃正常上皮細(xì)胞（GES1）的抗增殖活性。我們發(fā)現(xiàn)M-5以濃度依賴的方式抑制兩種胃癌細(xì)胞（MGC803和HGC27）的增殖,但對(duì)胃正常上皮細(xì)胞（GES1）基本上無細(xì)胞毒性。2.為了證實(shí)線粒體在M-5誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中所發(fā)揮的作用,使用JC-1檢測(cè)線粒體膜電位。結(jié)果表明,M-5使MGC803和HGC27細(xì)胞中的線粒體膜電位下降。蛋白質(zhì)免疫印跡法分析表明,在胃癌細(xì)胞中加入M-5,會(huì)引起B(yǎng)ax水平升高,同時(shí)Bcl-2和Bcl-x... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CRM1轉(zhuǎn)運(yùn)貨物蛋白的核輸出示意圖

化合物 d（M-5）通過以下幾個(gè)步驟合成[94-97]：物 a 的合成：我們將 2-異丙基-5-甲基苯酚加入到含有 NaOH 的水 10 min，然后將形成鈉鹽的體系緩慢加入到含有環(huán)氧氯丙烷的圓加入相轉(zhuǎn)移催化劑四丁基溴化銨（TBAB），在室溫下攪拌 12 h，C 檢測(cè)，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)產(chǎn)物通過乙酸乙酯萃取，得到的萃取液濃中間體 a�；衔� b 的合成[98]：將中間體 a 加入到含四氫呋喃的圓加入 CuI 催化劑，在惰性氣體保護(hù)下加入乙烯氯化鎂，在-10℃-0攪拌 2 h，TLC 檢測(cè)，反應(yīng)完畢，將體系加入到含飽和氯化銨的錐0 min，硅藻土過濾，乙酸乙酯萃取，濃縮，柱層析得到中間體 b。成：將中間體 b 加入到含無水二氯甲烷的圓底燒瓶中，然后加入三酸鎂，最后緩慢加入丙烯酰氯，30 min 滴加完畢，攪拌 2 h，TLC 檢萃取，濃縮，柱層析，得到中間體 c。化合物 d 的合成[99-101]：將 Gru入到 50 mL 的兩口瓶中，再加入無水二氯甲烷，惰性氣體保護(hù)，含中間體 c 的二氯甲烷溶液，50℃-60℃條件，回流 6 h，TLC 檢測(cè)干法裝柱，得到目標(biāo)化合 d。

圖 1M-5 的化學(xué)結(jié)構(gòu)示意圖細(xì)胞（MGC803 與 HGC27）癌細(xì)胞（MGC803 與 HGC27)以采用 MTT 法。M-5 按照 5 個(gè)濃度803、HGC27 和 GES1 細(xì)胞 24 h 得出，M-5 對(duì)兩種胃癌細(xì)胞都有GC803 細(xì)胞對(duì) M-5 更為敏感。M活率降低 54.10%，HGC27 細(xì)胞.29%。但是，GES1 細(xì)胞在 10 μ%。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Expression of CRM1 and CDK5 shows high prognostic accuracy for gastric cancer[J]. Yu-Qin Sun,Jian-Wei Xie,Hong-Teng Xie,Peng-Chen Chen,Xiu-Li Zhang,Chao-Hui Zheng,Ping Li,Jia-Bin Wang,Jian-Xian Lin,Long-Long Cao,Chang-Ming Huang,Yao Lin.  World Journal of Gastroenterology. 2017(11)

碩士論文
[1]LMB促進(jìn)TFEB入核的分子機(jī)制研究[D]. 陳太琪.華東師范大學(xué) 2014
[2]ACA對(duì)CRM1依賴的出核運(yùn)輸抑制作用的初步研究[D]. 卓心明.廈門大學(xué) 2007



本文編號(hào)：2981638