非小細胞肺癌（non-small-cell lung cancer,NSCLC）約占肺癌的85%,是癌癥致死的主要原因之一。75%的患者發(fā)現(xiàn)時已處于中晚期,轉(zhuǎn)移后生存率較低,多在一年內(nèi)死亡。2004年,研究發(fā)現(xiàn)NSCLC與表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor,EGFR）突變有關(guān),之后作用于受體胞內(nèi)的酪氨酸激酶抑制劑（tyrosine kinase inhibitor,TKI）和作用于受體胞外的單克隆抗體（monoclonal antibody,mAb）被廣泛用于臨床治療。然而,TKI和mAb聯(lián)合應(yīng)用會導(dǎo)致一系列不良反應(yīng),嚴重時需中斷治療。本研究采用EGFR-TKI類藥物阿法替尼（afatinib,AFT）作為模型藥物,包載在脂質(zhì)體內(nèi),人鼠嵌合型抗體類藥物西妥昔單抗（cetuximab,CTX）作為靶頭修飾在脂質(zhì)體表面,旨在構(gòu)建主動靶向于NSCLC的新型遞藥系統(tǒng)。采用硫酸銨梯度法制備阿法替尼脂質(zhì)體（liposome,LP）,與巰基化的CTX共孵育制備免疫脂質(zhì)體（LP-CTX）。使用兩種NSCLC細胞系進行體外評價,以研究CTX-EGFR結(jié)合對... 

【文章來源】：煙臺大學山東省

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號說明
1 前言
    1.1 非小細胞肺癌的研究進展
        1.1.1 非小細胞肺癌的概述
        1.1.2 非小細胞肺癌的臨床治療現(xiàn)狀
    1.2 阿法替尼的研究進展
        1.2.1 阿法替尼的概述
        1.2.2 阿法替尼的臨床應(yīng)用
    1.3 西妥昔單抗的研究進展
        1.3.1 西妥昔單抗的概述
        1.3.2 西妥昔單抗的臨床應(yīng)用
    1.4 脂質(zhì)體的研究現(xiàn)狀
    1.5 免疫脂質(zhì)體的研究現(xiàn)狀
    1.6 課題設(shè)計思路
2 AFT-LP的制備
    2.1 儀器與試劑
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 材料和試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 制備工藝的選擇
        2.2.2 AFT含量測定方法的建立
        2.2.3 AFT-LP的純化方法
        2.2.4 不同制備工藝脂質(zhì)體包封率和粒徑的測定
        2.2.5 單因素考察
        2.2.6 響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 制備工藝的選擇
        2.3.2 測定方法的驗證
        2.3.3 AFT-LP的純化方法
        2.3.4 包封率方法的確立
        2.3.5 不同制備工藝脂質(zhì)體包封率和粒徑的測定
        2.3.6 單因素考察
        2.3.7 響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化法
        2.3.8 最優(yōu)處方的確立
    2.4 小結(jié)
3 LP-CTX的制備
    3.1 儀器與試劑
        3.1.1 實驗儀器
        3.1.2 材料和試劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 Traut’s試劑的測定方法
        3.2.2 CTX含量的測定方法
        3.2.3 CTX的巰基化
        3.2.4 LP-CTX的合成
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 Traut’s試劑的測定方法
        3.3.2 CTX含量的測定方法
        3.3.3 CTX的巰基化
        3.3.4 LP-CTX的合成
    3.4 小結(jié)
4 LP與 LP-CTX的表征
    4.1 儀器與試劑
        4.1.1 實驗儀器
        4.1.2 材料和試劑
    4.2 試驗方法
        4.2.1 形態(tài)、粒徑和Zeta電位的測定
        4.2.2 包封率與載藥量的測定
        4.2.3 體外釋放度的測定
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 形態(tài)、粒徑和Zeta電位的測定
        4.3.2 包封率與載藥量的測定
        4.3.3 體外釋放度的測定
    4.4 小結(jié)
5 LP-CTX的體外細胞評價
    5.1 儀器與試劑
        5.1.1 實驗儀器
        5.1.2 材料和試劑
    5.2 試驗方法
        5.2.1 細胞培養(yǎng)
        5.2.2 細胞毒性研究
        5.2.3 細胞攝取研究
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 細胞毒性研究
        5.3.2 細胞攝取研究
    5.4 小結(jié)
6 LC-MS/MS檢測方法的建立
    6.1 儀器與試劑
        6.1.1 實驗儀器
        6.1.2 材料和試劑
    6.2 實驗方法
        6.2.1 質(zhì)譜方法的建立
        6.2.2 液相方法的建立
        6.2.3 標準溶液、IS與 QC的制備
        6.2.4 血漿樣品預(yù)處理方法
        6.2.5 分析方法的驗證
    6.3 結(jié)果與討論
        6.3.1 質(zhì)譜方法的建立
        6.3.2 液相條件的建立
        6.3.3 分析方法的驗證
    6.4 小結(jié)
7 LP-CTX的體內(nèi)動物評價
    7.1 儀器與試劑
        7.1.1 實驗儀器
        7.1.2 材料和試劑
        7.1.3 實驗動物
    7.2 實驗方法
        7.2.1 大鼠體內(nèi)血藥濃度測定
        7.2.2 H1975 荷瘤小鼠模型的建立
        7.2.3 荷瘤小鼠體內(nèi)組織分布
        7.2.4 小動物活體成像研究
        7.2.5荷瘤小鼠腫瘤抑制實驗
    7.3 結(jié)果與討論
        7.3.1 大鼠體內(nèi)血藥濃度測定
        7.3.2 荷瘤小鼠體內(nèi)組織分布
        7.3.3 小動物活體成像研究
        7.3.4 荷瘤小鼠腫瘤抑制試驗
    7.4 小結(jié)
8 全文結(jié)論
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄
致謝



本文編號：2936514