【摘要】：臨床上,許多患者會(huì)同時(shí)服用多種藥物,因此臨床醫(yī)師必須謹(jǐn)慎用藥,以避免發(fā)生藥物-藥物相互作用(Drug-Drug interaction,DDI)。藥物-藥物相互作用主要與細(xì)胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)的抑制或誘導(dǎo)有關(guān)系[1]。細(xì)胞色素P450酶的抑制可能會(huì)導(dǎo)致作為受害者的藥物的代謝受阻,降低其體內(nèi)清除率,從而使該藥物的體內(nèi)暴露量增加,引起毒性反應(yīng)。相反,細(xì)胞色素P450酶的誘導(dǎo)可能會(huì)使受害者藥物的代謝加快,使其在體內(nèi)的清除加快,體內(nèi)暴露量降低,從而無(wú)法達(dá)到藥效,使得藥物失去其基本作用。介于藥物-藥物相互作用對(duì)藥物在體內(nèi)代謝及處置過(guò)程產(chǎn)生的重要影響,在FDA和CFDA頒布的臨床前研究指導(dǎo)中已經(jīng)明確要求在新藥臨床研究申請(qǐng)(IND)時(shí)遞交的研究資料要包含DDI研究[2][3]。藥物代謝酶種類繁多,其中細(xì)胞色素P450酶家族是最重要的代謝酶家族之一,其參與了市場(chǎng)上大約75%的藥物的代謝。因此由細(xì)胞色素P450酶介導(dǎo)的DDI是重點(diǎn)考察對(duì)象。常用的細(xì)胞色素P450酶相關(guān)的模型有細(xì)胞色素P450重組酶、肝微粒體、S9、肝細(xì)胞等。由于篩選階段化合物的溶解性問(wèn)題,在體外應(yīng)用細(xì)胞色素P450酶進(jìn)行抑制研究時(shí),或多或少會(huì)引入一些有機(jī)溶劑。然而,由于有機(jī)溶劑會(huì)使酶蛋白變性,影響酶活,因此有機(jī)溶劑的量必須控制在一定范圍內(nèi)[4]。本論文應(yīng)用肝微粒體研究細(xì)胞色素P450酶的抑制實(shí)驗(yàn)、考察有機(jī)溶劑對(duì)五種重要的細(xì)胞色素P450酶的標(biāo)準(zhǔn)底物的代謝活性的影響,同時(shí)對(duì)CYP3A4的激活實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行研究,其內(nèi)容主要包括:1)對(duì)以肝微粒體為材料,采用混合底物法研究細(xì)胞色素P450酶的抑制實(shí)驗(yàn)中有機(jī)溶劑甲醇、乙腈、DMSO對(duì)五種重要細(xì)胞色素P450酶(CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4)活性的影響進(jìn)行考察,以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。2)利用人肝微粒體為材料,對(duì)已知的CYP3A4激活劑依法韋侖進(jìn)行研究,考察依法韋倫對(duì)CYP3A4對(duì)其標(biāo)準(zhǔn)底物咪達(dá)唑侖代謝活性的影響,建立本實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)CYP3A4激活的實(shí)驗(yàn)方法。同時(shí)應(yīng)用該方法,對(duì)新藥研發(fā)中發(fā)現(xiàn)的新化合物實(shí)體對(duì)CYP3A4的激活作用進(jìn)行研究。
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R96
【圖文】：

文 第一章 研究背景CYP450臟勻漿后得到的肝細(xì)胞中滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)碎片融合謝酶，又稱肝藥酶。細(xì)胞色素P450酶是肝微制備過(guò)程大致總結(jié)如下：（1）將新鮮的肝臟在500g離心力下，4℃離心10分鐘左右，取，4℃離心20分鐘；（4）取步驟（3）中的上個(gè)小時(shí)，該步驟得到的沉淀即為肝微粒體。大

碩士學(xué)位論文 第一章中含有各種代謝酶類，包括細(xì)胞色素P450酶、黃素單氧化酶；其中，最重要的是細(xì)胞色素P450酶。藥物在體內(nèi)的代謝反應(yīng)反應(yīng)，是指對(duì)化合物分子結(jié)構(gòu)本身的修飾，如氧化和還原反應(yīng)團(tuán)結(jié)合到化合物分子結(jié)構(gòu)中，如葡糖糖醛酸與于芳香族的羥基得到極性更強(qiáng)、水溶性更好的產(chǎn)物，從而使化合物更容易通過(guò)膽是對(duì)機(jī)體的一個(gè)自我保護(hù)策略。細(xì)胞色素P450酶是最重要的一族中包含多種CYP同工酶（見(jiàn)圖2[5]）。

圖3 CYP同工酶參與藥物代謝的相對(duì)貢獻(xiàn)百分比Figure 3. Percentage of drugs metabolized by different CYP isoforms0酶動(dòng)力學(xué)及影響因素反應(yīng)動(dòng)力學(xué)是研究酶促反應(yīng)速度及其影響因素的科學(xué)。酶促反應(yīng)的酶的濃度、底物的濃度、pH、溫度、抑制劑和激活劑等。典型的米氏方程來(lái)描述。在酶濃度一定的條件下，當(dāng)?shù)孜餄舛群苄r(shí)，酶未應(yīng)速度取決于底物的濃度，底物濃度越大，單位時(shí)間內(nèi)酶底物復(fù)合該階段的反應(yīng)符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)。當(dāng)?shù)孜餄舛燃哟蠛�，酶逐漸被底的增加和底物濃度就不成正比，繼而底增加至極大值，所有酶分子均應(yīng)速度不會(huì)增高（反應(yīng)接近零級(jí)反應(yīng)）。酶促反應(yīng)速度的因素很多，比如：反應(yīng)溫度、輔酶濃度、底物濃度激活劑等等。在新藥研發(fā)初期，常常用微粒體為材料，體外考察在50

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 曾彩雯;何芳;夏春華;熊玉卿;;細(xì)胞色素P450酶的非典型動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2012年06期

本文編號(hào)：2756396