發(fā)布時(shí)間：2020-09-12 12:27

　　 酮洛芬(ketoprofen)又名酮基布洛芬,化學(xué)名為3-苯甲酰基-α-甲基苯乙酸,在水中幾乎不溶,極易溶于甲醇,易溶于乙醇、丙酮或乙醚。酮洛芬是一種非選擇性的非甾體類抗炎藥(NSAIDs),具有鎮(zhèn)痛、抗炎和解熱的作用,臨床用于術(shù)后疼痛,急性腎絞痛,各種輕度、中度癌痛(WHO推薦重度癌痛時(shí)可作為阿片類鎮(zhèn)痛劑的輔助用藥),痛風(fēng)發(fā)作引起的疼痛,風(fēng)濕性及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,強(qiáng)直性脊椎炎,骨關(guān)節(jié)炎等。另外,酮洛芬還有一定的中樞性鎮(zhèn)痛作用。按照世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的三階梯止痛法,對于輕度、中度癌痛,宜首選酮洛芬等NSAIDs。目前,國內(nèi)市場上銷售的酮洛芬制劑主要有普通片、分散片、膠囊劑和混懸劑等,尚無注射劑上市。酮洛芬口服后對胃腸道刺激性較大,易產(chǎn)生惡心、腹痛、胃腸道出血等嚴(yán)重的胃腸道副作用,因而在臨床上的應(yīng)用范圍受到一定限制。為此,羅永煌教授帶領(lǐng)的科研團(tuán)隊(duì)與宜昌三峽制藥有限公司聯(lián)合研究開發(fā)了酮洛芬注射液,肌內(nèi)注射給藥,可以避免酮洛芬與胃腸道直接接觸,在一定程度上可以減輕胃腸道的副作用；而且,酮洛芬注射液肌內(nèi)注射后,作用迅速、生物利用度高、無首過效應(yīng),給急癥、重癥疼痛患者以及不能口服給藥的患者帶來了新的選擇,具有非常好的實(shí)用價(jià)值及臨床應(yīng)用前景。本課題組研制的酮洛芬注射液,按照國家食品藥品監(jiān)督管理局第28號令《藥品注冊管理辦法》中“化學(xué)藥品注冊分類”方法,酮洛芬注射液屬于3類新藥。本文對其進(jìn)行了臨床前的部分研究,旨在為酮洛芬注射液的臨床試驗(yàn)和新藥注冊積累資料。其研究內(nèi)容主要包括以下幾部分：分析方法的建立：本文建立了酮洛芬注射液的含量和有關(guān)物質(zhì)的測定方法。其中,酮洛芬含量測定的色譜條件為：用十八烷基硅烷化硅膠(Shim-pack VP-ODS 250×4.6mm 5μm)為色譜柱填充劑；以磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀6.8 g溶解于100 ml水中,用磷酸調(diào)節(jié)至pH 3.5士0.1)-乙腈-水(2：43：55)為流動(dòng)相,檢測波長為255nm,流速為1.2 ml/min,柱溫為25℃,進(jìn)樣量為10μL。理論塔板數(shù)按酮洛芬峰計(jì)算不低于2000。酮洛芬有關(guān)物質(zhì)測定的色譜條件為：檢測波長233 nm,進(jìn)樣量20μL,其它條件與酮洛芬含量測定項(xiàng)下相同。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證,所建立的分析方法專屬性強(qiáng),重現(xiàn)性好,準(zhǔn)確度高,適用于酮洛芬注射液的質(zhì)量控制。處方工藝研究：采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn),以注射液的澄明度、穩(wěn)定性和含量等為考察指標(biāo),最終確定了酮洛芬注射液的最優(yōu)處方為：5.0%酮洛芬,3.6%精氨酸,2.5%苯甲醇,枸櫞酸適量調(diào)節(jié)pH值至6.0～8.0。同時(shí),對配液過程中活性炭用量及吸附時(shí)間和吸附溫度、配液溫度、滅菌條件等制備工藝進(jìn)行了篩選與優(yōu)化,確定出最佳制備工藝為：取規(guī)定量60%的注射用水,加入處方量助溶劑,攪拌至溶解后,加入處方量酮洛芬,加熱(50℃-60℃)并充分?jǐn)嚢?使酮洛芬完全溶解；加入處方量苯甲醇和0.1%活性炭,加熱至60℃左右并不斷攪拌,保溫10 min,過濾脫炭；待藥液冷卻至室溫,測pH值,加入枸櫞酸適量,調(diào)節(jié)pH值到6.5±0.5,加注射用水至全量,攪拌,混勻,精濾,檢測濾液(中間體)質(zhì)量。當(dāng)濾液檢測合格后,在充氮?dú)鈼l件下灌封于2 ml棕色的安瓿瓶中,121℃滅菌12min,檢漏、燈檢、貼簽、包裝。用該處方和工藝所制備的酮洛芬注射液澄明、穩(wěn)定,pH適宜,含量準(zhǔn)確。酮洛芬注射液的規(guī)格為2ml:100mg。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究：參照《中國藥典》和《美國藥典》現(xiàn)行版所載“酮洛芬腸溶膠囊”的含量限度規(guī)定,結(jié)合本品三批樣品實(shí)際測定的數(shù)據(jù),將本品的含量限度擬定為“酮洛芬(C16H1403)應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%～110.0%”；其含量測定方法,主要依據(jù)《中國藥典》現(xiàn)行版所載“酮洛芬腸溶膠囊”和“酮洛芬搽劑”標(biāo)準(zhǔn)中含量測定的方法,即HPLC法擬定。經(jīng)對酮洛芬含量測定方法的方法學(xué)驗(yàn)證,證明方法可行；而有關(guān)物質(zhì)主要參照《英國藥典》現(xiàn)行版所載“酮洛芬膠囊”的標(biāo)準(zhǔn),即采用HPLC法,對已知雜質(zhì)A和雜質(zhì)C采用外標(biāo)法,對未知雜質(zhì)采用主成分自身對照法。