【摘要】：目的:探究“汴梁紫禹”醇提物(BZE)對(duì)對(duì)乙酰氨基酚(APAP)誘導(dǎo)的藥物性肝損傷的抗氧化和抗凋亡作用,并探討其可能的分子機(jī)制。方法:在體內(nèi),連續(xù)10天灌胃給予SD大鼠不同濃度的BZE,然后灌胃給予APAP誘導(dǎo)藥物性肝損傷模型。試劑盒檢測(cè)大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽(GSH),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的表達(dá)量,肝組織中活性氧(ROS)活性,計(jì)算大鼠的臟器指數(shù),HE染色觀察大鼠的肝臟組織病理學(xué)變化。在體外,BZE預(yù)處理HL-7702細(xì)胞24h,然后用30mmol/L對(duì)APAP損傷12h。MTT法測(cè)定細(xì)胞存活率,試劑盒測(cè)定細(xì)胞中ALT,AST,ROS,SOD,GSH。接著,我們研究了BZE對(duì)APAP誘導(dǎo)的HL-7702細(xì)胞氧化應(yīng)激和凋亡的關(guān)系。首先利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)了BZE對(duì)線粒體膜電位的影響,然后采用Western blotting測(cè)定線粒體凋亡相關(guān)蛋白,如Bax,Bcl-2及Caspase-3的表達(dá)和氧化應(yīng)激信號(hào)通路Nrf2,HO-1蛋白的表達(dá)。最后采用siRNA技術(shù)下調(diào)Nrf2,分析HO-1,Bax,Bcl-2及Caspase-3蛋白的表達(dá)。結(jié)果:BZE在體外和體內(nèi)均有抑制肝臟氧化應(yīng)激預(yù)防APAP誘導(dǎo)的肝毒性的作用。在體內(nèi),HE染色明顯觀察到BZE對(duì)組織細(xì)胞形態(tài)有改善作用。BZE抑制了肝損傷標(biāo)志物ALT、AST的釋放,降低APAP誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激產(chǎn)生的ROS同時(shí)升高抗氧化酶SOD的活力和GSH的含量。在體外,BZE可顯著提高細(xì)胞存活率,改善APAP損傷的細(xì)胞形態(tài),抑制ALT、AST,ROS的釋放,升高SOD的活力和GSH的含量。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,BZE顯著抑制了APAP損傷所致的膜電位的降低。蛋白表達(dá)量結(jié)果顯示,BZE促進(jìn)了Bcl-2表達(dá),降低了Bax和Caspase-3的表達(dá)。BZE可促進(jìn)Nrf2入核,升高HO-1的表達(dá)。此外,我們的研究結(jié)果表明,siNrf2抑制了BZE對(duì)APAP誘導(dǎo)的HL-7702細(xì)胞存活率和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。結(jié)論:BZE在體外和體內(nèi)均有抑制肝臟氧化應(yīng)激,預(yù)防APAP誘導(dǎo)的肝毒性的作用。其作用機(jī)制可能是通過(guò)激活Nrf2信號(hào)通路抑制氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡,在預(yù)防藥物性肝損傷方面發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R965
【圖文】：

圖 1-1 BZE 對(duì) SD 大鼠肝臟指數(shù)的影響（ x±s ，n=4）Fig.1-1 Effect of BZE on liver index in SD rats ( x±s，n=4）Note:#:P<0.05vs.Control group；*:P<0.05vs.APAP group. 對(duì) SD 大鼠肝組織病理學(xué)的影響

圖 1-2 BZE 對(duì) SD 大鼠肝組織病理學(xué)的影響 (200×) (x ±s，n=4)Fig 1-2 Effect of BZE on liver morphology in SD rats (200×) ( x ±s，n=4)3.3 BZE 對(duì) SD 大鼠肝損傷標(biāo)志物 ALT、AST 的影響

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2728048