介孔二氧化硅納米粒(Mesoporous silica nanoparticles,MSN)屬于無機(jī)納米材料,因其具有良好的生物相容性,易被腫瘤細(xì)胞所攝取,而且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、粒子大小及形態(tài)控制簡單,具有較大的比表面積,較高的比孔容和載藥量等方面的優(yōu)勢,近年來作為藥物載體在藥物傳遞方面受到國內(nèi)外學(xué)者很多的關(guān)注。但介孔二氧化硅納米粒子和其他傳統(tǒng)納米粒同樣存在一些尚未解決的問題,即藥物不可控釋放以及藥物到達(dá)靶標(biāo)前泄漏。同時,盡管MSN具有良好的生物相容性,但是人體細(xì)胞對其攝取較少,降低了藥物的療效。本研究以紫杉醇為模型藥物,制備紫杉醇介孔二氧化硅核-脂質(zhì)殼組裝體納米粒(PTX-LMSN)的新型抗腫瘤藥物載體。PTX-LMSN結(jié)合了介孔二氧化硅納米粒和脂質(zhì)體兩者的優(yōu)點,介孔二氧化硅納米粒核心作為支撐骨架,不但具有較高的載藥能力,同時給予脂質(zhì)層機(jī)械穩(wěn)定性、可控的形態(tài)學(xué)和狹窄的粒徑分布。外周具有良好生物相容性的脂質(zhì)膜,可以增加細(xì)胞對藥物的攝取。同時脂質(zhì)膜具有p H敏感性,其在正常生理條件下(中性環(huán)境)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,在酸性條件下易于釋放,從而有利于藥物在酸性環(huán)境的腫瘤部位發(fā)揮抗腫瘤作用,也解決了藥物載體到達(dá)腫瘤部位前就泄漏的問題。本文主要內(nèi)容包括以下幾個方面:1.制備PTX-LMSN的處方前研究及建立紫杉醇及其制劑的分析方法。為考察不同溶劑及表面活性劑對紫杉醇的增溶表現(xiàn),采用高效液相色譜法對其進(jìn)行了考察,初步篩選了適合的溶劑介質(zhì)及表面活性劑,為體外釋放試驗及制劑處方研究提供依據(jù).2.介孔二氧化硅納米粒的合成工藝研究。通過單因素試驗考察,以粒徑和單分散性作為主要評價指標(biāo),篩選出最優(yōu)處方工藝為:在溫度為80℃,十六烷基三甲基溴化銨(Hexadecyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)的濃度為0.020 mol·L-1、正硅酸乙酯(Tetraethyl orthosilicate,TEOS)的濃度為0.224 mol·L-1、p H=10時制備介孔二氧化硅納米粒結(jié)果最佳�？疾炝瞬煌幬�/載體比例對載藥量和藥物利用率的影響,最后確定當(dāng)藥物/載體比例為1/5時為最佳,載藥量為3.21%,藥物利用率最大為16.05%。利用掃描電鏡、透射電鏡、全自動比表面積和孔隙度測定等表征手段進(jìn)行表征,表明所合成的二氧化硅納米粒子大小均一,分散性良好,為具有規(guī)則孔道結(jié)構(gòu)的介孔材料。其孔徑集中在3.8 nm左右,紫杉醇分子可以輕松被介孔二氧化硅載入。3.紫杉醇介孔二氧化硅核-脂質(zhì)殼組裝體納米粒的制備工藝研究�？疾炝字臐舛�、載藥介孔二氧化硅納米粒的濃度、膽固醇的濃度以及表面活性劑的用量對所制備的PTX-LMSN納米顆粒的粒徑、電位和單分散性的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):各因素條件的改變,對脂質(zhì)體納米粒的粒徑和單分散性都有很大的影響。最終確定以磷脂濃度為3%、介孔二氧化硅納米粒的濃度為0.4%、膽固醇加入量為0.2%、表面活性劑用量為0.5%的條件來制備PTX-LMSN。對最優(yōu)條件下制備的PTX-LMSN進(jìn)行初步穩(wěn)定性考察,實驗結(jié)果表明:PTX-LMSN在高溫及光照條件下均不穩(wěn)定,尤其在高溫條件下極為敏感,表現(xiàn)為外觀顏色及形態(tài)發(fā)生改變,藥物含量下降較多,故PTX-LMSN應(yīng)在低溫避光條件下儲存。4.體外釋放實驗結(jié)果表明PTX-LMSN具有p H敏感性和溫度敏感性,隨著p H值的降低和溫度的升高,PTX-LMSN釋放速度加快。這有利于PTX-LMSN有效攜帶藥物至腫瘤部位,減少在正常生理條件下的釋放,繼而減少藥物對正常組織細(xì)胞的損傷,降低毒副作用,增加藥效。5.采用MTT法對PTX-LMSN進(jìn)行了體外抗腫瘤細(xì)胞毒性實驗。結(jié)果表明載體材料MSN和LMSN無細(xì)胞毒性,所制備的PTX-LMSN較PTX-MSN和PTX具有更高的細(xì)胞增殖抑制率,其對A549細(xì)胞的殺傷力分別是游離PTX、PTX-MSN的3.0倍和2.8倍,作為抗腫瘤藥物的智能藥物傳遞系統(tǒng)具有一定的應(yīng)用前景。
【學(xué)位單位】：廣東藥學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R943
【部分圖文】：

廣東藥學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文第一章 紫杉醇介孔二氧化硅核-脂質(zhì)殼組裝體納米粒的處方前研究藥物的理化性質(zhì)為最終制劑輔料的選擇、處方的篩選以及工藝的優(yōu)化提供了直接理論依據(jù)，也是決定其給藥方式的重要因素。本章節(jié)建立紫杉醇含量測定的方法、察不同增溶劑對藥物的增溶作用，為 PTX-LMSN 的處方設(shè)計、制備工藝以及釋放質(zhì)的選擇提供參考。

A.空白溶劑； B.對照品溶液； 1.紫杉醇圖 1-3 專屬性試驗色譜圖結(jié)果A. blank solution；B.reference solution；1. PaclitaxelFig. 1-3 Chromatography of specificity experiment性與范圍液的配制：精密稱取紫杉醇原料藥 10.02 mg 于 50 mL 容量瓶中，定容至刻度，制備成每 1 mL 含紫杉醇 200.40 μg 的貯備液。濃度溶液的配制：精密量取貯備液適量，分別用甲醇稀釋成濃度為0.02、20.04、50.10、100.20 μg·mL-1的系列對照品溶液，按“2.1.2”項定，記錄峰面積，以峰面積（A）與濃度（C）進(jìn)行線性回歸，繪標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A= 222.46 C－10.885（r = 0.9999），結(jié)果表明：1~100 μg·mL-1范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好，如圖 1-4 所示。

圖 1-4 紫杉醇溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 1-4 Calibration curve of PTX solution試驗.2”項下制備的 20.04 μg·mL-1對照品溶液，連續(xù)重復(fù)進(jìn)面積的 RSD 為 0.22 %，表明該方法精密度良好。試驗號紫杉醇原料藥，精密稱定，按照“2.1.2”項下方法平定，記錄峰面積。另取“2.1.2”項下對照品溶液進(jìn)樣紫杉醇的濃度，結(jié)果見表 1-1。表 1-1 重復(fù)性試驗結(jié)果Tab. 1-1 Result of Repeatability in assayAreaConc.-1Mean±SD-1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2833082