【摘要】：伴隨著當(dāng)代社會生活質(zhì)量的顯著提高,由于不合理飲食導(dǎo)致血糖代謝紊亂進(jìn)一步惡化為糖尿病的現(xiàn)象在中老年階段極為普遍,我國已有將近一億人的起居生活受到糖尿病的影響。近30年來,由于人們不健康的生活方式導(dǎo)致糖尿病病例增長極為迅速,并且該病往往會伴隨其他一些疾病的產(chǎn)生。當(dāng)今服用西藥是治療高血糖的主要方式,但降血糖藥物(二甲雙胍等)屬于化學(xué)藥品,毒副作用大,所以急需尋找一些有機(jī)的毒副作用非常小的物質(zhì)來慢慢代替西藥。酵母硒作為一種新型富硒品,含有硒氨基酸,硒多糖,硒蛋白等有機(jī)硒營養(yǎng)成分,毒副作用低,故本試驗(yàn)對幾種酵母硒進(jìn)行毒理學(xué)安全評價后,篩選出毒性較低、抗氧化能力強(qiáng)的合適劑量酵母硒用于進(jìn)行高血糖小鼠的降血糖作用研究,一方面可直接或間接地用于人和動物的硒補(bǔ)充劑,一方面可以作為輔助降血糖藥物。主要研究方法及結(jié)果如下:1.酵母硒的制作。將生物發(fā)酵罐和酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基(YPD)滅菌后,調(diào)節(jié)控制好發(fā)酵條件,將活化后的耐硒釀酒酵母種子液以發(fā)酵液總量的5%接入發(fā)酵罐,發(fā)酵培養(yǎng)一周后(發(fā)酵液生物量處于穩(wěn)定期),將亞硒酸鈉按照逐次分批進(jìn)行補(bǔ)料的方式加入發(fā)酵罐內(nèi),發(fā)酵一定時間制得酵母硒。本試驗(yàn)按照硒添加量和發(fā)酵時間不同制得了5種酵母硒。2.急性毒性試驗(yàn)。采用改良寇式法將5種酵母硒通過對正常昆明種小鼠進(jìn)行一次性經(jīng)口灌胃,計(jì)算半數(shù)致死量(LD_(50))。結(jié)果發(fā)現(xiàn),硒添加量為4000 mg/kg(以硒計(jì))發(fā)酵時間為一階段的酵母硒的LD_(50)=33.33 mg/kg,屬于劇毒。故用其余四種酵母硒進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。3.亞慢性毒性試驗(yàn)。將130只昆明種小白鼠隨機(jī)分成13組:對照組和4種酵母硒的高、中、低劑量組,持續(xù)灌胃30天。用體重、攝食量、臟器系數(shù)、體內(nèi)抗氧化指標(biāo)進(jìn)行亞慢性毒性評價。通過各個指標(biāo)綜合評價,硒添加量為2000 mg/kg發(fā)酵時間為二階段的酵母硒(4號)中劑量組和硒添加量為2000 mg/kg發(fā)酵時間為三階段的酵母硒(5號)低劑量組的小鼠生長性能好、食物利用率高、體內(nèi)氧化損傷少,故對這兩種硒進(jìn)行下一步蓄積性評價。4.蓄積性試驗(yàn)。將40只健康昆明種小白鼠隨機(jī)分為4組:對照組、亞慢性毒性試驗(yàn)篩選出來的兩種酵母硒灌喂組、5號酵母硒以4號酵母硒的灌胃劑量進(jìn)行灌胃的平行組,采用劑量遞增法對灌胃酵母硒的3組小鼠進(jìn)行灌胃,根據(jù)蓄積系數(shù)、體重、臟器系數(shù)、體內(nèi)硒殘留量進(jìn)行蓄積性評價。結(jié)果顯示,4號酵母硒蓄積系數(shù)K5.26,具有輕度蓄積性,但在相同攝入量的條件下其在小鼠體內(nèi)的硒殘留多于5號酵母硒。5.降血糖試驗(yàn)。將30只健康昆明種小白鼠隨機(jī)分成3組,用于進(jìn)行酵母硒對正常小鼠血糖值影響試驗(yàn);將80只高血糖模型小鼠隨機(jī)分成8組,用于進(jìn)行酵母硒對高血糖小鼠的降血糖作用試驗(yàn)。根據(jù)各組小鼠的不同處理方法持續(xù)灌胃6周,用血糖儀每周末定時測各組小鼠空腹血糖,觀察血糖值變化情況。結(jié)果:第6周后,兩種酵母硒高、中劑量組血糖值與模型對照有顯著差異(p0.05),與空白對照組、二甲雙胍組血糖值亦有顯著差異(p0.05),而兩種酵母硒低劑量組血糖值與模型組、二甲雙胍組、空白對照組都沒有顯著性差異,且各個酵母硒劑量組間血糖值無顯著性差異。結(jié)果表明酵母硒比二甲雙胍的降糖作用表現(xiàn)更慢一些,需要更長時間才能發(fā)揮調(diào)節(jié)血糖代謝作用,更低劑量的酵母硒組由于硒攝入量過少沒有明顯降糖效果,而且降糖效果的最佳攝入劑量還有待進(jìn)一步試驗(yàn)研究探討。
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R965
【圖文】：

均值加減標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示。一個月的喂養(yǎng)期間里，各組小鼠出現(xiàn)中毒性狀中 2 號高、中劑量組，3 號高劑量組小鼠在第量組、3 號中劑量組小鼠在 18 天出現(xiàn)明顯中毒性號高劑量組小鼠在 25 天出現(xiàn)明顯中毒性狀；其不適現(xiàn)象。性狀有：活動緩慢，沒有扒籠現(xiàn)象，嚴(yán)重的閉腳趾傷破，生殖器紅腫，會陰部污穢。2 號高、組在 20 天后出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，數(shù)目較多，4 號和死亡。變化

3.2 3 號酵母硒各劑量組與對照組小鼠體重變化期里，3 號酵母硒各劑量組與對照組小鼠體重變、M3 組小鼠的體重隨著喂養(yǎng)時間慢慢增加，在試驗(yàn)結(jié)束時，對照組和 L3 組小鼠體重沒有 H3 組小鼠體重極顯著低于對照組小鼠體重（p 量的 3 號酵母硒對小鼠生長既沒有明顯抑制作量的 3 號酵母硒對小鼠生長有顯著抑制作用。

3.2 3 號酵母硒各劑量組與對照組小鼠體重變化期里，3 號酵母硒各劑量組與對照組小鼠體重變、M3 組小鼠的體重隨著喂養(yǎng)時間慢慢增加，在試驗(yàn)結(jié)束時，對照組和 L3 組小鼠體重沒有 H3 組小鼠體重極顯著低于對照組小鼠體重（p 量的 3 號酵母硒對小鼠生長既沒有明顯抑制作量的 3 號酵母硒對小鼠生長有顯著抑制作用。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2764225