發(fā)布時間：2020-07-21 08:11

【摘要】：目的觀察肌肽對2型糖尿病大鼠認知功能障礙、海馬組織神經(jīng)元的影響、海馬中氧化應激及NF-κB信號通路的影響。方法50只雄性SD大鼠,隨機選取其中8只普通飼料喂養(yǎng)設為對照組(Con),其他42只大鼠高糖高脂喂養(yǎng)并腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)30 mg·kg~(-1)建立T2DM模型。建模成功后,大鼠隨機分為2型糖尿病組、肌肽(100、300、900 mg·kg~(-1))組。低、中、高劑量肌肽組大鼠分別灌胃100、300、900 mg·kg~(-1)·d~(-1);對照組和T2DM組給予相同體積的蒸餾水。在水迷宮實驗期間,繼續(xù)灌胃CAR。定期測量大鼠血糖及體重;灌服CAR51d后,進行Morris水迷宮測試;HE染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元病理學變化;免疫組化檢測NF-κB p65蛋白表達;試劑盒法檢測海馬中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;高效液相色譜法(HPLC)檢測海馬中谷胱甘肽(GSH)和肌肽含量;免疫印跡實驗檢測海馬組織中胞漿TNF-α、IL-1β及胞核NF-κB p65表達。結果與對照組相比,T2DM模型組的大鼠(1)血糖升高,體重減輕;(2)水迷宮實驗中,大鼠出現(xiàn)認知功能障礙,表現(xiàn)為逃避潛伏期明顯延長(P0.01),大鼠穿越平臺次數(shù)明顯降低(P0.01);(3)大鼠海馬神經(jīng)元排列紊亂且稀疏,細胞形態(tài)不規(guī)則或紡錘形,核凝聚;(4)大鼠海馬NF-κB p65陽性細胞增多(P0.01);(5)大鼠海馬組織SOD活性下降,MDA含量提高;(6)大鼠海馬中GSH和肌肽含量顯著下降;(7)大鼠海馬細胞核NF-κB p65蛋白的表達水平明顯升高,胞漿TNF-α、IL-1β蛋白的表達水平升高。與T2DM模型組相比,(1)CAR組大鼠體重相對增加,血糖無明顯變化;(2)CAR組明顯縮短大鼠逃避潛伏期(P0.01),增加穿越平臺次數(shù)(P0.01);(3)CAR組的大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞排列較整齊,形態(tài)較完整,并對神經(jīng)元有一定改善作用;(4)CAR組的大鼠海馬NF-κB p65陽性細胞明顯減少(P0.01或P0.05);(5)CAR組大鼠海馬組織SOD活性提升,MDA含量下降;(6)CAR組大鼠海馬中GSH和肌肽含量顯著上升;(7)CAR組明顯降低大鼠海馬NF-κB p65蛋白向核內轉移,并下調TNF-α、IL-1β蛋白的表達。結論2型糖尿病可以引起大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞形態(tài)結構異常,海馬部位處于氧化應激失衡狀態(tài),局部炎癥因子TNF-α、IL-1β過度表達,從而導致認知功能障礙,而肌肽可以改善T2DM大鼠認知功能障礙,其機制可能與抑制海馬氧化應激反應,并減少NF-κB p65向核內轉移,下調TNF-α、IL-1β的表達有關。
【學位授予單位】：錦州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R965;Q51
【圖文】：

17（二）空間探索實驗結果第56天撤掉平臺之后，觀察大鼠60s內穿越目標平臺的次數(shù)。見圖2-1(B)，與Con組相比，T2DM組的大鼠在60s內明顯降低(P<0.01)。與T2DM組比較，CAR100組、CAR300組、CAR900組的明顯增加穿越目標平臺次數(shù)(P<0.01或P<0.05)且呈劑量依賴性，表明肌肽可以緩解學習記憶的損傷。圖2-1 各組大鼠逃避潛伏期（A）和穿越平臺次數(shù)（B）(x_±s，n=8)Fig.2-1 Rat escape latency (A) and number of crossing platform (B) in each group注：##P＜0.01 vs Con組；*P＜0

**P＜0.01 vs T2DM組圖2-2 肌肽對2型糖尿病大鼠Morris水迷宮游泳運動軌跡的影響Fig 2-2 Effect of Carnosine on swimming trajectory of Morris water maze in type 2 diabeticrats

CAR 劑量組的大鼠海馬 CA1 區(qū)病理改變明顯減輕，其椎體細胞排列較整齊，形態(tài)較完整，并對神經(jīng)元有一定改善作用，以 CAR900 組病理改善效果最好。圖3 各組海馬HE染色結果Fig.3 The results of HE stain of hippocampus in each group注：A：Con，對照組; B：T2DM，2型糖尿病組; C：CAR 100（mg·kg-1）+T2DM組; CAR 300（mg·kg-1）+T2DM組; CAR 900（mg·kg-1）+T2DM組。四、肌肽對2型糖尿病大鼠海馬中NF-κB p65結果的影響活化的NF-κB p65 陽性細胞胞漿呈棕黃色。光學顯微鏡下觀察可見Con組大鼠海馬少量NF-κB p65陽性細胞胞漿呈棕黃色。與Con組相比較，T2DM組NF-κB p65陽性細胞增多(P<0.01)。與T2DM組相比較，CAR劑量組NF-κB p65陽性細胞明顯減少(P<0.01或P<0.05)。

【參考文獻】

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本文編號：2764145