【摘要】：白蛋白納米粒（BSA-NPs）是以白蛋白為基質(zhì)，采用多種方法制備得到的納米級微粒。由于白蛋白納米粒給藥系統(tǒng)具有良好的靶向性、緩控釋效果以及生物相容性好等優(yōu)點(diǎn)，因此在藥物傳遞系統(tǒng)中占據(jù)著重要的地位。溫度敏感型原位凝膠在室溫下為液體制劑，能對外界環(huán)境溫度的變化產(chǎn)生響應(yīng)，進(jìn)而表現(xiàn)出由溶液相向凝膠相的相轉(zhuǎn)變。本實(shí)驗(yàn)將原位凝膠給藥系統(tǒng)與白蛋白納米粒給藥系統(tǒng)相結(jié)合，使制劑在眼部給藥后發(fā)生膠凝、黏度增大，延長了載藥白蛋白納米粒在眼部的滯留時(shí)間，能更好的提高藥物在眼部的吸收和生物利用度。 本課題的內(nèi)容主要分為兩部分，制備和研究了載有不同藥物的白蛋白納米粒原位凝膠給藥系統(tǒng)，并對兩者的性質(zhì)進(jìn)行初步考察。 第一部分小檗堿白蛋白納米粒原位凝膠給藥系統(tǒng)的制備和性質(zhì)研究 本實(shí)驗(yàn)采用泊洛沙姆407（F127）和泊洛沙姆188（F68）為溫敏凝膠基質(zhì)，以凝膠的膠凝溫度為考察指標(biāo)對處方進(jìn)行優(yōu)化，得到優(yōu)化后的凝膠基質(zhì)處方為26%（w/w） F127和4%（w/w）F68，該優(yōu)化處方在30.9℃以下時(shí)為流動(dòng)性較好的液體，經(jīng)人工模擬淚液（STF）按比例稀釋后在34.2℃以上會(huì)發(fā)生相轉(zhuǎn)變形成黏度較大的凝膠。以牛血清白蛋白（BSA）為納米粒基質(zhì)，0.25%戊二醛為交聯(lián)劑，采用去溶劑化法制備了小檗堿白蛋白納米粒（Ber-BSA-NPs），然后以冷溶法制備了小檗堿白蛋白納米粒原位凝膠（Ber-BSA-NPs-Gel）。制得的凝膠在STF稀釋前膠凝溫度為（30.4±0.1）℃，STF稀釋后膠凝溫度為（34.4±0.1）℃。用NDJ-1型黏度計(jì)測定凝膠的黏度，分別測得到在室溫下STF稀釋前的凝膠黏度為（0.2630±0.0283）Pa·s，STF稀釋后的凝膠黏度為（0.2432±0.0215）Pa·s；加熱在34.5℃以上后，STF稀釋前的凝膠黏度為（0.5100±0.0184）Pa·s，STF稀釋后的凝膠黏度為（0.4900±0.0215）Pa·s。以小檗堿原位凝膠（Ber-Gel）和小檗堿溶液（Ber-Sol）為參比，采用透析袋擴(kuò)散法考察了Ber-BSA-NPs-Gel的體外釋藥行為。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Ber-BSA-NPs-Gel具有較好的緩釋作用，制備得到的眼用溫敏凝膠符合眼部應(yīng)用要求，具有良好的應(yīng)用前景。 第二部分姜黃素白蛋白納米粒原位凝膠給藥系統(tǒng)的制備和性質(zhì)研究 本實(shí)驗(yàn)制備和評價(jià)了載有姜黃素白蛋白納米粒的溫敏原位凝膠（Cur-BSA-NPs-Gel）給藥系統(tǒng)。采用去溶劑法制備姜黃素白蛋白納米粒（Cur-BSA-NPs），以F127和F68為凝膠基質(zhì)，冷溶法制備Cur-BSA-NPs-Gel。采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法考察F127和F68濃度對凝膠膠凝溫度的影響，并以膠凝溫度為指標(biāo)，優(yōu)化凝膠基質(zhì)處方。優(yōu)化后的凝膠處方為26%（w/w）F127和4%(w/w) F68，該處方在30.7℃以下為自由流動(dòng)的液體制劑，用STF按比例稀釋后，在34.4℃以上會(huì)轉(zhuǎn)變成半固態(tài)的凝膠。用NDJ-1型黏度計(jì)分別測定了用STF稀釋前以及稀釋后的凝膠黏度。分別采用透析袋擴(kuò)散法和無膜溶蝕法考察凝膠的體外釋放行為和溶蝕行為�？疾旖Y(jié)果表明Cur-BSA-NPs-Gel有很好的緩釋效果，并且在凝膠中加入白蛋白納米粒并不影響凝膠的結(jié)構(gòu)。制劑的體內(nèi)評價(jià)試驗(yàn)采用的試驗(yàn)動(dòng)物為新西蘭大白兔。眼部刺激性評價(jià)采用Draize試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明Cur-BSA-NPs-Gel對眼部無刺激，Cur-BSA-NPs-Gel作為眼部給藥系統(tǒng)安全無毒。制劑體內(nèi)生物利用度通過眼部給藥測定房水中藥物濃度來評價(jià)，該試驗(yàn)以姜黃素混懸液（Cur-Sus）為參比。試驗(yàn)結(jié)果表明Cur-BSA-NPs-Gel能夠顯著提高姜黃素在房水中的濃度，進(jìn)而提高藥物的生物利用度。因此本制劑作為眼部給藥系統(tǒng)用于DR的治療具有較好的臨床應(yīng)用前景。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R943
【圖文】：

