發(fā)布時(shí)間：2020-10-13 19:26

　　 癌癥已成為當(dāng)今威脅人類健康的重要因素。根據(jù)已掌握的研究和科學(xué)實(shí)驗(yàn)表明,癌細(xì)胞的生長、擴(kuò)散依賴于特定的生長因子和信號傳導(dǎo)通路,抑制該類生長因子或靶向性調(diào)控特定信號傳導(dǎo)通路可以有效阻止腫瘤細(xì)胞的血管新生和增殖,并促進(jìn)凋亡。藥物特異性作用于特定靶點(diǎn)已成為當(dāng)下治療癌癥的主要措施。Ras/Raf/MEK/ERK信號級聯(lián)通路,是一條有絲分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路,其中MEK亞細(xì)胞蛋白作為ERK(extracellular regulated protein kinases)細(xì)胞胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶的上游激酶,已被證明與多種惡性癌癥的發(fā)生以及惡化有密切關(guān)系,例如惡性黑色素瘤、晚期分化型甲狀腺癌以及晚期腎癌等均與該通路有關(guān)。目前已上市的藥物中,司美替尼、索拉非尼、曲美替尼等抗癌藥物均是該信號通路中MEK抑制劑。MEK已成為多種癌癥治療的熱門靶點(diǎn)。齊墩果酸(oleanolic acid,縮寫OA),是一種五環(huán)三萜類化合物,在天然植物中儲量豐富。OA具有十分廣泛的生物活性,如抗腫瘤、抗菌消炎、抗HIV、控制血小板聚集、降血糖以及保肝護(hù)肝等療效。齊墩果酸毒副作用低,極少產(chǎn)生惡性不良反應(yīng),因此,被認(rèn)為是極具有開發(fā)潛力的先導(dǎo)化合物藥物。已上市藥物索拉非尼是一種絲裂原活化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2可逆性抑制劑,主要通過ERK對信號通路中MEK亞細(xì)胞蛋白發(fā)揮抑制作用,從而影響MAPK通路,實(shí)現(xiàn)抑制癌細(xì)胞增殖,主要用于治療無法手術(shù)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的肝細(xì)胞癌。利用藥物分子計(jì)算機(jī)輔助對接模擬測試的方法,證實(shí)索拉非尼能夠與MEK靶點(diǎn)有較強(qiáng),較穩(wěn)定的結(jié)合力,具有較好的靶向性。其結(jié)構(gòu)中的酰胺基片段與MEK靶點(diǎn)中的氨基酸殘基以氫鍵結(jié)合,提示藥物與MEK靶蛋白可產(chǎn)生牢固結(jié)合力。據(jù)此,猜測酰胺基是索拉非尼對MEK產(chǎn)生靶向性抗腫瘤活性的重要藥效基團(tuán)。OA本身已具備一定的抑制腫瘤細(xì)胞血管再生的活性,具有一定的抗癌活性。本課題組利用計(jì)算機(jī)輔助模擬篩選技術(shù)對OA結(jié)構(gòu)進(jìn)行進(jìn)一步改造,引入酰胺基片段,以期增強(qiáng)對MEK靶點(diǎn)的特異性結(jié)合,進(jìn)而提升抗腫瘤活性。對篩選出的小分子抑制劑合成并優(yōu)化,并進(jìn)行初步的抗腫瘤活性篩選。本文以O(shè)A為先導(dǎo)化合物,分別經(jīng)過酯化、氧化、加成、還原、縮合等反應(yīng)合成了8個(gè)含有酰胺基片段的產(chǎn)物,在反應(yīng)過程中采用了TLC檢測反應(yīng)終點(diǎn),產(chǎn)物使用柱層析分離手段進(jìn)行處理,目標(biāo)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)過了~1H-NMR和~(13)C NMR確認(rèn)。本文采用MTT法,選用人肺癌細(xì)胞(A549)、人胃癌細(xì)胞(SGC7901)和人肝癌細(xì)胞(BEL7402)進(jìn)行齊墩果酸衍生物體外細(xì)胞毒活性藥理評價(jià),以索拉非尼(Sorafenib)為陽性對照物。結(jié)果表明:所測化合物中的IC_(50)值較母體OA顯著改善,具有較好的抗腫瘤活性。證明了設(shè)計(jì)思想的合理性。通過本研究得到了結(jié)構(gòu)新穎和生物學(xué)活性突出的齊墩果酸類小分子MEK抑制劑,為腫瘤分子靶向治療提供了新思路及新方法,為新一代小分子抑制劑和抗癌藥物開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：沈陽化工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R914
【部分圖文】：