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證,證明方法可行。另外,本文對酮洛芬注射液的鑒別與檢查進(jìn)行了質(zhì)量研究。結(jié)果,鑒別項(xiàng)目均為陽性；檢查項(xiàng)目均符合《中國藥典》注射液項(xiàng)下相關(guān)要求；按照建立的酮洛芬含量和有關(guān)物質(zhì)測定方法對三批酮洛芬注射液進(jìn)行了測定,結(jié)果均符合限度要求,進(jìn)一步證明其方法靈敏度高,重復(fù)性好,可操作性強(qiáng)。穩(wěn)定性研究：本文對酮洛芬注射液進(jìn)行了影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)。影響因素試驗(yàn)進(jìn)行了高溫試驗(yàn)[(60±2)℃]、強(qiáng)光照試驗(yàn)[(4500±500)lx]和凍融試驗(yàn)(-10--20℃冰箱冷凍室,40℃電熱干燥箱,循環(huán)三次),結(jié)果：酮洛芬注射液在強(qiáng)光照射下會(huì)發(fā)生降解,主要指標(biāo)發(fā)生明顯變化,即含量下降,有關(guān)物質(zhì)增加,故儲(chǔ)存及運(yùn)輸過程中應(yīng)避光；高溫60℃和凍融條件下的外觀性狀、顏色、pH值、含量和有關(guān)物質(zhì)等主要指標(biāo)均無明顯變化,說明酮洛芬注射液在這些條件下較穩(wěn)定。酮洛芬注射液按上市包裝在加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)條件下均較穩(wěn)定,且長期試驗(yàn)仍在繼續(xù)考察之中。急性毒性試驗(yàn)、鎮(zhèn)痛作用及對中樞神經(jīng)系統(tǒng)影響：急性毒性試驗(yàn)采用一次給藥觀察14d的試驗(yàn)方法。鎮(zhèn)痛試驗(yàn)采用的是小鼠熱板法和小鼠醋酸扭體法,均表現(xiàn)出明顯的鎮(zhèn)痛作用和量效關(guān)系。對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響試驗(yàn)表明,酮洛芬能使小鼠自主活動(dòng)減少,對小鼠協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)具有較弱的抑制作用,與巴比妥類藥物聯(lián)用具有微弱的協(xié)同作用,能延長雄性小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間。刺激性試驗(yàn)結(jié)果,經(jīng)肉眼觀察酮洛芬注射液對血管及肌肉均沒有明顯刺激性。體外溶血試驗(yàn),未見溶血和紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。以上試驗(yàn)表明,酮洛芬注射液的鎮(zhèn)痛效果確切,安全性高,對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有較弱的抑制作用。非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究：本文建立了大鼠血漿酮洛芬濃度測定的RP-HPLC方法,比較了酮洛芬注射液肌注、靜注大鼠后的藥代動(dòng)力學(xué)特征。RP-HPLC法測定血藥濃度,DAS 2.0藥動(dòng)學(xué)軟件處理血藥濃度數(shù)據(jù)。試驗(yàn)結(jié)果：酮洛芬與雜質(zhì)完全分離且無其它干擾,血漿酮洛芬濃度在0.02～40μg·ml-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9998),定量下限(LLOQ)為0.02μg·ml-1。高、中、低濃度酮洛芬的提取回收率均值分別為81.47%、82.32%和79.88%；日內(nèi)精密度分別為2.98%、3.19%和3.43%；日間精密度分別為6.03%、4.82%和5.27%。大鼠單次肌內(nèi)和尾靜脈注射給藥的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)：T1/2z分別為5.19±0.08 h和2.95±0.14 h,Tmax分別為0.33±0.01h和0.02±0.01 h,Cmax分別為18.32±0.02 mg/L和19.02±0.01 mg/L, AUC0-24分別為36.46±0.17 mg/L·h和37.30±0.23 mg/L·h。藥代參數(shù)表明,酮洛芬注射液肌內(nèi)注射吸收迅速且完全,給藥后約20分鐘血藥濃度達(dá)高峰,絕對生物利用度高達(dá)97.7%,可為臨床肌內(nèi)注射給藥提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。本研究建立的RP-HPLC檢測血漿酮洛芬濃度的方法,簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好、特異性強(qiáng),可用于血漿酮洛芬濃度測定及其藥代動(dòng)力學(xué)研究。
【學(xué)位單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R943;R965
【部分圖文】：

