【摘要】：研究背景嬰幼兒血管瘤,是一種最常見的先天性嬰幼兒良性腫瘤。世界范圍內(nèi)的血管瘤的發(fā)病率為4%-5%,且呈逐年升高趨勢。由于血管瘤會給患兒及家長帶來的心理傷害,而且約10%血管瘤可出現(xiàn)呼吸道阻塞等各種并發(fā)癥。因此,大部分血管瘤需要積極治療,而且越早越好。手術(shù)治療,激光治療,冷凍治療和口服或注射途徑的藥物治療的療效不一,副作用或并發(fā)癥較多,有些還比較嚴(yán)重。普萘洛爾是一種常用于治療高血壓和其他疾病的β受體非選擇性阻斷藥。大量臨床研究證實(shí)普萘洛爾對血管瘤安全有效,已經(jīng)成為治療血管瘤的一線藥物。HemangeolTM 口服溶液(鹽酸普萘洛爾)已于2013年9月獲得美國食品藥品監(jiān)督局(FDA)批準(zhǔn)用于血管瘤。不過普萘洛爾引起的副作用仍不容忽視,包括癥狀性心動過緩等。另外,普萘洛爾每天需要服用兩次,也降低了患者的依從性。因此,我們需要尋找新策略來減少普萘洛爾的毒副作用和服藥次數(shù)。局部注射給藥是一種可以直接靶向患病區(qū)域并達(dá)到理想濃度的給藥方式,藥物起效快,在其他正常器官組織分布少,毒副作用小。緩釋給藥系統(tǒng)是一種能實(shí)現(xiàn)對藥物緩慢釋放的給藥系統(tǒng),能在減少給藥次數(shù)的同時延長藥物的作用時間,能提高藥物安全性和穩(wěn)定血藥濃度。因此,局部注射的緩釋給藥系統(tǒng)預(yù)期可以減少普萘洛爾的毒副作用和給藥頻率。脂質(zhì)體和聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物(PLGA)載體是兩類典型的緩釋給藥系統(tǒng)。脂質(zhì)體是一種具有單層或多層脂質(zhì)雙層的球形脂質(zhì)囊泡,具有生物相容性好,易于表面修飾,技術(shù)簡單等優(yōu)點(diǎn)。然而,脂質(zhì)體膜穩(wěn)定性較差,藥物容易發(fā)生泄漏,這也是制約脂質(zhì)體臨床應(yīng)用的重要因素。PLGA微球是現(xiàn)今一種應(yīng)用十分廣泛的緩釋給藥系統(tǒng),通過改變共聚單體比例,藥物的時間釋放范圍可以從幾周到幾個月。因此,PLGA微球可以減少藥物的給藥次數(shù),延長藥物作用時間,提高藥物安全性。研究人員發(fā)現(xiàn),將脂質(zhì)體負(fù)載于PLGA微球內(nèi)制備成為脂質(zhì)微球,能克服脂質(zhì)體釋放快的缺點(diǎn),更好實(shí)現(xiàn)藥物緩釋和治療效果。因此,在本研究中,我們設(shè)想將普萘洛爾負(fù)載于脂質(zhì)體中,然后再將普萘洛爾脂質(zhì)體包裹在PLGA微球中,構(gòu)建一種負(fù)載普萘洛爾脂質(zhì)體的PLGA微球(普萘洛爾脂質(zhì)微球),以期實(shí)現(xiàn)對普萘洛爾的長效緩釋,降低普萘洛爾給藥次數(shù)和毒副作用,實(shí)現(xiàn)對血管瘤的安全有效的治療。近期研究顯示血管瘤干細(xì)胞是血管瘤發(fā)生發(fā)展的重要種子細(xì)胞,血管瘤干細(xì)胞具有多向分化潛能,具有連續(xù)血管瘤形成能力。因此,血管瘤干細(xì)胞是血管瘤形成的關(guān)鍵細(xì)胞,靶向殺傷血管瘤干細(xì)胞可以從根本上抑制血管瘤的增殖。CD133是一種5次跨膜糖蛋白,是多種干細(xì)胞的細(xì)胞表面標(biāo)志物。研究發(fā)現(xiàn)CD133也是血管瘤干細(xì)胞的表面標(biāo)志物。CD133陽性血管瘤干細(xì)胞能在免疫缺陷裸鼠中重新分化成為血管瘤;從CD133陽性血管瘤干細(xì)胞形成的血管瘤中重新分選出的CD133陽性血管瘤干細(xì)胞仍可以重新分化為血管瘤,即CD133陽性血管瘤干細(xì)胞具有連續(xù)血管瘤形成能力。因此,CD133陽性血管瘤干細(xì)胞是血管瘤的種子,靶向殺傷CD133陽性血管瘤干細(xì)胞可以從根本上抑制血管瘤的增殖。由于血管瘤干細(xì)胞特異性表達(dá)CD133,根據(jù)此特點(diǎn),我們可以選擇核酸適體來特異性靶向CD133。核酸適體是一種低分子量的寡聚核苷酸片段,能特異性靶向細(xì)胞表面蛋白抗原,由于核酸適體具有易合成和免疫原性低的特點(diǎn),故而在分子靶向治療中得到廣泛應(yīng)用�；贑D133核酸適體能特異性靶向CD133陽性血管瘤千細(xì)胞的特點(diǎn),在本研究中,我們設(shè)想將構(gòu)建一種負(fù)載普萘洛爾并修飾CD133核酸適體的納米載體(CD133靶向普萘洛爾納米載體),以期實(shí)現(xiàn)對血管瘤干細(xì)胞的特異性殺傷,另外,PLGA納米載體還能同時實(shí)現(xiàn)對普萘洛爾的長期緩釋,降低普萘洛爾給藥次數(shù)和毒副作用,實(shí)現(xiàn)對血管瘤安全有效的治療。