【摘要】：第一部分靜電沉積法制備口服低分子肝素微球目的:采用靜電沉積技術(shù)以羧甲基殼聚糖(Carboxymethyl chitosan,CMC)和聚賴氨酸(Polylysine,PLL)為促吸收劑制備口服低分子肝素微球(Low molecular weight heparin-loaded microspheres,LMWH-MP),并對(duì)載藥微球進(jìn)行工藝優(yōu)化。方法:以乳化溶劑揮發(fā)法制備的聚乳酸微球?yàn)槟０?分別將陽離子聚合物羧甲基殼聚糖和聚賴氨酸與低分子肝素交替沉積在聚乳酸微球表面來制備LMWH-MP。建立低分子肝素體外分析方法,并進(jìn)行重現(xiàn)性考察。以載藥量為主要評(píng)價(jià)指標(biāo),通過單因素考察和正交試驗(yàn)對(duì)載藥微球進(jìn)行工藝優(yōu)化。測(cè)定最優(yōu)工藝下LMWH-MP的載藥量并計(jì)算包封率。結(jié)果:CMC-LMWH-MP的最優(yōu)工藝為:低分子肝素91.2 IU、p H 2.5、NaCL 0 mM,載藥量(8.81±0.14)%,包封率(54.80±0.64)%;PLL-LMWH-MP最優(yōu)工藝為;低分子肝素91.2IU、pH 2、NaCL 0 mM;載藥量(7.34±0.12)%;包封率(46.07±0.76)%。結(jié)論:靜電沉積技術(shù)操作簡(jiǎn)便,條件溫和,通過工藝優(yōu)化得到LMWH-MP的最佳制備工藝。第二部分口服低分子肝素微球的質(zhì)量評(píng)價(jià)目的:對(duì)靜電沉積技術(shù)制備的兩種低分子肝素微球進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。方法:用掃描電鏡觀察微球的表面形態(tài),用馬爾文粒度儀測(cè)定微球的粒徑和表面電勢(shì)。將LMWH-MP置于人工胃液中3 h,測(cè)定微球的粒徑和表面電勢(shì),評(píng)價(jià)LMWH-MP在人工胃液中的穩(wěn)定性;另將LMWH-MP置于不同條件下(4°C、25°C)存放,分別在1個(gè)月、3個(gè)月取樣測(cè)定其粒徑和表面電勢(shì),評(píng)價(jià)LMWH-MP的儲(chǔ)存穩(wěn)定性;采用漿法測(cè)定LMWH-MP藥物累計(jì)釋放率,計(jì)算溶出度。結(jié)果:掃描電鏡結(jié)果顯示聚乳酸微球和載藥微球均呈圓球球狀,聚乳酸微球和PLL-LMWH-MP光滑,而CMC-LMWH-MP表面略顯粗糙;聚乳酸微球、CMC-LMWH-MP和PLL-LMWH-MP的粒徑分別為(2.03±0.13)μm、(4.58±0.36)μm、(4.43±0.31)μm;載藥微球在制備過程中表面電勢(shì)呈正負(fù)交替變化,表明低分子肝素和羧甲基殼聚糖或聚賴氨酸成功沉積在聚乳酸微球表面;CMC-LMWH-MP與PLL-LMWH-MP在人工胃液中3h粒徑無明顯變化,表面電勢(shì)有所降低但仍帶正電荷,因此微球在人工胃液中穩(wěn)定性良好;載藥微球在4℃和25℃條件儲(chǔ)存3個(gè)月,兩種微球粒徑無明顯變化,在4℃條件下儲(chǔ)存,微球粒徑變化更小,因此CMC-LMWH-MP和PLL-LMWH-MP在4℃和25℃條件儲(chǔ)存3個(gè)月穩(wěn)定性良好;在pH 6.8的磷酸鹽緩沖液中CMC-LMWH-MP逐漸釋放約90%的低分子肝素,PLL-LMWH-MP只有少量釋藥。結(jié)論:靜電沉積技術(shù)制備的LMWH-MP粒徑均一,穩(wěn)定性良好,質(zhì)量可靠。第三部分口服低分子肝素微球的抗凝血效果目的:對(duì)靜電沉積技術(shù)制備的兩種口服低分子肝素微球進(jìn)行藥效學(xué)考察。方法:以活化部分凝血活酶時(shí)間(Activated partial thromboplastin time,APTT)為指標(biāo),測(cè)定大鼠口服LMWH-MP前后不同時(shí)間點(diǎn)的APTT,評(píng)價(jià)載藥微球?qū)Φ头肿痈嗡卦诖笫篌w內(nèi)的抗凝血效果。結(jié)果:與口服低分子肝素鈉溶液組的大鼠相比口服LMWH-MP顯著延長(zhǎng)了大鼠血漿APTT值(p0.05),抗凝效果峰值均在3 h左右出現(xiàn),可持續(xù)作用5 h,且CMC-LMWH-MP的抗凝效果比PLL-LMWH-MP強(qiáng)。結(jié)論:靜電沉積技術(shù)制備的LMWH-MP能顯著延長(zhǎng)大鼠血漿APTT值,有較好的抗凝效果。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R943;R965
【圖文】：

磷酸鹽緩沖液pH值對(duì)PLL-LMWH-MP載藥量的影響

圖 5 低分子肝素的加入量對(duì)微球載藥量的影響 5 The influence of quality of low molecular weight heparin on the loquantity of microspheres

圖 6 微球掃描電鏡圖1 PLA 微球；2 PLL-LMWH-MP；3 CMC-LMWH-MPFig 6 The scanning electron microscope images of microspheres1 PLA microspheres；2 PLL-LMWH-MP；3 CMC-LMWH-MP

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 蒲曦鳴;康云清;陳愛政;尹光福;廖立;陳琳;;超臨界CO_2抗溶劑法制備聚乳酸藥物緩釋微球[J];功能材料;2007年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 張靜;油酰殼聚糖納米粒作為抗腫瘤藥物載體的研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 方井晉;肝素鈉有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法學(xué)研究及效價(jià)的快速測(cè)定[D];浙江大學(xué);2012年

2 陳水娟;二甲基-β-環(huán)糊精和殼聚糖提高難溶性藥物BMCP25口服生物利用度研究[D];華東理工大學(xué);2012年

3 謝瑜亮;基于纖維素硫酸鈉/殼聚糖的層層自組裝復(fù)合膜及微膠囊的制備與表征[D];浙江大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2806471