研究背景肝細(xì)胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上發(fā)病率較高的惡性腫瘤,嚴(yán)重威脅人們的健康和生命。全球不論在肝癌高發(fā)地區(qū)還是低發(fā)地區(qū),HCC發(fā)病率男性高于女性2~8倍。在歐美,HCC的主要致病因素是慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染,而在亞洲和非洲則是慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染。目前HCC的治療方法主要有外科治療、消融技術(shù)、經(jīng)動(dòng)脈治療、外電子束放療、系統(tǒng)治療以及系統(tǒng)治療。由于手術(shù)治療具有一定局限性,且輔助治療的方法有限,因此,急需更有效的綜合輔助治療方法來提高患者預(yù)后,相對(duì)于傳統(tǒng)的放化療等輔助方法,分子靶向藥物能有效地殺滅腫瘤細(xì)胞,療效更好,且全身毒副作用較少,對(duì)HCC的治療具有重要意義。沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1(silent information regμLator 2 homolog 1,SIRT1)與酵母中發(fā)現(xiàn)的沉默信息調(diào)節(jié)因子Sir2基因家族同源,sirtuin家族由7個(gè)成員(SIRT1-7)組成,它們共享高度保守的催化核心結(jié)構(gòu)域并依賴于NAD+的酶功能,家族成員的N-和C-末端延伸及其亞細(xì)胞定位不同,它們共同負(fù)責(zé)其各種結(jié)合配偶體以及不同的代謝功能,介導(dǎo)刺激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。SIRT1能使組蛋白和其他關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子脫乙�；�,如p53,NF-κB,Foxo,Ku70,E2F1,PPARγ共激活因子1α和缺氧誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子(HIF)。它對(duì)基因轉(zhuǎn)錄的廣泛影響已經(jīng)集中在細(xì)胞衰老,新陳代謝,炎癥和應(yīng)激反應(yīng)等有關(guān)的細(xì)胞活動(dòng)中。研究顯示,SIRT1在HCC患者中異常高表達(dá)。由此,本實(shí)驗(yàn)室基于SIRT1展開抗肝癌活性研究。研究目的利用計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì),本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用Sybyl2.1平臺(tái)的Surflex-Dock模塊研究Tipranavir和SIRT1晶體的對(duì)接研究,通過體外抗肝癌活性研究,初步確定Tipranavir對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2具有一定的抑制作用,但是具體通過哪些細(xì)胞通路來抑制肝癌細(xì)胞的增殖還有待研究,因此本課題從此出發(fā),將研究Tipranavir的作用機(jī)制,為Tipranavir治療HCC提供一些思路。研究內(nèi)容1.應(yīng)用Sybyl2.1進(jìn)行分子對(duì)接,配體為Tipranavir受體為SIRT1蛋白。2.Tipranavir體外抗肝癌活性研究,例如通過MTT法檢測藥物對(duì)于肝癌細(xì)胞HepG2的增殖的影響、LDH法檢測細(xì)胞增殖、流式細(xì)胞術(shù)檢測藥物對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響、Hoechst染色法檢測細(xì)胞凋亡、蛋白免疫印跡法檢測凋亡相關(guān)蛋白。3.構(gòu)建HepG2細(xì)胞SIRT1沉默細(xì)胞株及驗(yàn)證及siRNA沉默SIRT1基因?qū)epG2細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)蛋白的的影響。4.Tipranavir對(duì)HepG2細(xì)胞作用的時(shí)間和劑量對(duì)SIRT1蛋白表達(dá)的影響。5.SIRT1過表達(dá)對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響及作用機(jī)制探討。研究結(jié)果本課題通過Tipranavir體外抗肝癌活性研究初步證實(shí)Tipranavir對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2具有一定的增殖抑制作用,并通過流式細(xì)胞儀檢測藥物Tipranavir會(huì)促進(jìn)細(xì)胞凋亡,通過siRNA-SIRT1沉默HepG2初步證實(shí)藥物可通過抑制SIRT1從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡,并通過相關(guān)促凋亡蛋白驗(yàn)證得出Tipranavir通過抑制SIRT1促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
【學(xué)位單位】：重慶理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R96
【部分圖文】：

增殖性疾病以及衰老的許多潛在用途。目前發(fā)現(xiàn)與 HCC 有關(guān)的號(hào)通路包括血小板原性生長因子受體[20]、成纖維細(xì)胞生長因)[21]和血管內(nèi)皮生長因子受體(VEGFR)[22]，這些信號(hào)通路共同介導(dǎo)增殖、存活、遷移和轉(zhuǎn)移[23]，這些靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)促成了治療 HCC 的靶點(diǎn)或多靶點(diǎn)）的研發(fā)，如圖 1.1 所示。表皮生長因子受體(EGFR供了合理的靶點(diǎn)[24]，因?yàn)樗ǔＴ诙喾N實(shí)體瘤中過表達(dá)，并且其療法和放射療法的抗性以及不良預(yù)后相關(guān)。 西妥昔單抗(C255)是FR 的特異性單克隆抗體，與化學(xué)療法和放射療法具有協(xié)同作用，已療伊立替康難[25]治性結(jié)直腸癌(CRC)和頭頸部鱗狀細(xì)胞癌(SCCHN妥昔單抗[26]治療非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)，乳腺癌和胰腺癌的臨床試，西妥昔單抗已被證明是一種治療 EGFR 過度表達(dá)的新策略[27]。盡和進(jìn)展與各種信號(hào)通路的錯(cuò)誤傳到有關(guān)，但其機(jī)制尚不確定[28]。20抗腫瘤制劑索拉菲尼(多吉美)同時(shí)被美國和歐盟批準(zhǔn)用于治療HC著晚期 HCC 的靶向治療向前邁出了重要一步[29]。