研究方法(1)血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞和干細(xì)胞的分離和培養(yǎng):從血管瘤病人切除下來的血管瘤標(biāo)本存儲在內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基中,4℃保存。然后將標(biāo)本切成1 mm3大小組織塊,然后利用胰蛋白酶消化后在內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞。利用CD133磁珠分選血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞即得CD133陽性血管瘤干細(xì)胞。(2)普萘洛爾脂質(zhì)微球和CD133靶向普萘洛爾納米載體的制備和表征①普萘洛爾脂質(zhì)微球的制備:通過薄膜水合法制備普萘洛爾脂質(zhì)體,然后通過擠出來獲得粒徑均一的普萘洛爾脂質(zhì)體,通過凝膠過濾來從普萘洛爾脂質(zhì)體中去除未包裹的普萘洛爾。然后將修飾后的脂質(zhì)體分散到由溶解于乙酸乙酯中的聚乳酸聚羥基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸聚羥基乙酸(PLGA-PEG-PLGA)的有機(jī)相中,通過渦旋混合,產(chǎn)生水/油乳液。將水/油乳液逐滴注入聚乙烯醇水溶液中并機(jī)械攪拌。將得到的水/油/水乳液倒入聚乙烯醇水溶液中,繼續(xù)機(jī)械攪拌后揮發(fā)除去有機(jī)溶劑以形成固體微球,經(jīng)洗滌和冷凍干燥后得到普萘洛爾脂質(zhì)微球。②CD133靶向普萘洛爾納米載體的制備:將普萘洛爾溶解在去離子水中,并且將羧基修飾的共聚乳酸羥基乙酸聚乙二醇(PLGA-PEG-COOH)溶于二氯甲烷中。將普萘洛爾水溶液放在PLGA-PEG-COOH二氯甲烷溶液中乳化,用探針超聲處理。將這種水/油乳液轉(zhuǎn)移到聚乙烯醇水溶液中。在室溫下溫和攪拌所得的水/油/水乳液過夜蒸發(fā)有機(jī)相。將納米載體離心并懸浮在去離子水中兩次以純化納米載體。將溶液轉(zhuǎn)移到聚乙烯醇水溶液中,并將混合物超聲處理。然后通過碳化二亞胺法將CD133核酸適體連接在普萘洛爾納米載體上,制備成為CD133靶向普萘洛爾納米載體。③微球和納米載體的納米表征:通過Malvern Mastersizer 2000粒度分析儀測試微球的尺寸分布。通過Zetasizer Nano S分析納米載體的粒徑和電位。利用高效液相色譜儀測定微球和納米載體的普萘洛爾包封率和載藥量。④微球和納米載體藥物釋放:將微球和納米載體放置到截留分子量為1000道爾頓的透析膜中,然后將透析膜放入到含不同介質(zhì)的燒杯中,然后將燒杯放在37℃水浴中,同時緩慢攪拌,在不同的時間點(diǎn)中,取少量的透析液用高效液相色譜來測定透析液中普萘洛爾的含量。(3)CD133靶向普萘洛爾納米載體對血管瘤干細(xì)胞的靶向性:將血管瘤干細(xì)胞接種在細(xì)胞培養(yǎng)板中,然后載熒光素的CD133靶向納米載體或CD133靶向普萘洛爾納米載體和血管瘤干細(xì)胞孵育4小時后,然后用磷酸鹽緩沖液洗滌細(xì)胞后,用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行分析細(xì)胞熒光,或者用細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞,用高效液相色譜的方法來檢測細(xì)胞中普萘洛爾的含量。(4)普萘洛爾脂質(zhì)微球和CD133靶向普萘洛爾納米載體的體外細(xì)胞毒性和對細(xì)胞因子分泌的影響:將血管瘤干細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞接種在細(xì)胞培養(yǎng)板中并培養(yǎng)過夜后,然后加入普萘洛爾脂質(zhì)微球和CD133靶向普萘洛爾納米載體后,利用細(xì)胞增殖試劑盒檢測藥物對細(xì)胞增殖影響,同時采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測藥物對細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長因子A(Vascular Endothelial Growth Factor A,VEGF-A)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(Basic Fibroblast Growth Factor,bFGF)的影響。