沒食子酸氧釩配合物的合成、表征及降糖活性研究

發(fā)布時間：2020-07-30 04:03

【摘要】：目的合成沒食子酸氧釩配合物(GAOV),并對其進行表征,優(yōu)化合成工藝,考察GAOV的急性毒性,探究其體外抗氧化活性、體內(nèi)和體外降糖活性。方法以沒食子酸為配體,硫酸氧釩為釩源制備GAOV,分別考察反應(yīng)時間、pH、反應(yīng)溫度、投料比對GAOV合成產(chǎn)率的影響,采用正交試驗設(shè)計法,優(yōu)化GAOV的合成工藝。采用UV-vis、DSC、IR、XRD、TGA等方法對GAOV進行表征。參照國家急性毒性試驗標準對GAOV和硫酸氧釩進行一次性經(jīng)口急毒試驗。采用紫外分光光度法,測定GAOV對ABTS自由基、H_2O_2和DPPH自由基的清除能力,采用水楊酸法測定羥基自由基清除率;采用普魯士藍法測定GAOV總還原能力。采用DNS比色法,以阿卡波糖為陽性對照,測定GAOV對α-淀粉酶的抑制作用,采用PNPG底物法測定GAOV對α-葡萄糖苷酶的抑制作用。采用鏈脲佐菌素(STZ)建立糖尿病小鼠模型,實驗動物分為正常組、模型組、陽性組、GAOV高、中、低劑量組以及硫酸氧釩高、中、低劑量組,監(jiān)測糖尿病小鼠飲食量、飲水量、體重和空腹血糖值(FBG)的變化,測定小鼠血清生化指標(UREA、Cr、ALB、ALT)同時測定各組小鼠血脂四項(CHO、TG、LDL-C、HDL-C),計算胰腺、肝、腎、脾等臟器指數(shù)。取各組小鼠肝、腎、胰腺組織HE染色并對組織形態(tài)學進行觀察。結(jié)果GAOV合成最佳工藝條件為:反應(yīng)溫度70℃,反應(yīng)體系pH=7,攪拌時間10h,沒食子酸和硫酸氧釩的摩爾比1:1。急性毒性試驗結(jié)果顯示GAOV的LD_(50)3000mg·kg~(-1),遠小于硫酸氧釩LD_(50)=153.23 mg·kg~(-1)。在ABTS清除實驗中,Vc、沒食子酸和GAOV的IC_(50)值分別為0.009 mg·mL~(-1),0.017 mg·mL~(-1),0.048 mg·mL~(-1)。在對H_2O_2的清除實驗中,Vc、沒食子酸和GAOV的IC_(50)值分別為0.016 mg·mL~(-1),1.583 mg·mL~(-1),0.128 mg·mL~(-1)。在對·OH自由基的清除實驗中,Vc、沒食子酸和GAOV的IC_(50)值分別為0.0176 mg·mL~(-1),0.0285 mg·mL~(-1),0.9580 mg·mL~(-1)。在對DPPH的清除實驗中,Vc、沒食子酸和GAOV的的IC_(50)值分別為0.00020 mg·mL~(-1),0.00386 mg·mL~(-1),0.0168mg·mL~(-1)。在體外降糖活性實驗中,對α-淀粉酶的抑制作用大小關(guān)系為阿卡波糖GAOV沒食子酸,對α-葡萄糖苷酶的抑制作用大小關(guān)系為GAOV阿卡波糖沒食子酸。在體內(nèi)降糖活性實驗中,與模型組相比,GAOV組小鼠體重、飲食飲水量、FBG及各血清生化指標、血脂四項等指標變化均存在顯著性差異(P0.05)。其中,GAOV中劑量組與模型組有極顯著性差異(P0.01),與陽性組無顯著性差異(P0.05)。結(jié)論本文所用沒食子酸氧釩配合物的制備方法操作簡單、安全可靠,產(chǎn)率穩(wěn)定,重復(fù)性好。合成的GAOV相比于硫酸氧釩毒性大大降低,在體外對ABTS、H_2O_2、DPPH等自由基具有很強的清除作用,對α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶具有較強的抑制作用,并對STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的血糖和血清指標有一定的調(diào)節(jié)作用。為氧釩配合物的進一步的研究提供新思路。
【學位授予單位】：佳木斯大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R914;R965
【圖文】：