目的將膜活性肽Marmelittin與泛素蛋白Ub融合表達并測定其抗腫瘤活性。方法構建pCold-TF-Ub-Marmelittin質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化到BL21（DE3）菌中進行誘導表達。篩選Marmelittin肽的最佳表達條件后并對Marmelittin肽進行純化。圓二色光譜測定Marmelittin肽的二級結構, CCK-8實驗和流式細胞術分析Marmelittin肽抗腫瘤活性及機制。結果 Marmelittin肽在表達菌為1.20 mmol·L^-1異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）誘導培養(yǎng)10 h時表達量最高。圓二色光譜測定Marmelittin肽為α-螺旋結構。CCK-8實驗測定Marmelittin肽對宮頸癌細胞株HeLa半數(shù)抑制濃度(IC₅₀)為（46.61±1.25）μg·mL^-1。流式細胞術檢測表明Marmelittin肽通過誘導凋亡方式殺傷Hela細胞。結論用泛素蛋白Ub為促溶標簽成功表達了Marmelittin肽并測定了其抗腫瘤活性,為后續(xù)抗腫瘤機制及應用研究提供了一定的基礎。 

【文章來源】：中國臨床藥理學雜志. 2020年22期 北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

pCold-TF-Ub-Marmelittin質(zhì)粒PCR鑒定結果

SDS-PAGE分析Marmelittin肽表達

對照組和用藥組(25,50,100 μg·mL-1)凋亡率分別為3.32%,24.78%,40.16%和89.81%。與對照組相比,各組均對HeLa細胞產(chǎn)生明顯誘導凋亡作用,見圖3。討 論

【參考文獻】：
期刊論文
[1]白頭翁皂苷D對宮頸癌細胞的抗增殖作用及與Wnt信號通路的關系[J]. 王冰,陳薇,張曉引,尹玲玲.  中國臨床藥理學雜志. 2019(21)
[2]蜂膠黃酮調(diào)控14-3-3σ蛋白表達對HER2 neu高表達人乳腺癌MDA-MB-453細胞增殖和凋亡的影響[J]. 張旭穎,史俊文.  中國臨床藥理學雜志. 2019(18)
[3]壁虎多肽混合物對HepG2細胞增殖及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激途徑的影響[J]. 段一夢,段冷昕,劉玲,郭夢麗,王兵兵,黃澤月,王建剛.  中國臨床藥理學雜志. 2018(02)
[4]胸腺肽α1對肺癌細胞株A549細胞凋亡的影響[J]. 劉道猴,夏曉東.  中國臨床藥理學雜志. 2016(19)



本文編號：2938879