發(fā)布時(shí)間：2020-06-11 16:30

【摘要】：本課題組經(jīng)過前期查閱大量文獻(xiàn),開始設(shè)計(jì)路線并利用拼合原理合成出了一類新型芳雜環(huán)連三氮唑類衍生物。本論文通過MTT方法對(duì)該類衍生物做了活性篩選,發(fā)現(xiàn)序號(hào)為H27的化合物具有較好的抗腫瘤活性,為了進(jìn)一步探索其生物機(jī)制,其抗腫瘤作用需要通過一系列實(shí)驗(yàn)進(jìn)行深入研究和評(píng)價(jià)。具體研究結(jié)果如下:1、通過MTT方法,分別用MGC803、PC3、EC109三株癌細(xì)胞篩選該系列衍生物的抗增殖活性,氟尿嘧啶作為陽性對(duì)照藥物,結(jié)果顯示化合物H27抗增殖活性最好。2、化合物H27對(duì)胃癌MGC803細(xì)胞的抗增殖效果非常明顯,其IC_(50)為7.59±0.28μM,而對(duì)人正常胃上皮細(xì)胞GES1毒性較小(IC_(50)為31.71±1.24μΜ)。3、通過細(xì)胞生長曲線和克隆形成實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)化合物H27可以減緩胃癌MGC803細(xì)胞的生長速度,阻礙MGC803細(xì)胞的增殖,具有濃度-時(shí)間依賴性。4、將化合物H27以不同的濃度作用于胃癌MGC803細(xì)胞48小時(shí),通過細(xì)胞周期試劑盒測(cè)定,結(jié)果表明化合物H27可以將MGC803細(xì)胞阻滯在G2/M期,從而阻滯癌細(xì)胞的過度增殖。Western Blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:化合物H27能夠通過調(diào)節(jié)CyclinB1、CDK1、p21蛋白的表達(dá)將細(xì)胞阻滯在G2/M期。5、將化合物H27作用于MGC803細(xì)胞一段時(shí)間后,通過細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察,我們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞呈現(xiàn)出了凋亡的特征。6、將化合物H27以不同濃度作用于MGC803細(xì)胞48小時(shí),然后通過FITC-Annexin V/PI試劑盒處理細(xì)胞,FCM結(jié)果顯示:隨著化合物H27濃度的增大,該細(xì)胞的凋亡百分比顯著增加。7、將化合物H27以不同濃度作用于MGC803細(xì)胞48小時(shí),然后通過JC-1試劑盒處理細(xì)胞,FCM結(jié)果顯示:隨著化合物H27濃度的增大,MMP(Ψm)顯著降低。Western Blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:化合物H27可以調(diào)控Bcl-2家族蛋白的表達(dá)以及激活Caspase-9、Caspase-3,對(duì)PARP進(jìn)行切割,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。8、將化合物H27以不同的濃度作用于MGC803細(xì)胞48小時(shí),Western Blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:化合物H27還可以通過外源性途徑激活DR4,再進(jìn)一步激活Caspase-8促使細(xì)胞產(chǎn)生凋亡。9、劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:化合物H27可以顯著降低MGC803細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。Western Blotting結(jié)果顯示:化合物H27可以通過降低MMP-9和Vementin蛋白的表達(dá)抑制細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的能力。綜上所述,本論文有效證明了新型芳雜環(huán)連三氮唑類衍生物H27對(duì)胃癌細(xì)胞具有較好的選擇性,特別是MGC803細(xì)胞,研究結(jié)果顯示化合物H27低濃度可以有效抑制MGC803的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移,高濃度導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,為發(fā)掘抗癌藥物供應(yīng)了重要的候選化合物。
【圖文】：

目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)圖

目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)圖
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R96

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 季加孚;李子禹;沈琳;張小田;孫應(yīng)實(shí);唐磊;曹登峰;李忠武;吳齊;季鑫;;重視多學(xué)科團(tuán)隊(duì)在胃癌規(guī)范化治療中的作用[J];中國實(shí)用外科雜志;2014年07期

2 李英俊;邵昕;高立信;靳q;盛麗;羅潼川;于洋;李佳;;3,6-二取代-1,2,4-三嗪衍生物的微波輔助合成及生物活性[J];有機(jī)化學(xué);2013年10期

3 高丹丹;劉磊;白玉賢;;晚期胃癌化療及分子靶向治療研究進(jìn)展[J];中國腫瘤臨床;2012年23期

4 王艷;周成合;;三唑類藥物研究新進(jìn)展[J];中國科學(xué):化學(xué);2011年09期

5 ;Prognosis of 980 patients with gastric cancer after surgical resection[J];癌癥;2010年11期

6 鄒向陽;李連宏;;細(xì)胞周期調(diào)控與腫瘤[J];國際遺傳學(xué)雜志;2006年01期

7 ;Caspase Family Proteases and Apoptosis[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2005年11期

8 李春海,李克勤;腫瘤微血管生成的機(jī)制與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移[J];中華腫瘤雜志;2000年03期

9 王學(xué)工,付玉杰,吳立昌,尹際彤,劉利民;β-內(nèi)酰胺酶抑制劑──他唑巴坦(Tazobactam)[J];現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué);1997年04期

，

本文編號(hào)：2708161