(5)普萘洛爾脂質(zhì)微球和CD133靶向普萘洛爾納米載體的體內(nèi)抗血管瘤作用和機(jī)制:從血管瘤病人切除下來的血管瘤標(biāo)本在內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)出血管瘤干細(xì)胞后,將血管瘤干細(xì)胞重懸于Matrigel基質(zhì)膠中,然后皮下接種于雌性裸鼠的側(cè)腹,等待血管瘤體積達(dá)到25 mm3后,瘤內(nèi)注射普萘洛爾脂質(zhì)微球或CD133靶向普萘洛爾納米載體,在不同時間點(diǎn)觀察血管瘤體積變化,以評估體內(nèi)抗血管瘤作用;治療結(jié)束后處死裸鼠,對血管瘤重量進(jìn)行稱量,對血管瘤組織進(jìn)行伊紅-蘇木精染色和微血管密度評估。同時檢測裸鼠體重變化以明確藥物治療的體內(nèi)毒性。研究結(jié)果(1)普萘洛爾脂質(zhì)微球和CD133靶向普萘洛爾納米載體的制備和表征:普萘洛爾脂質(zhì)微球的粒徑為77.8 μm,多分散系數(shù)為0.26,普萘洛爾的包封率為23.9%,該包封率要低于普萘洛爾脂質(zhì)體(40.8%),原因是因?yàn)槲⑶虿荒馨馑兄|(zhì)體。藥物釋放實(shí)驗(yàn)顯示:第1天僅釋放8%普萘洛爾,第4天釋放35%,第20天普萘洛爾的釋放達(dá)到平臺75%。普萘洛爾脂質(zhì)微球在含血清磷酸鹽緩沖液中的藥物釋放較磷酸鹽緩沖液較快,表明血清可能在一定程度上使普萘洛爾脂質(zhì)微球變得不穩(wěn)定。CD133靶向普萘洛爾納米載體的粒徑為143.7 nm,多分散系數(shù)為0.16,粒徑分布均一,ζ電勢低于-20mv。透射電鏡顯示:CD133靶向普萘洛爾納米載體的粒徑均一,而且相對光滑。CD133靶向普萘洛爾納米載體的包封率為51.8%,載藥量為6.2%。藥物釋放實(shí)驗(yàn)顯示:CD133靶向普萘洛爾納米載體在最初48小時內(nèi)能快速釋放普萘洛爾(在磷酸鹽緩沖液中的釋放為40%,在含血清PBS中的釋放為55%)。在接下來的144小時中,納米載體的普萘洛爾累積釋放在PBS中達(dá)到約70%,在含有血清的磷酸鹽緩沖液中達(dá)到約85%。(2)CD133靶向普萘洛爾納米載體對血管瘤干細(xì)胞的靶向性:載熒光素的CD133靶向納米載體的平均熒光強(qiáng)度顯著高于載熒光素的納米載體處理組,如果用過量的CD133核酸適體處理細(xì)胞后,載熒光素的CD133靶向納米載體的平均熒光強(qiáng)度顯著降低,這表明載熒光素的CD133靶向納米載體和血管瘤干細(xì)胞的結(jié)合歸因于CD133核酸適體。另外,CD133靶向普萘洛爾納米載體在血管瘤干細(xì)胞中的內(nèi)吞率為67%,明顯高于普萘洛爾(8%)和普萘洛爾納米載體(26%),用過量的CD133核酸適體處理細(xì)胞后,CD133靶向普萘洛爾納米載體的普萘洛爾內(nèi)吞率顯著降低,這表明CD133靶向普萘洛爾納米載體和血管瘤干細(xì)胞的結(jié)合歸因于CD133核酸適體。(3)普萘洛爾脂質(zhì)微球和CD133靶向普萘洛爾納米載體的體外細(xì)胞毒性和對細(xì)胞因子分泌的影響:普萘洛爾,普萘洛爾脂質(zhì)體和普萘洛爾脂質(zhì)微球的72小時IC50值分別為110.5,120.8和379.3 μM,表明普萘洛爾脂質(zhì)體顯示出與普萘洛爾相似的細(xì)胞毒性作用,普萘洛爾脂質(zhì)微球毒性比普萘洛爾要差3.4倍),普萘洛爾,普萘洛爾脂質(zhì)體和普萘洛爾脂質(zhì)微球的120小時IC50分別為40.8,56.5和120.7 μM(表明普萘洛爾脂質(zhì)體顯示與普萘洛爾相似的細(xì)胞毒性,普萘洛爾脂質(zhì)微球毒性比普萘洛爾要差2.95倍)。在普萘洛爾濃度范圍為30-500 μ M時,普萘洛爾和普萘洛爾脂質(zhì)體在抑制VEGF-A mRNA表達(dá)方面比普萘洛爾脂質(zhì)微球更有效。例如,在500 μM時,普萘洛爾和普萘洛爾脂質(zhì)體對VEGF-AmRNA表達(dá)的抑制率為80%,而相同濃度的普萘洛爾脂質(zhì)微球僅為40%。同樣,在普萘洛爾濃度范圍為30-500 μM時,普萘洛爾和普萘洛爾脂質(zhì)體在抑制VEGF-A蛋白表達(dá)方面比普萘洛爾脂質(zhì)微球更有效。同樣的,普萘洛爾和普萘洛爾脂質(zhì)體比普萘洛爾脂質(zhì)微球更有效抑制bFGF的表達(dá)。在血管瘤干細(xì)胞中,普萘洛爾,普萘洛爾納米載體和CD133靶向普萘洛爾納米載體的72小時IC50值分別為83.2,97.6和35.8 μM,表明普萘洛爾和普萘洛爾納米載體具有相似的細(xì)胞毒性作用,但是CD133靶向普萘洛爾納米載體的毒性要比普萘洛爾強(qiáng)2.7倍。普萘洛爾,普萘洛爾納米載體和CD133靶向普萘洛爾納米載體的120小時IC50值分別為63.5,78.7和16.9 μM,表明普萘洛爾和普萘洛爾納米載體具有相似的細(xì)胞毒性作用,但是CD133靶向普萘洛爾納米載體的毒性要比普萘洛爾強(qiáng)3.8倍。