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運(yùn)用納米材料構(gòu)建新型生物傳感器特異性檢測(cè)體內(nèi)活性物質(zhì)

發(fā)布時(shí)間:2017-04-04 13:13

  本文關(guān)鍵詞:運(yùn)用納米材料構(gòu)建新型生物傳感器特異性檢測(cè)體內(nèi)活性物質(zhì),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:生物傳感器是一類特殊的傳感器,是將生物活性物質(zhì)(酶、抗原、抗體、細(xì)胞、核酸等)轉(zhuǎn)換為物理信號(hào),即聲、光、電等信號(hào)再進(jìn)行分析檢測(cè)的儀器。它具有選擇性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)易等特征。固載材料的選擇以及生物活性物質(zhì)的固定方法決定了傳感器的性能好壞,因此,將生物活性組分成功固定在電極表面,并保持良好生物活性,是生物傳感器在制備和研究過(guò)程中關(guān)注的焦點(diǎn);诖,我們利用氧化石墨烯/普魯士藍(lán)/氨基傒四甲酸復(fù)合物(GO/PB/PTC-NH2)、多壁碳納米管@殼聚糖復(fù)合物(MWCNTs@CS)和納米空心鉑(HPts)、納米金(AuNPs)等材料作為電極修飾的基底,運(yùn)用吸附、共價(jià)鍵和以及層層自組裝等生物固定方法,構(gòu)建生物傳感器測(cè)定體內(nèi)活性物質(zhì)葡萄糖和netrin1的含量水平。具體研究工作如下:1.基于氧化石墨烯/普魯士藍(lán)/傒四甲酸納米復(fù)合膜及納米空心鉑的葡萄糖傳感器的研究本研究旨在構(gòu)建操作簡(jiǎn)單的葡萄糖傳感器,即將合成好的納米復(fù)合物(氧化石墨烯/魯士藍(lán)/氨基傒四甲酸復(fù)合物)直接滴涂在處理好的玻碳電極表面,葡萄糖氧化酶(GOD)通過(guò)納米空心鉑的特殊結(jié)構(gòu)而固載到被修飾的玻碳電極表面。這個(gè)過(guò)程能夠防止GOD的滲漏,從而提高傳感器的靈敏度和穩(wěn)定性。我們采用了透射電子顯微鏡(TEM),傅里葉紅外光譜(FT-IR),電化學(xué)阻抗(EIS)、循環(huán)伏安法(CV),以及計(jì)時(shí)電流法(CA)對(duì)納米材料的結(jié)構(gòu)以及傳感器的性能表征。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建的安培型葡萄糖傳感器顯示出響應(yīng)時(shí)間短(5 s內(nèi)),在0.01±0.06 mM到5.23:±-0.04 mM范圍內(nèi)線性良好,檢測(cè)限為3.3 mM (S/N=3)。一些潛在的干擾物,如抗壞血酸(AA),L-半胱氨酸(L-Cys),多巴胺(DA)和乙醇,均未對(duì)我們的葡萄糖傳感器產(chǎn)生明顯干擾,表明我們的傳感器具有良好的特異性。用于檢測(cè)人血清中的葡萄糖,傳感器所表現(xiàn)出的優(yōu)良性能主要?dú)w功于納米空心鉑大的比表面積和良好的導(dǎo)電性。這種巧妙地將GO/PB/PTC-NH2納米復(fù)合膜結(jié)合納米空心鉑的優(yōu)良特性的方法,增強(qiáng)了葡萄糖傳感器的電化學(xué)行為,并且可以應(yīng)用于實(shí)際生物樣本的分析。2.基于碳納米管,硫堇和納米金修飾玻碳電極的netrinl免疫傳感器Netrinl,是心血管疾病的一種生物標(biāo)記物。本實(shí)驗(yàn)首次成功地構(gòu)建了一種基于經(jīng)預(yù)處理過(guò)的多壁碳納米管(p-MWCNTs)和層層自組裝方法的新型的和超靈敏的netrin1免疫傳感器。這種將具良好導(dǎo)電性的p-MWCNTs和操作簡(jiǎn)便的層層自組裝技術(shù)結(jié)合起來(lái),使得我們的免疫傳感器制備過(guò)程簡(jiǎn)單方便。納米金顆粒通過(guò)與硫堇之間的靜電吸附和共軛作用結(jié)合到修飾的電極表面。金納米顆粒不僅可以捕獲抗體,而且可以放大電化學(xué)信號(hào),因而增加了免疫傳感器的靈敏度。我們運(yùn)用了不同的技術(shù)表征材料的特性以及電極構(gòu)建的各步驟,包括交流阻抗法(EIS),循環(huán)伏安法(CV),紫外可見(jiàn)分光光度法(UV-vis),透射電子顯微鏡(TEM)以及X射線衍射光譜(XRD)。在優(yōu)化好的實(shí)驗(yàn)條件下,該傳感器在netrin1濃度為0.09到1800 pg/mL范圍內(nèi)呈良好線性,所得的檢測(cè)限為0.03 pg/mL (S/N=3)。另外,我們將檢測(cè)血清樣本所得的結(jié)果與經(jīng)典的ELISA結(jié)果比較,結(jié)果無(wú)明顯差異。這種滿意的結(jié)果使得它有望成為臨床上檢測(cè)netrin1的潛在替代方法,從而可以盡可能早的發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】:納米材料 新型生物傳感器 葡萄糖 netrin1
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R927;TP212.3
【目錄】:
  • 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
  • 中文摘要6-9
  • 英文摘要9-13
  • 前言13-17
  • 第一章 基于氧化石墨烯/普魯士藍(lán)/傒四甲酸納米復(fù)合膜及納米空心鉑的葡萄糖傳感器的研究17-34
  • 1 實(shí)驗(yàn)部分18-20
  • 2 結(jié)果與討論20-28
  • 3 結(jié)論28
  • 參考文獻(xiàn)28-34
  • 第二章 基于多壁碳納米管,硫堇和納米金修飾玻碳電極的netrin1免疫傳感器34-49
  • 1. 實(shí)驗(yàn)部分35-37
  • 2 結(jié)果與討論37-44
  • 3 結(jié)論44
  • 參考文獻(xiàn)44-49
  • 全文總結(jié)49-50
  • 文獻(xiàn)綜述50-55
  • 參考文獻(xiàn)52-55
  • 致謝55-56
  • 攻讀碩士期間發(fā)表論文56

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  本文關(guān)鍵詞:運(yùn)用納米材料構(gòu)建新型生物傳感器特異性檢測(cè)體內(nèi)活性物質(zhì),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



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