本文關(guān)鍵詞：果膠—阿霉素大分子前藥基納米膠束傳遞體系的構(gòu)建及表征，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:設(shè)計、合成大分子前藥果膠-阿霉素偶合物(pectin-doxorubicin conjugates,PDC),并自組裝制備及表征果膠-阿霉素納米膠束體系(PDC-M),研究其體內(nèi)外緩控釋作用、毒性、生物相容性以及在小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)。方法:1.PDC的合成:通過酰胺縮合反應(yīng)將果膠化學(xué)鍵和到阿霉素上,得到目標(biāo)產(chǎn)物PDC偶合物,通過H1NMR和FTIR對結(jié)構(gòu)進行表征;2.PDC-M的制備和表征研究:利用果膠的高度親水性以及阿霉素(DOX)的疏水性,自組裝制備PDC-M,并通過單因素分析法研究反應(yīng)條件對納米膠束制備的影響;應(yīng)用掃描電鏡觀察表觀納米膠束形貌,采用納米粒度及Zeta電位分析儀表征納米粒徑大小、分布以及穩(wěn)定情況,紫外分光光度法(UV)表征納米體系的載藥量等;3.PDC-M的體外抗腫瘤及緩控釋研究:研究PDC-M在不同p H模擬條件下的體外釋藥性能;選取人HepG2肝癌細胞為細胞模型,采用CCK8法觀察DOX和PDC-M對其的增殖抑制作用;運用流式細胞儀測定人HepG2肝癌細胞對DOX和PDC-M的攝取情況;4.PDC-M的體外生物相容性研究:采用CCK8法觀察DOX和PDC-M處理ECs內(nèi)皮細胞后的細胞存活率;用2%的兔血紅細胞對DOX和PDC-M進行溶血性試驗;用牛血清白蛋白(BSA)對DOX和PDC-M進行蛋白吸附實驗;5.PDC-M的體內(nèi)藥代動力學(xué)的研究:采用尾靜脈注射給藥的方法,用HPLC測定血藥濃度,得出DOX及PDC-M的血藥濃度-時間曲線,用3P97計算DOX及PDC-M的藥動學(xué)參數(shù)。結(jié)果:所得果膠-阿霉素大分子前藥化學(xué)結(jié)構(gòu)經(jīng)H1NMR和FTIR確證;單因素分析法得出納米膠束最佳反應(yīng)條件:p H5.0,50℃,100rpm。PDC-M為表面光滑、粒徑均一的不規(guī)則球形納米膠束,平均粒徑為140nm左右;PDC-M的zeta電位值為-29.5mv,體系較為穩(wěn)定;UV法測得PDC-M的包封率和載藥率分別是57.82%±3.7%(n=3)以及23.852%±2.3%(n=3);體外不同p H條件下的釋放結(jié)果表明PDC-M具有一定的緩釋性能,抗增殖和流式結(jié)果進一步表明PDC-M有明顯的緩釋效果,且呈時間和劑量依賴性;細胞存活率實驗表明PDC-M較DOX相比有良好的細胞相容性和低毒性,此外,BSA吸附實驗以及溶血試驗進一步證實了這一點。體內(nèi)藥動學(xué)結(jié)果表明PDC-M在機體內(nèi)具有長循環(huán)效果,能降低毒副作用和提高生物利用度。結(jié)論:成功合成并制備了以果膠為親水外殼,阿霉素為疏水內(nèi)核的PDC納米膠束。該表面光滑、粒徑均一的不規(guī)則球形納米膠束具有一定的緩控釋作用,且呈濃度和劑量依賴性。此外,PDC納米膠束體系無毒且具有良好的生物相容性,能降低毒副作用,提高生物利用度,延長半衰期。
【關(guān)鍵詞】：PDC-M DOX 大分子前藥 殼-核膠束 藥物傳遞系統(tǒng) 緩釋
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R943
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-15
• 英文縮寫詞索引15-16
• 第1章 緒論16-20
• 第2章 果膠-阿霉素大分子前藥納米膠束的制備與理化特性表征20-30
• 2.1 主要材料與試劑20
• 2.2 主要儀器20-21
• 2.3 實驗方法21-24
• 2.3.1 果膠-阿霉素大分子前藥（PDC）的合成21
• 2.3.2 果膠-阿霉素大分子前藥納米膠束的制備（PDC-M）21-22
• 2.3.3 PDC的結(jié)構(gòu)表征22
• 2.3.4 PDC-M納米膠束體系的制備條件優(yōu)化22
• 2.3.5 PDC-M納米膠束體系的形貌表征22
• 2.3.6 PDC-M納米膠束體系的粒徑及Zeta電位測量22-23
• 2.3.7 PDC-M的載藥量和包封率的測定23-24
• 2.3.7.1 檢測波長的確定23
• 2.3.7.2 DOX溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制23
• 2.3.7.3 載藥量和包封率的測定23-24
• 2.4 結(jié)果與討論24-30
• 2.4.1 PDC的紅外圖譜(FTIR)分析24-25
• 2.4.2 PDC的核磁共振譜(H1NMR)分析25-26
• 2.4.3 PDC-M的優(yōu)化條件26
• 2.4.4 PDC-M的粒徑及zeta電位表征26
• 2.4.5 PDC-M的形貌表征26-27
• 2.4.6 PDC-M的載藥量和包封率27-29
• 2.4.6.1 檢測波長的確定27-28
• 2.4.6.2 DOX溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線28