普萘洛爾,普萘洛爾納米載體和CD133靶向普萘洛爾納米載體均能劑量依賴性抑制血管瘤干細(xì)胞的VEGF-A和bFGF mRNA和蛋白的表達(dá),CD133靶向普萘洛爾納米載體較普萘洛爾更能有效的抑制VEGF-A和bFGF mRNA和蛋白的表達(dá)。例如,在500 μM時,普萘洛爾和普萘洛爾納米載體抑制VEGF-A mRNA表達(dá)約60%,而CD133靶向普萘洛爾納米載體的抑制率為80%。在500 μM時,普萘洛爾和普萘洛爾納米載體對VEGF-A蛋白表達(dá)的抑制率為65%,而CD133靶向普萘洛爾納米載體的抑制率為90%。(4)普萘洛爾脂質(zhì)微球和CD133靶向普萘洛爾納米載體的體內(nèi)抗血管瘤作用機(jī)制:我們接下來檢查了普萘洛爾,普萘洛爾脂質(zhì)體和普萘洛爾脂質(zhì)微球?qū)ρ芰龅男∈篌w內(nèi)治療效果。在第35天時,普萘洛爾脂質(zhì)微球治療導(dǎo)致血管瘤體積減少84%,而普萘洛爾脂質(zhì)體和普萘洛爾治療分別僅導(dǎo)致血管瘤體積減少44%和13%。普萘洛爾脂質(zhì)微球治療組的血管瘤體積明顯小于其他組(生理鹽水組:215mm3,普萘洛爾組:187 mm3,普萘洛爾脂質(zhì)體組:121 mm3,普萘洛爾脂質(zhì)微球組:35 1mm3)。普萘洛爾脂質(zhì)微球治療組的平均血管瘤重量顯著低于其他組(生理鹽水組:0.28 g,普萘洛爾組:0.21 g,普萘洛爾脂質(zhì)體組:0.13 g,普萘洛爾脂質(zhì)微球組:0.03 g)。另外,通過觀察處理后的任何行為變化并通過監(jiān)測小鼠體重來測量所有處理的毒性。結(jié)果顯示,所有的治療都具有血管瘤小鼠的良好耐受性。與鹽水對照組相比,所有經(jīng)處理的小鼠沒有顯示出任何顯著行為改變并且體重沒有顯著變化,這表明普萘洛爾,普萘洛爾脂質(zhì)體和普萘洛爾脂質(zhì)微球不引起小鼠明顯的行為改變并且對小鼠體重沒有不利影響。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時,血管瘤用蘇木精和伊紅染色,并進(jìn)行組織切片的微血管密度分析。普萘洛爾脂質(zhì)微球治療組的平均微血管密度顯著低于其他組,提示普萘洛爾脂質(zhì)微球能顯著抑制血管瘤的血管生成。我們接下來檢查了普萘洛爾,普萘洛爾納米載體和CD133靶向普萘洛爾納米載體對小鼠的血管瘤治療效果。在治療終點(diǎn)時,和生理鹽水治療組相比,CD133靶向普萘洛爾納米載體治療導(dǎo)致血管瘤體積減少76%,而普萘洛爾納米載體和普萘洛爾治療僅導(dǎo)致血管瘤減少57%和34%體積。CD133靶向普萘洛爾納米載體治療組的血管瘤體積顯著小于其他組組(生理鹽水組:256 mm3,普萘洛爾組:169mm3,普萘洛爾納米載體組:110 mm3,CD133靶向普萘洛爾納米載體組:62 mm3)。而且,CD133靶向普萘洛爾納米載體治療后的血管瘤稱重要顯著低于其他組(生理鹽水組:0.26g,普萘洛爾組:0.18g,普萘洛爾納米載體組:0.11g,CD133靶向普萘洛爾納米載體組:0.05 g)。通過觀察治療后的任何行為改變和通過監(jiān)測來測量所有治療的毒性小鼠體重。結(jié)果顯示,普萘洛爾納米載體和CD133靶向普萘洛爾納米載體不引起小鼠顯著的行為改變,并且對小鼠的體重沒有不利影響。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時,血管瘤用蘇木精和伊紅染色,并進(jìn)行組織切片的微血管密度分析。與生理鹽水注射相比小鼠,普萘洛爾顯著抑制血管瘤血管形成。CD133靶向普萘洛爾納米載體治療組的血管密度顯著低于其他組(生理鹽水組:68血管/mm2,普萘洛爾組:40個血管/mm2,普萘洛爾納米載體組:27個血管/mm2,CD133靶向普萘洛爾納米載體組:13個血管/mm2),表明CD133靶向普萘洛爾納米載體對抑制血管瘤的血管化是最有效的。研究結(jié)論普萘洛爾脂質(zhì)微球?qū)崿F(xiàn)了實(shí)現(xiàn)對普萘洛爾的長效緩釋,降低普萘洛爾給藥次數(shù)和毒副作用,實(shí)現(xiàn)對血管瘤的安全有效的治療。CD133靶向普萘洛爾納米載體實(shí)現(xiàn)對血管瘤干細(xì)胞的特異性殺傷,同時還實(shí)現(xiàn)對普萘洛爾的長期緩釋,降低普萘洛爾給藥次數(shù)和毒副作用,實(shí)現(xiàn)對血管瘤的安全有效的治療。該研究該研究首次利用脂質(zhì)體微球和血管瘤干細(xì)胞靶向納米載體的新策略實(shí)現(xiàn)普萘洛爾緩釋和靶向血管瘤干細(xì)胞,為血管瘤治療提供新思路。該研究可為能血管瘤治療提供兩種高效低毒的新型抗血管瘤藥物遞送載體。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R943
【圖文】：