重慶理工大學(xué)碩士學(xué)位論文的特定機(jī)制奠定了基礎(chǔ)[45]。T1 的制劑劑信息調(diào)節(jié)因子 1)是哺乳動(dòng)物 sirtuin 家族蛋白(S守的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)+依賴性脫乙存活[1]。SIRT1 在細(xì)胞活動(dòng)過程中扮演者重要作非組蛋白，如圖 1.2；SIRT1 在細(xì)胞生長、分化動(dòng)中起到了重要作用，與眾多基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控 SIRT1 在各種生物過程中的調(diào)節(jié)作用外，在 HCC要的是，SIRT1 被證實(shí)參與 HCC 的腫瘤發(fā)生、子的脫乙�；�

圖 1.3 SIRT1 參與了多種生理活動(dòng)Figure1.2 SIRT1 involved in a variety of physiological activities來，許多研究表明 SIRT1 與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。研究顯中 SIRT1 的含量明顯增加[47]。基于 SIRT1 在癌癥中高表達(dá)，腫瘤促進(jìn)劑，并且大多數(shù)學(xué)者這么認(rèn)為，也有人認(rèn)為是腫瘤抑l 作為腫瘤的靶點(diǎn)不斷深入研究，以及對(duì) SIRTl 抑制劑的作用機(jī)IRT1 小分子抑制劑主要有 β-萘酚類、吲哚類、2-苯甲酰胺類、s、Tenovins、天然產(chǎn)物類等[48]。T1 的表達(dá)及調(diào)控T1 除自身的表達(dá)和活性受到精細(xì)的調(diào)控，同時(shí)也調(diào)控其轉(zhuǎn)錄水對(duì) SIRT1 轉(zhuǎn)錄水平包括 p53 負(fù)性調(diào)節(jié) SIRT1 轉(zhuǎn)錄、FOXO 家IRT1 轉(zhuǎn)錄、HIC1(Hypermethy in cancer1)負(fù)性調(diào)節(jié) SIRT1 轉(zhuǎn)錄IRT1 轉(zhuǎn)錄[38]。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄧過房;;2016年諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)背景下的細(xì)胞死亡方式再認(rèn)識(shí)[J];中學(xué)生物學(xué);2017年05期

2 寧旭;于忠鳴;;創(chuàng)造性的自主毀滅——細(xì)胞凋亡簡介[J];中學(xué)生物學(xué);2006年10期

3 劉春秋;卞茂紅;;藥物致紅細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];臨床輸血與檢驗(yàn);2017年04期

4 劉晨;馮雪;;人CXCR4基因?qū)σ认侔㏒W1990細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響[J];健康之路;2017年06期

5 王方;;過表達(dá)TIPE2上調(diào)BID分子促進(jìn)H446細(xì)胞凋亡[J];科學(xué)中國人;2017年18期

6 賈寧;孫榮釗;;病毒感染對(duì)細(xì)胞凋亡的影響及作用機(jī)制[J];中國動(dòng)物檢疫;2012年08期

7 趙君怡;劉偉國;郭秀麗;;一氧化氮與細(xì)胞凋亡相關(guān)疾病的關(guān)系及其調(diào)控[J];中國藥學(xué)雜志;2010年14期

8 黃小丹;;細(xì)胞凋亡與疾病[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2009年05期

9 陳藝娟;鄧甲興;林永利;;中藥影響細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];福建畜牧獸醫(yī);2008年01期

10 劉伍梅;汪銘書;程安春;周毅;劉芳;張平英;李雪梅;陳孝躍;;PRRSV感染Marc-145細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)觀察[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2008年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 李佑生;王文健;劉毅;何春燕;何燕銘;陳偉華;應(yīng)健;;黃芪多糖丹酚酸對(duì)高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血栓病分會(huì)第四次學(xué)術(shù)研討會(huì)暨廣東省中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血栓病專業(yè)委員會(huì)首屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

2 覃玉榮;張志勇;;細(xì)胞濃度變化對(duì)細(xì)胞凋亡率影響及其機(jī)理初探[A];全國電磁兼容學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

3 于青;袁偉杰;姚建;;晚期糖基化終末產(chǎn)物引起足細(xì)胞凋亡的機(jī)制[A];2007年浙滬兩地腎臟病學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2007年

