本文共包括兩個(gè)章節(jié),第一章介紹了靶向腎型谷氨酰胺酶(KGA)的抗腫瘤化合物PSBK的發(fā)現(xiàn)過(guò)程以及評(píng)價(jià)了其體內(nèi)外的抗腫瘤活性。第二章則論述了2型己糖激酶(HK2)小分子天然產(chǎn)物抑制劑的虛擬篩選以及活性評(píng)價(jià)的過(guò)程。第一章腎型谷氨酰胺酶(Kidney-type glutaminase,KGA)是一種線粒體酶,主要將谷氨酰胺代謝產(chǎn)生谷氨酸和氨,是谷氨酰胺代謝的第一步酶,并過(guò)表達(dá)于多種癌癥中,近年來(lái)被認(rèn)為是一個(gè)很有潛力的癌癥治療靶標(biāo)�；诮Y(jié)構(gòu)的虛擬配體篩選預(yù)測(cè)毛酸漿內(nèi)酯K(一種來(lái)自毛酸漿的新型去甲醇酯化合物)是潛在的KGA抑制劑。酶活性抑制測(cè)定和微量熱泳實(shí)驗(yàn)證實(shí)了毛酸漿內(nèi)酯K能夠與KGA靶向結(jié)合并且抑制其活性。另外,毛酸漿內(nèi)酯K對(duì)一些人類癌細(xì)胞系如SW1990和HCC827-ER表現(xiàn)出強(qiáng)效的抗增殖作用。它阻斷了SW1990中的谷氨酰胺代謝,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)谷氨酰胺水平的增加和谷氨酸及其下游代謝物的減少。毛酸漿內(nèi)酯K也顯著抑制SW1990移植瘤小鼠模型中的腫瘤生長(zhǎng)。有趣的是,毛酸漿內(nèi)酯K可以逆轉(zhuǎn)HCC827-ER細(xì)胞對(duì)厄洛替尼的耐藥性,且與己糖激酶2抑制劑有協(xié)同作用,增強(qiáng)其對(duì)SW1990細(xì)胞的增殖抑制作用。第二章己糖激酶2(Hexokinase 2,HK2)是糖酵解途徑第一步中的限速酶,與正常細(xì)胞相比,其在癌細(xì)胞中高水平表達(dá)。HK2由于其在腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移過(guò)程中的關(guān)鍵作用,使其成為癌癥靶向治療的新靶點(diǎn)。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部天然產(chǎn)物數(shù)據(jù)庫(kù)中的天然產(chǎn)物進(jìn)行基于結(jié)構(gòu)的虛擬配體篩選,通過(guò)篩選發(fā)現(xiàn)來(lái)自靈芝的一個(gè)新的類固醇衍生物(22E,24R)-6β-甲氧麥角甾-7,9(11),22-三烯-3β,5α-二醇(2)與HK2具有顯著的計(jì)算結(jié)合自由能,預(yù)測(cè)其與HK2具有高結(jié)合親和力。根據(jù)這一預(yù)測(cè),選擇化合物2連同來(lái)自該藥材的其他12個(gè)類固醇類似物(1,3-13)用于進(jìn)一步的微量熱泳動(dòng)實(shí)驗(yàn),酶抑制實(shí)驗(yàn)和腫瘤細(xì)胞抑制的測(cè)定,最后確認(rèn)化合物2為一個(gè)高效的HK2抑制劑。作為第一個(gè)來(lái)源于天然產(chǎn)物的HK2抑制劑,化合物2可被認(rèn)為是靶向HK2用于癌癥治療的潛在藥物候選物。
【學(xué)位單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R91
【部分圖文】：

KGA的分子篩純化圖

圖 2.3 分子篩后的蛋白樣品 SDS-PAGE 考馬斯亮藍(lán)染色圖:lane1:14.5ml, lane 3: 15ml, Lane 4: 15.5ml, lane 5: 16ml, lane 6: 16.5ml, lan第三節(jié)． PSBK 體外 KGA 酶活性抑制試驗(yàn)其抑制形式

圖 3.1 KGA 酶活性檢測(cè)原理示意圖。酶抑制劑對(duì)酶的抑制主要有 3 種形式：競(jìng)爭(zhēng)性抑制、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制以及無(wú)競(jìng)性抑制。競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑一般為底物類似物，就像 DON，與底物谷氨酰胺競(jìng)爭(zhēng)的結(jié)合催化口袋，其對(duì)米氏方程曲線的影響為，不影響最大反應(yīng)速率 Vmax，

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4 陳軍;崔紅利;趙佳琳;秦松;;凱氏擬小球藻己糖激酶基因的克隆及其在不同培養(yǎng)條件下的表達(dá)分析[J];海洋科學(xué);2017年07期

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6 江鋼鋒;溶組織內(nèi)阿米巴兩種己糖激酶同工酶的分子分析[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊(cè));1997年01期

7 黃勇奇,吳耀生;己糖激酶-Ⅱ與腫瘤的糖代謝[J];生命的化學(xué);2004年04期

8 鄧俊林;鼠腦己糖激酶的純化及鋁離子對(duì)該酶的影響[J];重慶師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1998年04期

9 鄧曉霖;厲周;;己糖激酶對(duì)腫瘤作用的研究進(jìn)展[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生;2018年13期

10 朱智勇;馬穎才;唐莉;榮光宏;;缺氧對(duì)食管鱗狀細(xì)胞癌中缺氧誘導(dǎo)因子-1α和己糖激酶-Ⅱ表達(dá)的影響[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2013年15期

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8 張麗莎;稻瘟病菌己糖激酶基因和凋亡抑制蛋白基因的克隆與功能分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

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本文編號(hào)：2825973