二、結(jié)果和討論逡逑１．使用薄膜分散法和復(fù)乳法制備普萘洛爾脂質(zhì)微球逡逑圖１－１描述了普萘洛爾脂質(zhì)微球的詳細(xì)制備程序，它使用薄膜分散法和復(fù)乳法。逡逑我們選擇ＤＳＰＣ作為脂質(zhì)體制備中的磷脂，因?yàn)樗哂懈唢柡偷奶攸c(diǎn)，且具有逡逑高相變溫度（５５°Ｃ），因此有助于脂質(zhì)體的高穩(wěn)定性。我們之所以選擇薄膜分散逡逑法將脂質(zhì)體裝載普萘洛爾，是因?yàn)橛帽∧し稚⒎▽⒂H水性藥物包封在脂質(zhì)體中逡逑是一種非常簡便的方法［１８］。將脂質(zhì)體在微球中的包封對于成功制備普萘洛爾脂逡逑質(zhì)微球非常關(guān)鍵。盡管脂質(zhì)體上的親水性頭部基團(tuán)可能具有一定的保護(hù)作用，逡逑但由于磷脂可溶于有機(jī)溶劑，所以脂質(zhì)體容易被用于制備普萘洛爾脂質(zhì)微球的逡逑有機(jī)溶劑破壞。進(jìn)行殼聚糖在脂質(zhì)體上的修飾可以保持脂質(zhì)體在微球體中的完逡逑整性［１２］。復(fù)乳是復(fù)雜的體系，也稱為“乳液的乳液”，其中分散相的液滴本身含逡逑有一種或多種類型的較小的分散液滴［１９］。復(fù)乳通常用于包封親水性藥物，是因逡逑為親水性藥物使用單乳法包被時的包封率較低