第二章A 作為先導(dǎo)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，通行氧化反應(yīng)，使 C-3 位羥基修飾為羰原反應(yīng)制得中間體 C-3 位氨基-OA 甲成了 8 個(gè)不同的擁有共同的基團(tuán)——非尼等 MEK 抑制劑中的酰胺基片段到提升抗癌療效的目的。利用 MVD OA 母體，其對接得分獲得了明顯提iscovery studio 軟件中進(jìn)行小分子配體成的 OA 衍生物中的酰胺基片段能夠，提示其與靶蛋白的結(jié)合活性已得到用模式如圖 2-1，2-2）。

Discovery studio 軟件中進(jìn)行小分子配體與合成的 OA 衍生物中的酰胺基片段能夠合，提示其與靶蛋白的結(jié)合活性已得到提作用模式如圖 2-1，2-2）。圖 2-1 齊敦果酸與 MEK 結(jié)合模式

3 索拉非尼與 MEK 的結(jié)合圖像（氨基酸片段展示打分軟件能為小分子與靶蛋白的結(jié)合能力提供預(yù)的 D1～D8化合物分別與 MEK 靶蛋白（PDB Co得分指數(shù)，隨后利用 Discovery studio 觀察分析化（如圖 2-3，2-4，2-5）。經(jīng)過 Discovery studio 的物 D1～D8能夠利用與靶蛋白周圍的氨基酸牢固結(jié)，其與周圍結(jié)合氨基酸有 AlaA：76，LysA：192，227，SerA：194，GlyA：77，GlnA：153，AspA生物中，它們通過疏水鍵，π-σ 鍵，π-alkyl 等與靶靶蛋白的部分氨基酸以氫鍵的方式結(jié)合，這表明
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李璇;吳超;肖佩玲;鄧坦;;索拉非尼誘導(dǎo)人多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究[J];湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2015年06期

2 黃富全;廖智杰;郭思恩;;索拉非尼聯(lián)合介入治療晚期肝癌進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2015年06期

3 陳佳;吳德沛;;索拉非尼治療FLT3-ITD突變陽性急性髓細(xì)胞白血病研究進(jìn)展[J];臨床血液學(xué)雜志;2015年02期

4 鄭宇靜;封宇飛;;MEK1/2抑制劑曲美替尼的藥理作用與臨床評價(jià)[J];中國新藥雜志;2014年15期

5 陳子;王瑩;;MEK抑制劑治療非小細(xì)胞肺癌的研究進(jìn)展[J];國際呼吸雜志;2014年04期

6 黃超有;張紅衛(wèi);聶向陽;謝惠華;;索拉非尼對肝切除術(shù)后早期肝再生影響的研究[J];廣西醫(yī)學(xué);2013年07期

7 張紅衛(wèi);黃超有;林樹文;吳昶皓;;索拉非尼對肝癌術(shù)后早期肝再生的影響[J];中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版);2013年06期

8 陳建斌;陳國勇;孫建軍;李彩麗;;索拉非尼治療肝癌肝移植術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)的臨床療效觀察[J];器官移植;2013年02期

9 唐初;陳玉;柏舜;楊光忠;;齊墩果酸的結(jié)構(gòu)修飾與生物活性研究進(jìn)展[J];有機(jī)化學(xué);2013年01期

10 胡安斌;何曉順;邰強(qiáng);朱曉峰;馬毅;王東平;王國棟;巫林偉;鞠衛(wèi)強(qiáng);黃潔夫;;索拉非尼在預(yù)防和治療肝癌肝移植術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)中的療效評價(jià)[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2012年18期

本文編號：2839604