人工合成制備的陽離子脂質(zhì)體作為一種重要的基因和藥物載體,具有很多優(yōu)點,但其對細(xì)胞的毒性作用機(jī)制尚不明確,嚴(yán)重影響其臨床應(yīng)用。該文對陽離子脂質(zhì)體是否通過誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng),進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞毒性的相關(guān)作用機(jī)制進(jìn)行了研究。實驗使用人肺癌細(xì)胞（NCI-H460）和人胚肺正常細(xì)胞（MRC-5）,采用CCK-8法、活性氧簇（ROS）熒光標(biāo)記形態(tài)學(xué)觀察、流式細(xì)胞術(shù)定量測定及活性氧簇自由基檢測等方法,研究對比了三種頭部結(jié)構(gòu)不同,連接鍵和疏水尾部均相同的陽離子脂質(zhì)體細(xì)胞毒性作用機(jī)制。這三種脂質(zhì)體分別由三肽頭部的N,N-雙十四烷氧酰胺乙基三聚鳥氨酸酰胺（CDO14）、單季銨鹽頭部的N,N-雙十四烷氧酰胺乙基-N,N-二甲基碘化銨（CDA14）和雙季銨鹽頭部的1,2-雙-[N-十四烷氧酰胺乙基-N,N-二甲基碘化銨]乙烷（CTA14）制備。研究結(jié)果表明,三種陽離子脂質(zhì)體誘導(dǎo)的超氧化物、過氧化氫（H₂O₂）、羥自由基（?OH）、一氧化氮（NO）和丙二醛（MDA）等ROS均與作用劑量呈正相關(guān),其中CDA14和CTA14高濃度處理組（0.10 μmol/L和0.20 ... 

【文章來源】：中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2020年05期

【文章頁數(shù)】：13 頁

【部分圖文】：

三種不同頭部的陽離子類脂結(jié)構(gòu)式

為了明確三種陽離子脂質(zhì)體對細(xì)胞存活率的影響,采用CCK-8法檢測不同濃度脂質(zhì)體作用NCI-H460細(xì)胞和MRC-5細(xì)胞24 h后的存活率。如圖4所示,在0.05 μmol/L(常規(guī)轉(zhuǎn)染濃度)下,兩種細(xì)胞的存活率與Ctrl相比無顯著差異,均在85%以上。在0.10 μmol/L時,對于NCI-H460細(xì)胞(圖4A),與Ctrl相比,CDO14無顯著差異,CDA14下降到70%,有顯著差異(P<0.05),而CTA14下降至60%以下,有極顯著差異(P<0.01);對于MRC-5細(xì)胞(圖4B),與Ctrl相比,CDO14和CDA14有顯著差異(P<0.05),而CTA14降低至60%以下,有極顯著差異(P<0.01)。當(dāng)濃度增加到0.20 μmol/L時(圖4A和圖4B),三種脂質(zhì)體對兩種細(xì)胞的存活率與Ctrl相比均有極顯著差異(P<0.01)。結(jié)果表明,在高濃度下,三種脂質(zhì)體對細(xì)胞存活率的影響均呈劑量依賴性,CDO14對細(xì)胞存活率的影響明顯小于CDA14和CTA14。圖3 三種陽離子脂質(zhì)體透射電鏡照片

三種陽離子脂質(zhì)體透射電鏡照片

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：2924959