【摘要】：氮芥類藥物是在20世紀50年代就應用于臨床并取得突出療效的抗腫瘤藥物,這類藥物分子一旦進入體內(nèi)后,就能通過分子內(nèi)成環(huán)反應,得到活潑的乙烯亞胺離子。該乙烯亞胺離子可與多種體內(nèi)有機物質(zhì)的親核基團(如蛋白質(zhì),DNA等)結(jié)合,發(fā)生烷基化作用使其失去生物活性。氮芥成環(huán)產(chǎn)物與蛋白質(zhì)作用后得到的烷基化產(chǎn)物會影響患者正常的代謝從而導致副作用的產(chǎn)生,然而鮮有研究探索其結(jié)構(gòu)特征。因此建立快速、有效的方法對該烷基化產(chǎn)物進行結(jié)構(gòu)分析是很有必要的。質(zhì)譜以其高靈敏度,樣品用量少,可提供分子結(jié)構(gòu)信息等絕對優(yōu)勢,已成為生物藥物代謝研究中的重要工具。本論文以高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜為分析手段,發(fā)展并建立了識別氮芥類藥物NL-101與氨基酸、多肽之間相互作用的分析方法,并總結(jié)歸納出其相互作用以及反應產(chǎn)物在質(zhì)譜條件下的裂解規(guī)律。1.NL-101穩(wěn)定性實驗研究。NL-101在溶液狀態(tài)下,會通過分子內(nèi)成環(huán)反應生成活潑的乙烯亞胺離子。基于此化學性質(zhì),本文模擬生理環(huán)境,考察了環(huán)境酸堿度和孵化時長對其代謝的影響。采用液質(zhì)聯(lián)用技術,對NL-101及其代謝產(chǎn)物進行識別研究。實驗結(jié)果表明NL-101在中性和堿性環(huán)境下更容易發(fā)生代謝,即更易與環(huán)境中的親核基團反應也更易水解,且在孵化9小時后,水解產(chǎn)物達到原藥物量的50%。2.NL-101與氨基酸相互作用及其作用位點分析。選用孵化4小時的實驗條件,考察了不同環(huán)境酸堿度下NL-101環(huán)化產(chǎn)物與氨基酸發(fā)生反應產(chǎn)物的作用位點。采用電噴霧誘導解離技術對產(chǎn)物進行研究,通過二級質(zhì)譜圖中特征碎片離子的差異實現(xiàn)了對其作用位點的識別。研究發(fā)現(xiàn),NL-101與氨基酸中氨基作用生成的產(chǎn)物對碰撞能量敏感,裂解得到的信息豐富;NL-101與氨基酸中羧基作用生成的產(chǎn)物則相反;NL-101與氨基酸側(cè)臉集團作用生成的產(chǎn)物,其二級質(zhì)譜圖有特征碎片。3.NL-101與多肽相互作用及其作用位點分析。以NL-101與氨基酸相互作用數(shù)據(jù)為基礎,應用于分析NL-101與肌肽、鵝肌肽、谷胱甘肽及三勝肽之間的相互作用。通過對NL-101與這些多肽作用產(chǎn)物進行碰撞誘導解離產(chǎn)生的二級碎片離子進行分析,實現(xiàn)了對其作用位點的識別。
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R96;O657.63
【圖文】：

１．２．２電噴霧質(zhì)譜對生物樣品分析研究進展逡逑ＥＳＩ是對液體樣品中的極性物質(zhì)進行檢測分析的離子源，通常使用甲醇、乙腈、氯仿、逡逑水等作為溶劑，樣品離子化的原理可以被認為是射流和庫倫炸裂（見圖１．２所示），逡逑其對樣品進行離子化時，通過高壓電場誘發(fā)樣品溶液帶電，促使溶液形成小液滴，在達到逡逑Ｒａｙｌｅｉｇｈ極限時，小液滴中電荷斥力大于液滴的表面張力時，小液滴就會發(fā)生庫倫爆炸，逡逑形成更小的液滴，這一過程一直循環(huán)發(fā)生，直至溶質(zhì)從溶劑中剝離出來形成帶電荷的被分逡逑析物離子。在ＥＳＩ電離過程中，容易形成被分析物與堿性金屬離子的加和峰，通常會采用逡逑改變?nèi)芤旱乃釅A度來調(diào)整出峰效果，例如添加甲酸溶液或者氨水溶液［２６］。逡逑ＭｅｔａＪ邋Ｉ＊！？ｅ逡逑＿邐．邐－１００邋Ｖ逡逑ＥＳＩ邋Ｄｒｏｐｌｅｔｓ邐n佩義希逡唬

本文編號：2750361