Survivin是凋亡抑制蛋白家族（IAP）中蛋白分子量最小的成員,結(jié)構(gòu)獨(dú)特,具有抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂的雙重功能。Survivin基因在正常的組織細(xì)胞中幾乎不表達(dá),但是廣泛表達(dá)于各種惡性腫瘤中。臨床研究表明抑制Survivin蛋白的功能可以在一定程度上抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),同時(shí)增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)抗腫瘤化療藥物的敏感性,并且與病人的預(yù)后息息相關(guān)。因此,對(duì)Survivin蛋白的降解機(jī)制的研究可以為開發(fā)新型抗腫瘤藥物提供新思路�；诖�,首先我們利用CRL E3泛素連接酶的小分子抑制劑MLN4924對(duì)多種乳腺癌和肺癌細(xì)胞系進(jìn)行藥物處理,發(fā)現(xiàn)Survivin蛋白不僅隨MLN4924劑量和時(shí)間依賴性增加,還會(huì)引起半衰期延長(zhǎng);并且通過免疫共沉淀實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)CRL組成成分中的RING蛋白R(shí)BX1和RBX2均與Survivin蛋白具有相互作用,證實(shí)Survivin蛋白在細(xì)胞內(nèi)是通過泛素-蛋白酶體途徑降解的,并且是CRLE3泛素連接酶的底物。其次,通過免疫共沉淀實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)CRL組成成分中CUL1蛋白與Survivin蛋白具有相互作用;隨后我們進(jìn)一步檢測(cè)了CUL1與Survivin蛋白的關(guān)系,結(jié)果... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１泛素－蛋白酶體途徑［３］??－

在哺乳動(dòng)物中已發(fā)現(xiàn)并報(bào)道的丨ＡＰ家族成員有８?jìng)�(gè)，分別是ＮＡＩＰ／ＢＩＲＣ１，??ｃＡＩＰｌ／ＢＩＲＣ２，?ｃＡＩＰ２／ＢＩＲＣ３，?ＸＡＩＰ／ＢＩＲＣ４，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ／ＢＩＲＣ５，?ＢＲＵＣＥ／ＢＩＲＣ６，??ｌｉｖｉｎ／ＢＩＲＣ７和ＩＬＰ２／ＢＩＲＣ８［１（Ｕ１］（圖１．２）。ＩＡＰｓ的結(jié)構(gòu)域主要有三個(gè)，分別是ＢＩＲ，??ＲＩＮＧ和ＣＡＲＤ結(jié)構(gòu)域。所有的丨ＡＰ家族成員中ＢＩＲ結(jié)構(gòu)域的數(shù)目至少有１個(gè)，這是??ＩＡＰ抑制細(xì)胞調(diào)亡所必須的結(jié)構(gòu)域。ＢＩＲ?（ｂａｃｕｌｏｖｉｒａｌｌＡＰｒｅｐｅａｔ）結(jié)構(gòu)域約含７０個(gè)??氨基酸，其中有一個(gè)保守的半胱氨酸和組氨酸區(qū)域（Ｃｘ２Ｃｘ６Ｗｘ３Ｄｘ５Ｈｘ６Ｃ）ｎ２］。ＲＩＮＧ??結(jié)構(gòu)域含有一個(gè)鋅指樣的結(jié)構(gòu)單元，可以與兩個(gè)鋅原子形成配位鍵ｎ（）］。ＣＡＲＤ??Ｃｃａｓｐａｓｅ?ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ?ｄｏｍａｉｎ）結(jié)構(gòu)域位于ＢＩＲ和ＲＩＮＧ結(jié)構(gòu)域之間，目前只在ｃＡＩＰｌ??和ｃＡＩＰ２中發(fā)現(xiàn)此結(jié)構(gòu)域。相關(guān)研究表明，ＢＩＲＣ１，?２，?３，?４，?７，?８可以與ｃａｓｐａｓｅ－３，??７，?９結(jié)合，從而抑制ｃａｓｐａｓｅｓ的活化；而ＢＩＲＣ５和ＢＩＲＣ６可以直接與ｃａｓｐａｓｅ－３，７發(fā)??生相互作用，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂素和抑制細(xì)胞凋亡的功能［１３］。??Ｓｕｒｖｉｖｉｎ是１ＡＰ家族中蛋白分子量最小的成員

ＩＬＰ２?ＢＩＲＣ８?ＲＪ＼Ｇ?■■??圖１．２哺乳動(dòng)物中１ＡＰ家族成員的結(jié)構(gòu)［１８１??１．３?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與分布??Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因位于染色體１７ｑ２５上，由３個(gè)內(nèi)含子和４個(gè)夕卜顯子組成，從結(jié)構(gòu)上??看，氨基末端只含有一個(gè)保守的ＢＩＲ結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域直接與細(xì)胞凋亡效應(yīng)分子??ｃａｓｐａｓｅｓ相互作用，從而抑制細(xì)胞）周亡｜１９１�？⒒┒撕幸粋�(gè)ａ螺旋結(jié)構(gòu)，沒有ＲＩＮＧ??結(jié)構(gòu)域和ＣＡＲＤ結(jié)構(gòu)域｜１９＿２１１。目前已發(fā)現(xiàn)并報(bào)道了?５個(gè)人類Ｓｕｒｖｉｖｉｎ剪接異構(gòu)體：??Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２Ｂ，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－ＡＥｘ?３，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－３Ｂ，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２ａ，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－３ａ丨２２］（圖?１．３）?〇??其中，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２Ｂ多了部分外顯子，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－ＡＥｘ?３缺失外顯子３，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－３Ｂ有５??個(gè)外顯子，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２ａ只含兩個(gè)外顯子。所有的Ｓｕｒｖｉｖｉｎ異構(gòu)體在氨基端都保持同??一性，包括一些ＢＩＲ結(jié)構(gòu)域，但是在羧基端具有一定的差異［２３］。??Ｓｕｒｖｉｖｉｎ主要定位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中［２４１

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]凋亡相關(guān)基因survivin在子宮頸癌組織中的表達(dá)及其與bcl-2、p53基因表達(dá)相關(guān)性的初步研究[J]. 王梅,王冰,王曉麗,莫立平,任娟,李明眾.  中華婦產(chǎn)科雜志. 2001(09)



本文編號(hào)：2955965