微球的均一性較好。普萘洛爾脂質(zhì)微球中普萘洛爾的包封率為２３．９％，低于普逡逑萘洛爾脂質(zhì)體，原因是因?yàn)槲⑶虿荒馨馑兄|(zhì)體。逡逑藥物釋放曲線是藥物遞送系統(tǒng)的關(guān)鍵參數(shù)。如圖１－２所示，普萘洛爾脂質(zhì)逡逑體顯示普萘洛爾的快速藥物釋放：第１天釋放大于５０％，而且第４天釋放大于逡逑９０％。普萘洛爾脂質(zhì)體顯示出快速的藥物釋放很容易理解，因?yàn)閷⑺幬锇庠阱义现|(zhì)體中傾向于快速滲透脂質(zhì)體膜，脂質(zhì)體在循環(huán)和儲存中的不穩(wěn)定性嚴(yán)重阻逡逑礙了脂質(zhì)體的臨床應(yīng)用［２６＿２８］。值得注意的是，脂質(zhì)體包裹在微球中后，普萘洛逡逑爾的藥物釋放顯著減慢（圖１－２）。對于普萘洛爾脂質(zhì)微球來說，在第１天僅釋逡逑放８％的普萘洛爾，在第４天釋放３５％。此外，在第２０天后普萘洛爾的釋放達(dá)逡逑到平臺（？７５％）。另夕卜，我們還評估了在磷酸鹽緩沖液（ＰＢＳ）和含血清的ＰＢＳ逡逑中

