【摘要】：薏苡素(Coixol)是從薏苡、白茅、野甘草等植物中提取而來(lái)的無(wú)色針狀結(jié)晶,也是薏苡種仁油抗癌制劑“康萊特注射液”中的主要活性成分之一。目前有很多關(guān)于康萊特注射液抗癌同時(shí)減輕癌癥痛感的臨床報(bào)道,也有文獻(xiàn)報(bào)道薏苡素具有鎮(zhèn)痛抗炎、抗菌、降糖等作用,研發(fā)薏苡素制劑可以滿(mǎn)足臨床用藥的需求,具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。由于薏苡素的水溶性差,本實(shí)驗(yàn)采用羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β3-CD)包合薏苡素,同時(shí)考察薏苡素-HP-β-CD包合物的體外釋藥情況和穩(wěn)定性等。此外,建立生物樣品中薏苡素的HPLC測(cè)定方法,考察薏苡素及其包合物灌胃給藥后在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征和組織分布情況,為薏苡素新制劑的應(yīng)用提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1、薏苡素-HP-β-CD包合物的制備及表征采用溶劑攪拌-冷凍干燥法制備薏苡素-HP-β-CD包合物,通過(guò)掃描電鏡法、紅外光譜法、差示掃描量熱分析和X-射線(xiàn)衍射法對(duì)包合物進(jìn)行表征,驗(yàn)證其包合成功。采用HPLC法測(cè)定包合物中薏苡素含量,并進(jìn)行方法學(xué)考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:薏苡素濃度(x)與峰面積(y)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系,薏苡素含量測(cè)定回歸方程為:y=108096x-48927(R2=0.9995)。方法的專(zhuān)屬性、精密度、穩(wěn)定性和加樣回收率良好,適用于包合物中薏苡素的含量測(cè)定。2、優(yōu)化薏苡素-HP-β-CD包合物的制備工藝在單因素影響實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以包合率和包合物得率的綜合評(píng)分為考察指標(biāo),篩選出HP-β-CD與薏苡素投料比、包合時(shí)間、包合溫度三種因素進(jìn)行星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面實(shí)驗(yàn),確定制備包合物的最佳工藝:HP-β-CD:薏苡素投料比為3:1,包合溫度60℃,包合時(shí)間5h。3、薏苡素-HP-β-CD包合物體外釋放實(shí)驗(yàn)及穩(wěn)定性考察采用透析袋(截留分子量為8000～14000)法進(jìn)行體外釋藥考察,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,薏苡素-HP-β-CD包合物累計(jì)釋藥率比薏苡素單體的溶出提高了 2.55倍,說(shuō)明薏苡素-HP-β-CD包合物溶解度遠(yuǎn)大于薏苡素。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:薏苡素-HP-β-CD包合物在高溫和光照條件下穩(wěn)定性良好:在高濕環(huán)境中易吸濕潮解,因此在生產(chǎn)、貯存和運(yùn)輸過(guò)程中盡量保持避光密封干燥。4、薏苡素-HP-β-CD包合物藥動(dòng)學(xué)及組織分布研究采用HPLC法測(cè)定生物樣品中薏苡素的含量,為更有效地避免生物組織中繁雜成分干擾,采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析并進(jìn)行方法學(xué)考察。實(shí)驗(yàn)顯示,薏苡素與內(nèi)標(biāo)物峰形良好,完全分離,有良好的專(zhuān)屬性。血漿樣品中,薏苡素在考察的0.16～25.00 μg/mL濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好;各組織樣品中,薏苡素在考察的0.03～3.13 μg/mL濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好,精密度、樣品穩(wěn)定性及回收率RSD均良好,可用于生物體內(nèi)樣品的檢測(cè)。采用血藥濃度測(cè)定法研究薏苡素及其包合物在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征。