發(fā)布時(shí)間：2020-09-12 12:12

　　 目的:研究頭孢丙烯(CE)與牛血清白蛋白(BSA)之間的相互作用。方法:采用熒光猝滅光譜法、紫外光譜法和同步熒光光譜法,研究289、299、309 K溫度下作用50 min時(shí)CE與BSA的相互作用。根據(jù)Stern-Volmer方程計(jì)算動(dòng)態(tài)猝滅常數(shù)(KSV)和動(dòng)態(tài)猝滅速率常數(shù)(Kq),Lineweaver-Burk方程計(jì)算靜態(tài)猝滅結(jié)合常數(shù)(KLB)和紫外吸收光譜圖判斷猝滅類型;根據(jù)雙對(duì)數(shù)方程計(jì)算結(jié)合常數(shù)(Kb)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)(n);根據(jù)熱力學(xué)公式計(jì)算焓變(ΔH)熵變(ΔS)和吉布斯自由能變(ΔG);根據(jù)Hill方程計(jì)算Hill系數(shù)(nH)。結(jié)果:3個(gè)溫度下的BSA熒光強(qiáng)度隨著CE濃度升高而有規(guī)律地降低;KSV、Kq、KLB、Kb、n和nH均隨著溫度升高而降低;ΔG0,ΔH0,ΔS0;n約等于1;nH小于1。結(jié)論:CE對(duì)BSA熒光產(chǎn)生靜態(tài)猝滅,二者間具有一定的結(jié)合作用;其反應(yīng)是一個(gè)自發(fā)的放熱過程,主要結(jié)合力為氫鍵和范德華力,結(jié)合位點(diǎn)主要位于亞螺旋域ⅡA;CE對(duì)結(jié)合反應(yīng)產(chǎn)生負(fù)協(xié)同作用,對(duì)BSA構(gòu)象不產(chǎn)生影響;結(jié)合位點(diǎn)更接近于酪氨酸。
【部分圖文】：

始x朣V減小，正好與靜態(tài)猝滅機(jī)制一致。2.3.2Lineweaver-Burk方程若CE對(duì)BSA為靜態(tài)猝滅，應(yīng)符合Lineweaver-Burk方程[7-9]：（F0－F）－1＝F0－1+（KLBF0[c]）－1，式中，KLB為靜態(tài)猝滅結(jié)合常數(shù)。以（F0－F）－1對(duì)[c]－1作不同溫度下的Lineweaver-Burk曲線。不同溫度下FCE對(duì)BSA熒光猝死的Lineweaver-Burk曲線見圖3，Lineweaver-Burk方程及相關(guān)參數(shù)見表2。由圖3可知，隨著溫度的升高，直線斜率逐漸增大，則KLB逐漸下降，這與因靜態(tài)猝滅方式而形成的復(fù)合物隨溫度升高圖1289K溫度下CE-BSA體系的熒光猝滅光譜圖Fig1FluorescencequenchingspectrogramofCE-BSAsys-temat289K180016001400120010008006004002000300320340360380400420440波長，nm光強(qiáng)度熒1↓121.451.401.351.301.251.201.151.101.051.000.950.00.51.01.52.02.53.0[c]×10－6mol/LF0/F289K299K309K圖2不同溫度下CE-BSA體系的Stern-Volmer曲線Fig2Stern-VolmercurvesofCE-BSAsystematdifferenttemperatures20181614121086420051015202530354045[c]－1×10－5mol－1·L－1（F0/F）－1×01－3309K299K289K圖3不同溫度下CE-BSA體系的Lineweaver-Burk曲線Fig3Lineweaver-BurkcurvesofCE-BSAsystematdiffer-enttemperatures··4361

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本文編號(hào)：2817617