(A) (B)(C) (D)圖2-1 不同濃度F127(X1)和F68（X2）對膠凝溫度影響的反應(yīng)面曲線圖和等高線圖。Fig. 2-1 Response surface plot and contour map showing concentration effect of Pluronic F127(X1) and Pluronic F68 (X2) on sol-gel transition temperature.3. 討論在本部分內(nèi)容中姜黃素白蛋白納米粒的制備中，BSA 的溶劑采用的是超純水，這與第一部分小檗堿白蛋白納米粒是制備中采用 pH 9 的 Na2CO3-NaHCO3緩沖液不同，這是由于姜黃素穩(wěn)定性較差，在堿性條件下即發(fā)生電子云偏離的共軛效應(yīng)，顏色變紅，因此在制備 Cur-BSA-NPs 時(shí)不能選用堿性的溶劑。在本實(shí)驗(yàn)中采用了星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法進(jìn)行溫敏凝膠的處方的篩選，該法與第一部分中的處方篩選方法相比，更具邏輯性，考察因素水平更全面。并且經(jīng)過軟件處理后，得到的反應(yīng)面曲線圖和等高線圖能更清晰地展示?

圖 2-2 姜黃素在 50%乙醇中的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 2-2 Standard curve of Cur in 50% ethanolur-BSA-NPs 包封率的測定游離 Cur 藥物的測定制得的 Cur-BSA-NPs 混懸液用蒸餾水定容至 10mL，精密移取 2 mL0min（12000r·min-1），取上清液 0.5 mL，用 50%乙醇定容至 5 mL，長處測定其吸光度值，計(jì)算制劑中游離 Cur 藥物的量。ur-BSA-NPs 中 Cur 總量的測定密量取 200μL Cur-BSA-NPs 混懸液，加入 0.125%胰蛋白酶 200μL，0min，然后用 50%乙醇定容至 5 mL，最大吸收波長處測定其吸光度中 Cur 總量。據(jù)公式：包封率=（制劑中藥物總量－游離藥物的量）÷制劑中藥物

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文將制得的 Cur-BSA-NPs 混懸液稀釋一定倍數(shù)后，用 Zetasizer Nano 納米粒度儀測定混懸液中納米粒的粒徑，測得 Cur-BSA-NPs 混懸液中納米粒的平均粒徑為221.2nm。其粒徑分布如圖 2-3。將得到的 Cur-BSA-NPs 混懸液滴加到一 200 目的銅網(wǎng)上，用濾紙吸去多余液體，放置風(fēng)干兩小時(shí)后，于 Hitachi-7500 透射電鏡觀察其外觀形態(tài)�？梢娙鐖D 2-4 所示，Cur-BSA-NPs 為分布較均勻的外觀圓整的球形顆粒。2.3 Cur-BSA-NPs 粒徑和形態(tài)考察

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 冼遠(yuǎn)芳;李微;郝游游;楊國清;高喜安;;芐達(dá)賴氨酸眼用溫敏凝膠的制備[J];華西藥學(xué)雜志;2011年03期

本文編號(hào)：2746762