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7 賈占庸;;小劑量甲巰咪唑聯(lián)合普萘洛爾治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥的療效觀察[J];健康之路;2017年01期

8 楊秀紅;;奧曲肽、普萘洛爾對肝硬化上消化道出血的治療效果及對患者機(jī)體血流動力學(xué)的影響研究[J];人人健康;2017年08期

9 李鵬;李東繁;郭正團(tuán);;普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤潰瘍療效觀察[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2013年02期

10 郭惠玲;諶亮;;普萘洛爾試驗(yàn)在鑒別中青年女性腫瘤患者心電圖ST-T改變性質(zhì)中的應(yīng)用[J];腫瘤藥學(xué);2012年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 龐德波;李黃開娜;;普萘洛爾試驗(yàn)對中年婦女ST-T改變的臨床價值[A];中華醫(yī)學(xué)會心電生理和起搏分會第十次全國學(xué)術(shù)年會會議匯編[C];2012年

2 余文林;張斌;李勤;熊杰;彭麗霞;吳艷虹;楊華;;普萘洛爾治療嬰幼兒體表血管瘤[A];中華醫(yī)學(xué)會整形外科學(xué)分會第十一次全國會議、中國人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)交流會、中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會全國會議論文集[C];2011年

3 余文林;張斌;李勤;熊杰;彭麗霞;吳艷虹;楊華;;普萘洛爾治療嬰幼兒體表血管瘤[A];中華醫(yī)學(xué)會整形外科學(xué)分會第十一次全國會議、中國人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)交流會、中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會全國會議論文集[C];2011年

4 劉天穗;劉汝鋒;陳億新;;心血管類藥物——普萘洛爾的合成與拆分[A];第三屆全國有機(jī)化學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集（上冊）[C];2004年

5 蒙誠躍;;普萘洛爾對兔皮膚創(chuàng)面蛋白質(zhì)合成的影響[A];第八屆西南五省一市燒傷整形學(xué)術(shù)會議暨貴州省醫(yī)學(xué)會燒傷整形分會2010年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2010年

6 金英姬;金哲虎;;普萘洛爾口服治療嬰幼兒血管瘤的臨床觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會第十八次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2012年

7 楊永儉;;普萘洛爾試驗(yàn)對心電圖非特異性ST-T改變的鑒別改進(jìn)及隨訪觀察[A];第二屆全國心功能學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];1990年

8 陳鑫;袁斯明;;口服普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤的臨床研究[A];中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)分會第十六次全國急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