4 吳經(jīng)緯;湯長發(fā);;運(yùn)動(dòng)中細(xì)胞凋亡的線粒體變化特征[A];湖南省生理科學(xué)會(huì)2006年度學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2007年

5 蒲小平;李長齡;屠鵬飛;宋志宏;;中藥肉叢蓉成分抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[A];第七屆全國生化藥理學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2000年

6 符必謙;奚勝艷;王彥暉;;中藥及復(fù)方促腫瘤細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制[A];第二屆臨床中藥學(xué)大會(huì)論文集[C];2018年

7 林其誰;;線粒體與細(xì)胞凋亡[A];第七屆全國生物膜學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];1999年

8 邱潔;高海青;;鋅在細(xì)胞凋亡中的作用研究進(jìn)展[A];山東省微量元素科學(xué)研究會(huì)第三屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2006年

9 寧存德;;細(xì)胞凋亡與口腔疾病[A];FDI、CSA臨床口腔進(jìn)展學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];1999年

10 華子春;;靶向性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡藥物研發(fā)[A];全國第十一屆生化與分子藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 方方　曹雪琴;吳政星的挑戰(zhàn)與求索[N];科學(xué)時(shí)報(bào);2011年

2 實(shí)習(xí)生 劉雨亭;細(xì)胞凋亡如何推進(jìn)？以觸發(fā)波的“名義”[N];科技日?qǐng)?bào);2018年

3 ;“細(xì)胞凋亡療法”正逐步成為治療癌癥的新途徑[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2002年

4 記者 何德功;基因變異可能致癲癇[N];新華每日電訊;2004年

5 ;3’取代吲哚類衍生物誘導(dǎo)HL－60細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

6 ;As_(2)S_(2)與STI571協(xié)同誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

7 董學(xué)清 吳延華;阿膠抑癌作用顯著[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

8 高書明;誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

9 楊堤林;中藥可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2004年

10 記者張建松;治療癌癥新途徑：細(xì)胞凋亡療法[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 林鵬;水貂腸炎病毒NS1非結(jié)構(gòu)蛋白調(diào)控細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2019年

2 馬邦云;升麻鱉甲湯加減方調(diào)控MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)AML細(xì)胞凋亡的研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2019年

3 雋晨霞;LncRNA MALAT1通過對(duì)CD80的轉(zhuǎn)錄調(diào)控影響細(xì)胞凋亡的機(jī)制[D];南京醫(yī)科大學(xué);2019年

4 李玉明;豬繁殖與呼吸綜合征病毒誘導(dǎo)bystander細(xì)胞凋亡機(jī)制研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2017年

5 魏薇;我國優(yōu)勢基因型弓形蟲蟲株致密顆粒蛋白15誘導(dǎo)人絨毛膜細(xì)胞JEG-3凋亡的機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2018年

6 徐祥;Nupr1及C/EBPβ在甲基苯丙胺誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性中的作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

7 沈雯;循環(huán)miRNA參與吸煙所致COPD的作用及機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

8 朱思遠(yuǎn);晚期氧化蛋白產(chǎn)物誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

9 鄭旭;白藜蘆醇對(duì)甲狀腺癌防治作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2018年

10 柏素云;新型吡唑香豆素衍生物和二茂鐵吡唑衍生物對(duì)細(xì)胞凋亡、自噬和細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊嵐菲;電針對(duì)大鼠頸肌慢性損傷模型細(xì)胞凋亡的影響[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2019年

2 姚敏鵬;視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）激活NLRP3炎性小體在促進(jìn)梗死心肌細(xì)胞凋亡中的作用研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2019年

3 武珍;FOXO3a上調(diào)Mxi1-0促進(jìn)缺氧后內(nèi)皮細(xì)胞凋亡[D];南京醫(yī)科大學(xué);2019年

4 羅逸航;大鼠輸尿管不全梗阻對(duì)其平滑肌影響的研究[D];遵義醫(yī)科大學(xué);2019年

5 李靜;Tipranavir抗肝癌作用及其相關(guān)機(jī)制研究[D];重慶理工大學(xué);2019年

6 姚浩;青蒿琥酯通過PI3K/Akt/mTOR體外誘導(dǎo)H929和U266細(xì)胞凋亡及自噬的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2019年

7 黃銀亮;線粒體靶向的比率型雙光子熒光探針對(duì)細(xì)胞凋亡的可視化研究[D];安徽大學(xué);2019年

8 孫浩玉;凋亡基因RTN3在紅系發(fā)育過程中的功能研究[D];鄭州大學(xué);2019年

9 范崢;TGF-β/SMAD信號(hào)通路在雙酚A誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中的作用[D];沈陽醫(yī)學(xué)院;2019年

10 李明達(dá);免疫共沉淀聯(lián)合質(zhì)譜鑒定DAI相互作用蛋白[D];廈門大學(xué);2018年

本文編號(hào)：2834243