【摘要】：隨著計算機化社會中視頻顯示終端(VDT)的集中工作,視疲勞的預防和緩解成為當下重要的研究領域。視疲勞是通過疲勞、眼睛紅眼、眼痛、視力模糊和偶爾頭痛等方式體現(xiàn)的,這些非特異性癥狀表現(xiàn)出來的眼科疾病是一種技術(shù)壓力綜合征�；ㄇ嗨貫樗苄蕴烊粺o毒色素,其保護視力作用已被廣泛研究,但是國內(nèi)針對越橘花青素的研究大部分局限于花青素的粗提取物的制備及其結(jié)構(gòu)鑒定,關(guān)于純化工藝、改善花青素穩(wěn)定性及其去翳明目的制劑的研究較少。因此,研制越橘花青素制劑具有重要的意義。本課題的研究內(nèi)容主要包括以下幾部分:1.越橘花青素的制備1.1越橘花青素提取工藝研究本課題以花青素提取率為考察指標,以越橘果為試驗原料,采用乙醇浸提法,設計單因素試驗考察不同酸化劑、乙醇體積分數(shù)、料液比、提取時間、提取溫度和pH值,根據(jù)單因素試驗結(jié)果選取乙醇體積分數(shù)、提取溫度和提取時間這三個因素設計Box-Behnken組合試驗,并采用響應曲面法確定乙醇浸提花青素最佳工藝參數(shù)為:乙醇體積分數(shù)為50%、料液比為1:30、溫度為62℃、提取時間為60min、pH為1.50。1.2越橘花青素純化工藝研究本課題以花青素靜態(tài)吸附率和靜態(tài)解吸率為考察指標,對D101、AB-8、聚酰胺、Amberlite XAD7四種樹脂進行篩選,最終采用大孔樹脂D101對越橘花青素粗提物進行純化工藝研究。以越橘花青素動態(tài)吸附率和動態(tài)解吸率為考察指標,在前期試驗研究的基礎上,對越橘花青素大孔樹脂純化工藝條件進行優(yōu)化,確定純化工藝為:取6BV pH1.5上樣液(3.81mg/ml),通過D101樹脂柱,上樣流速為1ml/min,先用2BV蒸餾水除雜,再用5BV的pH1.0的70%酸性乙醇洗脫,收集洗脫液。1.3越橘花青素干燥工藝研究本課題采用真空冷凍干燥法對花青素溶液進行干燥,并以外觀性狀和花青素含量為優(yōu)化指標,確定真空冷凍干燥過程中應加入谷胱甘肽和蔗糖作為穩(wěn)定劑,來提高花青素的穩(wěn)定性和減少活性成分的流失。2、越橘花青素片的制備工藝研究2.1花青素微囊的制備工藝研究本課題以花青素包埋率為考察指標,選擇阿拉伯膠和玉米肽(1:1)作為壁材進行研究,分別對包埋溫度、包埋時間、壁芯比和壁材濃度進行單因素考察,從而確定最佳包埋工藝參數(shù)為包埋溫度為20℃,包埋時間為15min,壁芯比為3:1,壁材濃度為2%。2.2制劑成型工藝研究2.2.1劑量的確定:參考文獻~([1]),確認越橘花青素治療視覺受損的起效量為每日50mg,通過對不同越橘花青素處方量的成型比較,確定每片越橘花青素處方量為50%,片重為1.0g,越橘花青素片用量為:一日兩次,一次2片。2.2.2輔料的篩選:通過對輔料(填充劑、潤滑劑、崩解劑)種類及其比例的單因素篩選,本制劑最優(yōu)處方為(1000片量):越橘提取物(500g),甘露醇(184g)、SuperTab24AN(276g)、低取代羥丙纖維素(30g)、硬脂酸鎂(10g),采用粉末直接壓片法壓片。3.質(zhì)量標準的建立本課題對越橘果、越橘提取物和越橘花青素片中花青素進行了含量測定,并進行方法學考察。本課題采用高效液相法對越橘提取物進行了定性指紋圖譜研究,初步建立了本品的指紋圖譜,并進行了方法學驗證和相識度評價。并采用對照品圖譜對本品的指紋圖譜進行指認,確定了其中花青素3個特征峰的位置,得出越橘提取物對照指紋圖譜,有13個主要共有峰,飛燕草素為參照峰。并利用UPLC快速分離和Q-TOF/MS準確性優(yōu)勢,對越橘提取物中的小分子活性化合物進行了UPLC-ESI-Q-TOF/MS定性篩查。本課題同時對本制劑進行了性狀、片重差異、崩解時限及微生物限度檢查。結(jié)果表明,該標準簡便、易行,能有效控制本制劑的質(zhì)量。對越橘提取物和越橘花青素片進行影響因素試驗、3個月加速穩(wěn)定性試驗和3個月長期試驗,結(jié)果表明,花青素溶液應在避光、低溫且酸性的條件下保存,避免與金屬離子共存且本制劑3個月內(nèi)基本穩(wěn)定。穩(wěn)定性研究還在繼續(xù)進行中。4.初步藥效學試驗通過建立視網(wǎng)膜光學損傷模型,發(fā)現(xiàn)越橘花青素可以有效提高光損傷大鼠視網(wǎng)膜細胞的SOD、GSH-Px活性及總蛋白含量,顯著降低MDA含量。表明越橘花青素對視網(wǎng)膜光損傷具有一定的保護作用,其可能的機制之一是通過增加清除自由基的作用阻止細胞脂質(zhì)過氧化。綜上所述,越橘花青素片達到了《中國藥典》對片劑的要求,為劑量小、療效高的固體制劑。
【學位授予單位】：江西中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R943
【圖文】：