長期試驗(yàn)結(jié)果，本品長期６個(gè)月后仍穩(wěn)定，長期試驗(yàn)還在進(jìn)行中。膽藏條件逡逑為：遮光、密閉保存。逡逑麗洛芬注射液的中試樣品，如圖６－１。逡逑ＩｈＩＨ逡逑圖６－１麗巧芬注射液中試樣品逡逑Ｆｉｇ邋６－１邋Ｓａｍｐｌｅｓ邋ｏｆ邋ｋｅｌ：ｏｐｒｏｆｅｎ邋ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ逡逑６．３討論逡逑藥物制劑的穩(wěn)定程度對于藥物制劑的有效性和安全性起著至關(guān)重要的作用，逡逑所Ｗ對藥物制劑的穩(wěn)定性進(jìn)行研究，對保證藥物制劑的質(zhì)量與安全具有十分重要逡逑的意義。穩(wěn)定性研究一般包括影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)。逡逑本文參照２０１０年版《中國藥典》及＂化學(xué)藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則＂的逡逑有關(guān)要求進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)。在高溫、光照和凍融試驗(yàn)考察的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了加速逡逑４２逡逑

理鹽水）進(jìn)斤實(shí)驗(yàn)，在３７°Ｃ恒溫箱中溫育，觀察３小時(shí)。逡逑結(jié)果，麗洛芬注射液及陰性對照品均無溶血和紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，陽性對照品逡逑呈現(xiàn)溶血，見圖７－６。表明，廁洛芬注射液體外溶血實(shí)驗(yàn)未見溶血和紅細(xì)胞凝集現(xiàn)逡逑象。逡逑５４逡逑

Ｃ邐Ｄ逡逑圖７－５麗洛芬注射液肌肉刺激試驗(yàn)結(jié)果（Ａ、目一生理扯水組，Ｃ、Ｄ—酬洛芬注射液組）逡逑Ｆｉｇ邋７－５邋Ｔｈｅ邋ｒｅｓｕｌｔｓ邋ｏｆ邋ｍｕｓｃｌｅ邋ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ邋化Ｓｔ邋ｉｎ邋ｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ邋ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ逡逑７．２．４．３溶血性試驗(yàn)逡逑采用麗洛芬注射液臨床推薦劑量、陽性對照品（蒸夬水）、陰性對照品（生逡逑理鹽水）進(jìn)斤實(shí)驗(yàn)，在３７°Ｃ恒溫箱中溫育，觀察３小時(shí)。逡逑結(jié)果，麗洛芬注射液及陰性對照品均無溶血和紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，陽性對照品逡逑呈現(xiàn)溶血，見圖７－６。表明，廁洛芬注射液體外溶血實(shí)驗(yàn)未見溶血和紅細(xì)胞凝集現(xiàn)逡逑象。逡逑５４逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

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本文編號：2817631