【摘要】：臨床上,許多患者會同時服用多種藥物,因此臨床醫(yī)師必須謹慎用藥,以避免發(fā)生藥物-藥物相互作用(Drug-Drug interaction,DDI)。藥物-藥物相互作用主要與細胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)的抑制或誘導有關系[1]。細胞色素P450酶的抑制可能會導致作為受害者的藥物的代謝受阻,降低其體內(nèi)清除率,從而使該藥物的體內(nèi)暴露量增加,引起毒性反應。相反,細胞色素P450酶的誘導可能會使受害者藥物的代謝加快,使其在體內(nèi)的清除加快,體內(nèi)暴露量降低,從而無法達到藥效,使得藥物失去其基本作用。介于藥物-藥物相互作用對藥物在體內(nèi)代謝及處置過程產(chǎn)生的重要影響,在FDA和CFDA頒布的臨床前研究指導中已經(jīng)明確要求在新藥臨床研究申請(IND)時遞交的研究資料要包含DDI研究[2][3]。藥物代謝酶種類繁多,其中細胞色素P450酶家族是最重要的代謝酶家族之一,其參與了市場上大約75%的藥物的代謝。因此由細胞色素P450酶介導的DDI是重點考察對象。常用的細胞色素P450酶相關的模型有細胞色素P450重組酶、肝微粒體、S9、肝細胞等。由于篩選階段化合物的溶解性問題,在體外應用細胞色素P450酶進行抑制研究時,或多或少會引入一些有機溶劑。然而,由于有機溶劑會使酶蛋白變性,影響酶活,因此有機溶劑的量必須控制在一定范圍內(nèi)[4]。本論文應用肝微粒體研究細胞色素P450酶的抑制實驗、考察有機溶劑對五種重要的細胞色素P450酶的標準底物的代謝活性的影響,同時對CYP3A4的激活實驗方法進行研究,其內(nèi)容主要包括:1)對以肝微粒體為材料,采用混合底物法研究細胞色素P450酶的抑制實驗中有機溶劑甲醇、乙腈、DMSO對五種重要細胞色素P450酶(CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4)活性的影響進行考察,以優(yōu)化實驗條件。2)利用人肝微粒體為材料,對已知的CYP3A4激活劑依法韋侖進行研究,考察依法韋倫對CYP3A4對其標準底物咪達唑侖代謝活性的影響,建立本實驗室評價CYP3A4激活的實驗方法。同時應用該方法,對新藥研發(fā)中發(fā)現(xiàn)的新化合物實體對CYP3A4的激活作用進行研究。
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R96
【圖文】：

文 第一章 研究背景CYP450臟勻漿后得到的肝細胞中滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)碎片融合謝酶，又稱肝藥酶。細胞色素P450酶是肝微制備過程大致總結如下：（1）將新鮮的肝臟在500g離心力下，4℃離心10分鐘左右，取，4℃離心20分鐘；（4）取步驟（3）中的上個小時，該步驟得到的沉淀即為肝微粒體。大

碩士學位論文 第一章中含有各種代謝酶類，包括細胞色素P450酶、黃素單氧化酶；其中，最重要的是細胞色素P450酶。藥物在體內(nèi)的代謝反應反應，是指對化合物分子結構本身的修飾，如氧化和還原反應團結合到化合物分子結構中，如葡糖糖醛酸與于芳香族的羥基得到極性更強、水溶性更好的產(chǎn)物，從而使化合物更容易通過膽是對機體的一個自我保護策略。細胞色素P450酶是最重要的一族中包含多種CYP同工酶（見圖2[5]）。

圖3 CYP同工酶參與藥物代謝的相對貢獻百分比Figure 3. Percentage of drugs metabolized by different CYP isoforms0酶動力學及影響因素反應動力學是研究酶促反應速度及其影響因素的科學。酶促反應的酶的濃度、底物的濃度、pH、溫度、抑制劑和激活劑等。典型的米氏方程來描述。在酶濃度一定的條件下，當?shù)孜餄舛群苄r，酶未應速度取決于底物的濃度，底物濃度越大，單位時間內(nèi)酶底物復合該階段的反應符合一級反應動力學。當?shù)孜餄舛燃哟蠛螅钢饾u被底的增加和底物濃度就不成正比，繼而底增加至極大值，所有酶分子均應速度不會增高（反應接近零級反應）。酶促反應速度的因素很多，比如：反應溫度、輔酶濃度、底物濃度激活劑等等。在新藥研發(fā)初期，常常用微粒體為材料，體外考察在50

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 曾彩雯;何芳;夏春華;熊玉卿;;細胞色素P450酶的非典型動力學研究進展[J];藥學學報;2012年06期

本文編號：2756396