以100 mg/kg的劑量進(jìn)行大鼠灌胃給藥后,采用二室模型對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理求得藥動(dòng)學(xué)參數(shù),確定:薏苡素的平均血藥峰濃度Cmax=14.9±2.82 μg/mL比薏苡素包合物的Cmax=17.48±2.33 μg/mL為低;薏苡素及其包合物的消除半衰期t1/2Z分別為0.83±0.44h和1.97±0.63h,平均滯留時(shí)間MRT0～10)分別為1.00±0.13 h和237±0.23 h。與薏苡素相比,薏苡素包合物的消除半衰期t1/2Z顯著延長(zhǎng)(p0.01),平均滯留時(shí)間MRT(0～10)顯著延長(zhǎng)(p0.01)。此外,薏苡素包合物在大鼠體內(nèi)的藥時(shí)曲線(xiàn)下面積AUC(0～10)顯著提高(p0.01),是薏苡素的232.83%。說(shuō)明薏苡素經(jīng)HP-β-CD包合后能增加其在體內(nèi)的吸收,延緩薏苡素在體內(nèi)的代謝消除,達(dá)到長(zhǎng)效作用,提高其口服生物利用度。按給藥量100 mg/kg計(jì),大鼠灌胃給予薏苡素及其包合物后,HPLC測(cè)定0.25 h、0.5 h、1h、3 h、6 h、10 h大鼠各組織中薏苡素濃度,比較藥物在各組織中的分布情況。結(jié)果表明,在0.25 h時(shí),包合物組在各組織中的濃度均低于薏苡素組;在0.5 h時(shí),包合物組在各組織中的濃度升高較快;在1h及以后,包合物在各組織的濃度均高于薏苡素組;在6h時(shí),薏苡素組的心、脾、肺、腦中藥物濃度已低于檢測(cè)限;而包合物組的各組織中藥物濃度均能檢測(cè)到。此外,薏苡素組在0.25 h時(shí)各組織中藥物濃度達(dá)到最大值;而包合物組在0.5 h時(shí)各組織(除腎)中薏苡素濃度達(dá)到最大值。通過(guò)對(duì)比可以說(shuō)明HP-β-CD的包合可提高薏苡素在組織臟器中的濃度,同時(shí)使薏苡素緩慢釋放而具有長(zhǎng)效作用;包合物組在各組織中的含量下降速度比薏苡素組的緩慢,說(shuō)明制成包合物后可延緩薏苡素在體內(nèi)的消除過(guò)程�？偟内厔�(shì)來(lái)看,在腎、肝中薏苡素含量明顯大于其他臟器;各組織器官中,薏苡素的濃度大小依次為:腎肝脾心肺腦。與薏苡素相比,包合物在腎中的含量下降速度緩慢,說(shuō)明包合物可延緩藥物在體內(nèi)的消除過(guò)程。值得注意的是,腦部也能檢測(cè)到薏苡素的含量,說(shuō)明薏苡素能透過(guò)血腦屏障,提示薏苡素可能作用于腦部的中樞神經(jīng)而發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用;隨著時(shí)間的延長(zhǎng),薏苡素包合物在腦部含量下降速度緩慢,說(shuō)明包合物可減緩藥物在腦部的消除速度,增加在腦部的滯留時(shí)間,提示“康萊特注射液”對(duì)癌患的鎮(zhèn)痛作用很有可能是所含成分薏苡素所為。
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圖２－１薏苡素（Ａ）、ＨＰ－ｐ－ＣＤ邋（Ｂ）紫外吸?

邐３５０邐４００逡逑圖２－１薏苡素（Ａ）、ＨＰ－ｐ－ＣＤ邋（Ｂ）紫外吸收?qǐng)D譜逡逑Ｆｉｇ．２－１邋Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ邋ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ邋ｓｐｅｃｔｒａ邋ｏｆ邋Ｃｏｉｘｏｌ邋（Ａ）邋ａｎｄ邋ＨＰ－Ｐ－ＣＤ邋（Ｂ）逡逑掃描結(jié)果可見(jiàn)：蔥苡素在２３２邋ｎｍ和２９０邋ｎｍ處均有吸收峰，而ＨＰ－ｐ－ＣＤ空丨＇丨溶液在逡逑２０（Ｍ００邋ｍｉｌ波長(zhǎng)范圍內(nèi)無(wú)紫外吸收，不干擾１苡素的測(cè)定。因考慮薏苡素２３２邋ｎｍ處吸光逡逑度較大，為提高后期生物樣品的檢測(cè)方法的靈敏度，故選擇２３２邋ｎｍ作為薏苡素－ＨＰ－（３－ＣＤ逡逑包合物的測(cè)定波長(zhǎng)｜３１。逡逑２．２．３．２專(zhuān)屬性逡逑�。玻玻表�(xiàng)下薏苡素對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液，按照２．２．２項(xiàng)下色譜條逡逑件進(jìn)行測(cè)定，分別考察色譜行為。由閣可見(jiàn)，薏苡素在７．１邋ｍｉｎ左右出峰，，峰形良好，逡逑ＨＰ－Ｐ－ＣＤ未對(duì)a戃鈾氐牟舛ú福

本文編號(hào)：2702796