• 2.4.6.3 載藥量和包封率28-29
• 2.4.7 討論29-30
• 第3章 果膠-阿霉素大分子前藥納米膠束體系的抗腫瘤和緩控釋效果研究30-44
• 3.1 主要材料試劑30-31
• 3.2 主要實驗儀器31
• 3.3 實驗方法31-35
• 3.3.1 PDC-M的體外釋放實驗31-32
• 3.3.1.1 不同p H條件下的波長檢測31
• 3.3.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制31-32
• 3.3.1.3 體外釋放實驗32
• 3.3.2 CCK8法檢測DOX以及PDC-M納米膠束體系對腫瘤細胞的增殖抑制作用32-35
• 3.3.2.1 主要溶液的配置32-33
• 3.3.2.2 細胞培養(yǎng)33-34
• 3.3.2.3 DOX以及PDC-M納米膠束體系對腫瘤細胞的增殖抑制作用34-35
• 3.3.3 流式細胞儀測定DOX和PDC-M的細胞攝取情況35
• 3.4 結(jié)果與討論35-44
• 3.4.1 PDC-M的體外釋放實驗35-39
• 3.4.1.1 檢測波長的確定35
• 3.4.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制35-37
• 3.4.1.3 體外釋放結(jié)果37-39
• 3.4.2 DOX以及PDC-M納米膠束體系對腫瘤細胞的增殖抑制作用39-40
• 3.4.3 DOX以及PDC-M的細胞攝取情況40-41
• 3.4.4 討論41-44
• 第4章 PDC-M的生物相容性研究44-54
• 4.1 主要材料與試劑44-45
• 4.2 主要實驗儀器45
• 4.3 實驗方法45-48
• 4.3.1 CCK8法檢測PDC-M納米膠束體系對內(nèi)皮細胞的生物相容性45-46
• 4.3.2 BSA法檢測PDC-M納米膠束體系的生物相容性46-47
• 4.3.2.1 檢測波長的確定46
• 4.3.2.2 DOX溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制46
• 4.3.2.3 蛋白吸附實驗46-47
• 4.3.3 溶血性實驗47-48
• 4.3.3.1 2%紅細胞混懸液的制備47
• 4.3.3.2 溶血率的測定47-48
• 4.4 結(jié)果與討論48-54
• 4.4.1 PDC-M納米膠束體系對內(nèi)皮細胞的生物相容性48-49
• 4.4.2 PDC-M納米膠束的BSA吸附率49-51
• 4.4.2.1 檢測波長的確定49
• 4.4.2.2 BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線49-50
• 4.4.2.3 BSA吸附率50-51
• 4.4.3 PDC-M納米膠束體系的溶血率測定51-52
• 4.4.4 討論52-54
• 第5章 PDC-M的體內(nèi)藥代動力學(xué)研究54-64
• 5.1 主要材料與試劑54
• 5.2 主要實驗儀器54-55
• 5.3 實驗方法55-57
• 5.3.1 阿霉素和柔紅霉素儲備液以及標(biāo)準(zhǔn)液的配制55
• 5.3.2 HPLC分析方法的建立55-56
• 5.3.2.1 色譜條件55
• 5.3.2.2 血漿樣品處理方法55-56
• 5.3.2.3 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線56
• 5.3.3 血藥濃度分析方法的評價56-57
• 5.3.3.1 方法專屬性56
• 5.3.3.2 回收率的測定56-57
• 5.3.3.3 精密度的測定57
• 5.3.4 PDC-M體內(nèi)藥代動力學(xué)評價57
• 5.4 結(jié)果與討論57-64
• 5.4.1 方法專屬性57-59
• 5.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線59
• 5.4.3 血藥濃度分析方法的評價59-60
• 5.4.4 SD大鼠體內(nèi)藥動學(xué)研究60-62
• 5.4.5 討論62-64
• 第6章 結(jié)論64-66
• 參考文獻66-72
• 綜述 Targeted Delivery Systems Based on Polymeric Nanoparticles for Biomedical Applications72-110
• Referances94-110
• 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果110-112
• 致謝112

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Laurence Lacaze;Michel Scotté;;Surgical treatment of intra hepatic recurrence of hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Hepatology;2015年13期

  本文關(guān)鍵詞：果膠—阿霉素大分子前藥基納米膠束傳遞體系的構(gòu)建及表征，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：292332