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汴梁紫禹醇提物緩解對乙酰氨基酚誘導(dǎo)的肝毒性機制研究

發(fā)布時間:2020-06-24 15:31
【摘要】:目的:探究“汴梁紫禹”醇提物(BZE)對對乙酰氨基酚(APAP)誘導(dǎo)的藥物性肝損傷的抗氧化和抗凋亡作用,并探討其可能的分子機制。方法:在體內(nèi),連續(xù)10天灌胃給予SD大鼠不同濃度的BZE,然后灌胃給予APAP誘導(dǎo)藥物性肝損傷模型。試劑盒檢測大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽(GSH),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的表達量,肝組織中活性氧(ROS)活性,計算大鼠的臟器指數(shù),HE染色觀察大鼠的肝臟組織病理學(xué)變化。在體外,BZE預(yù)處理HL-7702細胞24h,然后用30mmol/L對APAP損傷12h。MTT法測定細胞存活率,試劑盒測定細胞中ALT,AST,ROS,SOD,GSH。接著,我們研究了BZE對APAP誘導(dǎo)的HL-7702細胞氧化應(yīng)激和凋亡的關(guān)系。首先利用流式細胞儀檢測了BZE對線粒體膜電位的影響,然后采用Western blotting測定線粒體凋亡相關(guān)蛋白,如Bax,Bcl-2及Caspase-3的表達和氧化應(yīng)激信號通路Nrf2,HO-1蛋白的表達。最后采用siRNA技術(shù)下調(diào)Nrf2,分析HO-1,Bax,Bcl-2及Caspase-3蛋白的表達。結(jié)果:BZE在體外和體內(nèi)均有抑制肝臟氧化應(yīng)激預(yù)防APAP誘導(dǎo)的肝毒性的作用。在體內(nèi),HE染色明顯觀察到BZE對組織細胞形態(tài)有改善作用。BZE抑制了肝損傷標志物ALT、AST的釋放,降低APAP誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激產(chǎn)生的ROS同時升高抗氧化酶SOD的活力和GSH的含量。在體外,BZE可顯著提高細胞存活率,改善APAP損傷的細胞形態(tài),抑制ALT、AST,ROS的釋放,升高SOD的活力和GSH的含量。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示,BZE顯著抑制了APAP損傷所致的膜電位的降低。蛋白表達量結(jié)果顯示,BZE促進了Bcl-2表達,降低了Bax和Caspase-3的表達。BZE可促進Nrf2入核,升高HO-1的表達。此外,我們的研究結(jié)果表明,siNrf2抑制了BZE對APAP誘導(dǎo)的HL-7702細胞存活率和凋亡相關(guān)蛋白表達的影響。結(jié)論:BZE在體外和體內(nèi)均有抑制肝臟氧化應(yīng)激,預(yù)防APAP誘導(dǎo)的肝毒性的作用。其作用機制可能是通過激活Nrf2信號通路抑制氧化應(yīng)激和細胞凋亡,在預(yù)防藥物性肝損傷方面發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】:河南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R965
【圖文】:

大鼠肝組織


圖 1-1 BZE 對 SD 大鼠肝臟指數(shù)的影響( x±s ,n=4)Fig.1-1 Effect of BZE on liver index in SD rats ( x±s,n=4)Note:#:P<0.05vs.Control group;*:P<0.05vs.APAP group. 對 SD 大鼠肝組織病理學(xué)的影響

大鼠肝組織,標志物


圖 1-2 BZE 對 SD 大鼠肝組織病理學(xué)的影響 (200×) (x ±s,n=4)Fig 1-2 Effect of BZE on liver morphology in SD rats (200×) ( x ±s,n=4)3.3 BZE 對 SD 大鼠肝損傷標志物 ALT、AST 的影響

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

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本文編號:2728048

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