乳腺癌,女性常見惡性腫瘤之一。研究表明,引起乳腺癌患者死亡的最主要因素是遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移,而轉(zhuǎn)移位點主要包括骨、肺、肝轉(zhuǎn)移等。由于骨組織的特殊構(gòu)造和生理微環(huán)境,適合腫瘤細(xì)胞生長,使其成為乳腺癌最常見的轉(zhuǎn)移部位。然而,按傳統(tǒng)給藥方式,因小分子化療藥物不具有選擇性,且對骨的滲透性低,很難使藥物有效地遞送至骨轉(zhuǎn)移瘤部位,因此常常需要加大藥量,而大劑量給藥易導(dǎo)致其他臟器的損傷。因此,開發(fā)合適的針對乳腺癌骨轉(zhuǎn)移的載體及遞藥系統(tǒng)具有重要的理論和現(xiàn)實意義。隨著納米技術(shù)的發(fā)展,環(huán)境響應(yīng)型聚合物膠束越來越受到醫(yī)藥工作者的青睞。聚乙二醇-聚賴氨酸(PEG-b-PLL)因具有良好的生物相容性、可被化學(xué)修飾而被廣泛用于DNA、RNA和化療藥物的遞送。本課題以PEG-b-PLL為基礎(chǔ)載體聚合物,通過化學(xué)鍵合,將化療藥物硼替佐米(BTZ)和骨靶向配體阿侖膦酸鈉(ALN)修飾到PEG-b-PLL上,設(shè)計了一個具有骨靶向性和pH響應(yīng)釋藥的納米遞藥系統(tǒng)(ALN-NPs)。ALN-NPs可在血液循環(huán)中穩(wěn)定傳輸而不釋放出藥物;然后,利用ALN的作用透過骨組織毛細(xì)血管壁到達(dá)骨表面,在實體瘤的高通透性和滯留效應(yīng)效應(yīng)(EPR效應(yīng))作用下,轉(zhuǎn)運(yùn)至腫瘤組織,被腫瘤細(xì)胞攝取后,釋放出BTZ,殺死腫瘤細(xì)胞�；谝陨显O(shè)計,首先采用~1H NMR和紅外光掃描對所合成的聚合物(PEG-b-PLL,PEG-b-P(LL-g-Cat-BTZ),ALN-PEG-b-PLLZ)進(jìn)行了表征;然后采用納米共沉淀法制備了骨靶向納米粒(ALN-NPs),粒徑為95±15 nm,外觀圓整,載藥量為3.06%±0.5,且具有明顯的pH響應(yīng)性和體外骨靶向性。其次,細(xì)胞實驗結(jié)果顯示,相比于游離BTZ,相同藥物劑量的ALN-NPs作用48 h后具有更強(qiáng)的毒性;此外,修飾ALN后,RAW 264.7細(xì)胞對ALN-NPs的攝取和未修飾ALN的納米粒沒有明顯區(qū)別,表明ALN的修飾不影響膠束的性質(zhì);CLSM結(jié)果顯示納米粒被MDA-MB-231細(xì)胞攝取后,藥物可從溶酶體中逃逸出來。最后,小動物活體成像顯示ALN-NPs可以有效提高納米粒在荷瘤小鼠骨組織和腫瘤組織的累積和滯留時間;體內(nèi)藥效試驗表明,ALN-NPs組能顯著抑制小鼠腫瘤生長;并且,相對于游離BTZ組,ALN-NPs組治療后小鼠體重?zé)o明顯變化。Micro-CT結(jié)果顯示,經(jīng)ALN-NPs治療后,小鼠脛骨破壞明顯小于無骨靶向性組。綜上所述,本課題構(gòu)建的pH響應(yīng)型骨靶向納米遞藥系統(tǒng)具有良好的骨靶向性和抗腫瘤活性。
【學(xué)位單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R943;R96
【部分圖文】：

在骨組織蓄積，然后通過腫瘤組織的 EPR 效應(yīng)[38, 39]在腫瘤組織蓄積。最后，載藥膠束被腫瘤細(xì)胞攝取后，在溶酶體酸性條件下，硼酸酯鍵斷裂，釋放出 BTZ，殺死腫瘤細(xì)胞。本遞藥系統(tǒng)因在表面修飾了 ALN，具有骨靶向性，可在骨組織富集；而聚合物骨架具有 PEG，可以延長納米粒在體內(nèi)循環(huán)時間；BTZ 與聚合物形成大分子前藥，可以預(yù)防藥物在體循環(huán)中提前釋放，降低毒副作用。

9圖 1.1 PEG-b-PLL的合成路線2.1.1 Lys-NCA 的合成首先合成 Lys-NCA，參照文獻(xiàn)[40, 41], 通過 Fuchs-Farthing 方法制備。所有玻璃儀器在使用前燥箱 40 ℃干燥 2 h。稱取 3 g (1.14 M) Lys(Z) 溶入 50 mLTHF 后置于三頸圓底燒瓶中。另取 2.5 g (1.72 M)三光氣完全溶入 10 mL THF 后置于恒壓滴液漏斗中并連到燒瓶上。隨后，在攪拌、50 ℃和氬氣保護(hù)條件下，逐滴滴入三光氣，讓反應(yīng)進(jìn)行一段時間，待反應(yīng)液完全變?yōu)槌吻迓渣S溶液后，繼續(xù)反應(yīng)半小時，并排除多余光氣。隨后，旋蒸除去多余的反應(yīng)液，將剩下的反應(yīng)液逐滴加入到快速攪拌的大量預(yù)冷的正己烷中沉淀，一段時間后，抽濾得到白色

11圖 1.2 PEG-b-P(LL-g-Cat-BTZ)的合成路線。2.2.1 PEG-b-(PLL-g-Cat)的合成所有玻璃儀器在使用前烘箱中 40 ℃干燥 2 h。精密稱取 Cat 300 mg，EDC.HCl 600 mg，NHS 370 mg 混合后溶入 60 mL 無水 DMF 中，室溫攪拌反應(yīng) 2 h。另稱取一定量 PEG-b-PLL 完全溶入無水 DMF 后，在氬氣保護(hù)下逐滴加入到上述溶液中，并加入幾滴三乙胺溶液，混合反應(yīng)液在室溫下反應(yīng) 24 h。待反應(yīng)完全后，

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號：2817399