9 李維;王靜波;侯鳳茹;;普萘洛爾、凝血酶治療食道胃底靜脈大出血48例臨床觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會全國第五次急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];1994年

10 薛細(xì)貌;高宇;;口服普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤的臨床觀察[A];2016年浙江省皮膚病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2016年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 朱本浩;普萘洛爾可用于甲亢輔助治療[N];中國醫(yī)藥報;2017年

2 許錦東;警惕降壓藥的首劑反應(yīng)[N];中國醫(yī)藥報;2004年

3 陳金偉;普萘洛爾致哮喘持續(xù)狀態(tài)一例[N];中國醫(yī)藥報;2005年

4 ;藥理學(xué)部分[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

5 魏開敏;當(dāng)心普萘洛爾誘發(fā)哮喘[N];大眾衛(wèi)生報;2005年

6 廣東省連州市北湖醫(yī)院副主任醫(yī)師 陳金偉;硝酸甘油+普萘洛爾,心絞痛速見效[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2011年

7 陳金偉;普萘洛爾可能導(dǎo)致哮喘持續(xù)狀態(tài)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2006年

8 呂群;緩解甲亢癥狀 可用普萘洛爾[N];健康報;2003年

9 朱本浩;治療甲亢何時應(yīng)用普萘洛爾[N];中國醫(yī)藥報;2009年

10 成吉;小心駛得萬年船[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 郭曉楠;基于負(fù)載普萘洛爾的聚乳酸—聚羥基乙酸遞送載體的抗血管瘤作用和機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2018年

2 毛小琴;普萘洛爾對映異構(gòu)體的立體選擇性分析與GBLP功能研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

3 李曉沛;肝硬化門脈高壓癥非選擇性β受體阻斷劑治療及NAT2基因多態(tài)性研究[D];山東大學(xué);2015年

4 陳遠(yuǎn)征;普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤不同給藥方案療效對比及作用機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2017年

5 徐廣琪;普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤臨床觀察及作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2014年

6 李敏;彩色多普勒超聲指導(dǎo)下使用光電技術(shù)或普萘洛爾治療皮膚血管瘤的臨床研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2017年

7 趙忠芳;普萘洛爾治療血管瘤分子機(jī)制的初步研究及臨床應(yīng)用[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2011年

8 凌彬;普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤的臨床療效回顧及其作用機(jī)制的初步研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

9 王峰;普萘洛爾及其對映體對嬰幼兒血管瘤周細(xì)胞影響的研究[D];吉林大學(xué);2015年

10 吉毅;β腎上腺素受體信號通路對嬰幼兒血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞增殖與凋亡的調(diào)控作用[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 羅添;毛細(xì)管電泳法評價食醋和中藥質(zhì)量及分離普萘洛爾對映體的研究[D];蘭州大學(xué);2018年

2 孫東杰;普萘洛爾和卡維地洛降低肝靜脈壓力梯度療效及影響因素分析[D];山東大學(xué);2015年

3 馮大偉;口服普萘洛爾治療嬰幼兒體表血管瘤療效觀察[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2014年

4 薛苗苗;鐵（Ⅲ）-檸檬酸鹽體系光降解水中普萘洛爾的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

5 陳淑明;普萘洛爾凝膠治療裸鼠血管瘤的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

6 張超;普萘洛爾和酚妥拉明在神經(jīng)源性肺水腫中的作用[D];山東大學(xué);2015年

7 潘良利;阻斷腎上腺素能受體對人內(nèi)皮細(xì)胞體外血管生成的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

8 馬京帥;不同方式活化過硫酸鹽降解水中普萘洛爾的研究[D];廣東工業(yè)大學(xué);2017年

9 何輝霞;普萘洛爾誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡對P38MAPK信號通路影響的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2014年

10 楊樂金;腎上腺素能受體拮抗劑普萘洛爾和哌唑嗪對應(yīng)激大鼠的影響[D];山東大學(xué);2009年

本文編號：2726940