取越橘凍干粉100g，于55℃的水浴條件下，分別用30倍量pH2(鹽酸調(diào)節(jié)pH)的40%、50%、60%、70%、80%的乙醇浸提30min，濾過，合并濾液，得總提取液。按“2.1.2.2”下方法測定含量，計算花青素提取率，結(jié)果見表2-2和圖2-2。表2-2 乙醇體積分數(shù)考察結(jié)果Table 2-2 Results of ethanol volume fraction乙醇體積分數(shù)/% 40 50 60 70 80花青素提取率/% 53.66±0.36 56.79±0.84 54.21±0.19 54.39±0.24 53.84±0.21圖2-2 乙醇體積分數(shù)考察結(jié)果Figure 2-2 Results of ethanol volume fraction如圖可知：花青素提取率在乙醇體積分數(shù)為50%時最高，而在其他濃度中的溶解度均較低。因此選擇乙醇體積分數(shù)為50%。③料液比的考察取越橘凍干粉100g，于55℃的水浴條件下，分別用10、20、30、40、50倍量pH2(鹽酸調(diào)節(jié)pH)的50%的乙醇浸提30min，濾過，合并濾液，得總提取液。按“2.1.2.2”下方法測定含量，計算花青素提取率，結(jié)果見表2-3和圖2-3。表2-3 料液比考察結(jié)果Table 2-3 Results of material-liquid ratio inspection料液比 10 20 30 40 50花青素提取率/% 49.79 54.42 60.79 55.65 53.29

12圖2-3 料液比考察結(jié)果Figure2-3 Results of material-liquid ratio inspection如圖可知：越橘凍干粉（g）與提取劑（ml）用量比例為1:30時，花青素提取率最高，因此選擇越橘凍干粉（g）與提取劑（ml）用量比例為1:30。④提取溫度的考察取越橘凍干粉100g，分別于35℃、45℃、55℃、65℃、75℃的水浴條件下，用30倍量pH2(鹽酸調(diào)節(jié)pH)的50%的乙醇浸提30min，濾過，合并濾液，得總提取液。按“2.1.2.2”下方法測定含量，計算花青素提取率，結(jié)果見表2-4和圖2-4。表2-4 提取溫度考察結(jié)果Table 2-4 Results of extraction temperature inspection溫度/℃ 35 45 55 65 75花青素提取率/% 58.40 59.13 60.15 61.71 55.27圖2-4 提取溫度考察結(jié)果Figure 2-4 Results of extraction temperature inspection如圖可知：隨著溫度的升高，花青素提取率呈先升后降的趨勢，溫度在65℃時提取率最高

取越橘凍干粉100g，分別于35℃、45℃、55℃、65℃、75℃的水浴條件下，用30倍量pH2(鹽酸調(diào)節(jié)pH)的50%的乙醇浸提30min，濾過，合并濾液，得總提取液。按“2.1.2.2”下方法測定含量，計算花青素提取率，結(jié)果見表2-4和圖2-4。表2-4 提取溫度考察結(jié)果Table 2-4 Results of extraction temperature inspection溫度/℃ 35 45 55 65 75花青素提取率/% 58.40 59.13 60.15 61.71 55.27圖2-4 提取溫度考察結(jié)果Figure 2-4 Results of extraction temperature inspection如圖可知：隨著溫度的升高，花青素提取率呈先升后降的趨勢，溫度在65℃時提取率最高，因此確定提取溫度為65℃。

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本文編號：2798202