發(fā)布時(shí)間：2020-07-05 17:46

【摘要】：目的:前期研究表明降解產(chǎn)物四甲氧基棉酚對(duì)小鼠精母細(xì)胞存在一定毒性,且在實(shí)驗(yàn)劑量下能夠?qū)е滦∈蟮木影l(fā)生畸變,且具有遺傳毒性。本實(shí)驗(yàn)通過自制未脫毒棉籽油并進(jìn)行分離純化得純度較高的降解產(chǎn)物四甲氧基棉酚,通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)更加全面的考察降解產(chǎn)物四甲氧基棉酚的毒性,同時(shí)檢測新疆地區(qū)市售棉籽油中降解產(chǎn)物的污染現(xiàn)狀。方法:1.自制未脫毒棉籽油樣品,通過ODS層析柱法制備主要游離棉酚降解產(chǎn)物,用于后期動(dòng)物實(shí)驗(yàn);2.采用昆明小鼠考察四甲氧基棉酚的急性毒性情況以及為后期長期毒性實(shí)驗(yàn)提供給藥量;3.SD大鼠灌胃30d考察四甲氧基棉酚的長期毒性情況以及對(duì)大鼠的影響;4.采用組織切片HE染色法、體液生化指標(biāo)以及NMR代謝組學(xué)法全面評(píng)價(jià)四甲氧基棉酚的毒性;5.采用高效液相色譜法,測定95批市售棉籽油中四甲氧基棉酚的含量,用于評(píng)價(jià)市售棉籽油的污染情況。結(jié)果:1.經(jīng)ODS分離純化未脫毒棉籽油中的游離棉酚降解產(chǎn)物,采用HPLC檢測,根據(jù)面積歸一化法,得純度為85.30%的四甲氧基棉酚,比課題組前期純度提高7.10%;2.急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果:以四甲氧基棉酚最大劑量25m g/Kg和最大給藥體積0.40mL/10g給藥后動(dòng)物并未出現(xiàn)死亡情況,故無法計(jì)算LD50值,采用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)小鼠體重及臟器進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,給藥組與對(duì)照組小鼠心臟系數(shù)有顯著性差異(P0.01),其它臟器及體重系數(shù)無顯著性差異(P0.05);3.四甲氧基棉酚的長期毒性結(jié)果:實(shí)驗(yàn)采用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)大鼠體重及臟器進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,給藥組與對(duì)照組小鼠肝臟及脾臟系數(shù)有顯著性差異(P0.01),其它臟器與體重系數(shù)無顯著性差異(P0.05);4.組織切片結(jié)果:對(duì)照組與給藥組大鼠的心臟、脾臟、肺、腎臟組織切片中無明顯病理變化,但給藥組大鼠的肝臟有明顯病變,說明長期灌服四甲氧基棉酚,會(huì)影響大鼠肝臟組織的形態(tài)結(jié)構(gòu);5.生化指標(biāo)結(jié)果:生化指標(biāo)中AST、BUN、GLU、Bb有顯著性差異(P0.05),其他生化指標(biāo)無顯著性差異(P0.05)。其中給藥組的AST和BUN含量較對(duì)照組含量低,GLU及Bb含量較對(duì)照組高;6.通過對(duì)大鼠組織、尿液及糞便的核磁代謝組學(xué)檢測結(jié)果表明:四甲氧基棉酚能夠影響糖的有氧氧化、糖酵解及無氧糖酵解過程、氨基酸合成與代謝、脂質(zhì)代謝、能量代謝,且對(duì)肝組織具有損傷作用,引起腎功能改變、腸道環(huán)境改變、引起一定炎癥及精神-內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂等;7.對(duì)95批市售棉籽油樣品進(jìn)行檢測,其中有54批棉籽油樣品中檢測到四甲氧基棉酚,含量為0.026-1.513μg/mL。結(jié)論:僅通過游離棉酚評(píng)價(jià)棉籽油脫毒情況還不夠全面,還需通過游離棉酚降解產(chǎn)物追溯棉籽油生產(chǎn)企業(yè)的脫毒工藝,從而有效的進(jìn)行監(jiān)管,還可以為棉籽油中游離棉酚降解產(chǎn)物檢測標(biāo)準(zhǔn)奠定檢測基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：TS221;R99
【圖文】：

層析柱及半制備液相分離純化主要降解產(chǎn)物，并進(jìn)行初步結(jié)構(gòu)鑒定，經(jīng)質(zhì)譜儀檢測逡逑可知游離棉酚降解產(chǎn)物分子量為５７３．２５０３３，分子式為Ｃ３４Ｈ３７０８，表明其化學(xué)結(jié)構(gòu)的逡逑母核與游離棉酚一致［４２４３］，為四甲氧基棉酚，結(jié)構(gòu)式見圖３。游離棉酚具有多種毒性，逡逑但最為顯著的毒性是生殖毒性，能夠?qū)е履行杂谰眯圆挥�，而四甲氧基棉酚是由游逡逑離棉酚轉(zhuǎn)變而來，所以課題組針對(duì)體外精母細(xì)胞及小鼠進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)［４１］，結(jié)果表明，逡逑四甲氧基棉酚對(duì)精母細(xì)胞存在一定毒性，且在實(shí)驗(yàn)劑量下能夠?qū)е滦∈缶影l(fā)生畸逡逑變，具有遺傳毒性。故游離棉酚降解產(chǎn)物的存在，有可能是棉籽油潛在的安全隱患，逡逑同樣可能對(duì)消費(fèi)者的健康造成危害，課題組將更加全面的評(píng)價(jià)游離棉酚降解產(chǎn)物毒逡逑性。逡逑６逡逑

采用ＳｐＳＳ１７．０統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，給藥組第２１ｄ及２８ｄ收集的尿液與對(duì)照組逡逑第0ｄ天收集的尿液有顯著性差異（Ｐ＜０．０５），其他無顯著性差異（Ｐ＞０．０５）。結(jié)果見逡逑圖５－２及表５－５。逡逑２４逡逑

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本文編號(hào)：2742938