發(fā)布時間：2020-06-06 07:30

【摘要】：隨著社會的快速發(fā)展,競爭的日益激烈,人民群眾的生活壓力也越來越大。抑郁癥也變成了一種常見的精神類疾病,并且抑郁癥患病率隨著社會壓力的增加正在逐年上升。世界衛(wèi)生組織認為抑郁癥的危害性僅次于心臟病。由于抑郁癥患者的不斷增加,抗抑郁藥的使用量在不斷提高。SSRI類抗抑郁藥是目前臨床使用最多的一類抗抑郁藥,通過提高突觸間隙5-HT濃度達到治療抑郁癥的目的。目前,藥物引起的環(huán)境污染問題逐漸受到廣大學者的關注。人類丟棄及代謝不完全排除體外的藥物由于不能得到良好的清除,導致其廣泛存在于地表水、海洋等水體環(huán)境中,嚴重危害水生生物的健康。本研究選取SSRI類抗抑郁代表性藥物氟西汀和帕羅西汀,探討其對斑馬魚腦組織5-HT能神經(jīng)傳導系統(tǒng)關鍵功能分子蛋白5-HT_(1A)受體和5-HT轉運體(5-Hydroxytryptamine Transporter,SERT)轉錄及表達水平的影響,了解SSRI類抗抑郁藥對斑馬魚腦組織5-HT神經(jīng)傳導系統(tǒng)的影響。成年斑馬魚分別連續(xù)暴露于氟西汀、帕羅西汀7d和14d,于染毒后檢測5-HT_(1A)和SERT轉錄及蛋白表達水平。結果顯示,氟西汀和帕羅西汀可引起5-HT_(1A)、SERT基因轉錄水平升高,伴有SERT蛋白表達水平降低。本研究結果提示,SSRI類抗抑郁藥物氟西汀和帕羅西汀通過引起斑馬魚腦組織5-HT_(1A)受體和SERT水平異常,影響5-HT能神經(jīng)突觸結構,干擾斑馬魚腦組織5-HT能神經(jīng)傳導系統(tǒng)的正常生理功能,危害斑馬魚健康。本研究為進一步研究SSRI類抗抑郁藥物對斑馬魚中樞神經(jīng)系統(tǒng)的不良影響提供科學依據(jù),為研究其他藥物對水生生物的健康損害效應提供參考。
【圖文】：

配置 3%瓊脂糖溶液。稱取 3g 瓊脂糖（Agarose）于錐形瓶中，加入 100mlTBE緩沖液混勻。并用報紙封口防止加熱過程中外濺。放入微波爐中加熱 5 分鐘，徹底熔解清除氣泡后取出。適當冷卻后加入 50 μlNA-Red，混勻后倒入膠板中制膠。待徹底冷卻后將膠塊放入含有電泳液為 TBE 緩沖液的電泳儀中。取適量實時熒光定量產(chǎn)物，加入 DNA 上樣緩沖液（6X），，混勻后上樣 5 μl。DNA 分子量標準上樣 5 μl。電泳儀電壓設置為 120V，電泳時間 40 分鐘。電泳完成后，取出膠塊，將凝膠成像儀擦凈，放入膠塊擺正，通過凝膠成像儀進行觀察。記錄實驗結果。2.3.實驗結果2.3.1 實時熒光定量結果超微量分光光度儀測定四組樣品 OD260/280 比值為 1.95~1.99。圖 2-1（D 為5-HT1A，E 為 SERT，F(xiàn) 為 β-actin），圖 2-2（E 為 5-HT1A，F(xiàn) 為 SERT，G 為β-actin）分別為染毒 7d 及 14d 氟西汀組，帕羅西汀組，混合組以及空白對照組四組的5-HT1A，SERT，β-actin 三個基因的 QPCR 擴增曲線和熔解曲線。

圖 2-2 染毒 14dQPCR 的擴增曲線（左）和熔解曲線（右）Fig. 2-2 amplification curve (left) and melting curve (right) of QPCR at 14 days after exposure統(tǒng)計分析結果顯示（表 2-4,*為差異有統(tǒng)計學意義）。染毒 7d 時，氟西汀組和帕羅西汀組 5-HT1A和 SERT 轉錄水平高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0. 05)；混合組 5-HT1A和 SERT 轉錄水平高于空白對照組，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0. 05)；氟西汀組 5-HT1A轉錄水平高于帕羅西汀組和混合組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0. 05)；氟西汀組 SERT 轉錄水平高于帕羅西汀組和混合組，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0. 05)；帕羅西汀組 5-HT1A和 SERT 轉錄水平低于混合組，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0. 05)。表 2-4 5-HT1A及 SERT 相對表達量（ x±s，n=3）Tab.2- 4 Relative expression levels of 5-HT1Aand SERT（ x±s，n=3）染毒天數(shù) Days ofexposure分組 Grouping5-HT1A轉錄水平5-HT1ATranscriptionlevelSERT 轉錄水平SERT Transcriptionlevel氟西汀 87.45±5.87* 8.04±0.69*帕羅西汀 1.37±0.11* 2.74±0.06*7 d
【學位授予單位】：浙江海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R965

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 臧曉霞;紀明山;左平春;陳仕紅;孫中華;杜芳;;啶酰菌胺對斑馬魚胚胎及成魚的毒性[J];農藥;2016年12期

2 沈自慧;楊淋清;吳德生;郭昱嵩;袁建輝;周麗;劉建軍;莊志雄;;基于斑馬魚胚胎進行化學品毒性評價的方法[J];中國熱帶醫(yī)學;2016年12期

3 王鴻奎;鞏杰;王新;劉東;;非肌性肌球蛋白Ⅱ-C在斑馬魚胚胎發(fā)育過程中的表達[J];交通醫(yī)學;2016年01期

4 郭櫻子;欒亞楠;周玉玲;白承連;任湘鵬;;低劑量氯氟氰菊酯對斑馬魚胚胎運動行為的影響[J];溫州醫(yī)科大學學報;2016年07期

5 趙崇軍;田敬歡;倪媛媛;馮婭茹;代一航;王金鳳;樊嬌嬌;楊冉;馬志強;林瑞超;;馬錢子對斑馬魚胚胎發(fā)育的影響[J];中華中醫(yī)藥學刊;2016年11期

6 劉迎;胡燕;姜蕾;潘波;秦涵淳;林勇;;6種表面活性劑對斑馬魚胚胎發(fā)育的毒性效應[J];生態(tài)毒理學報;2014年06期

7 何秋霞;董貞蘭;楚杰;孫桂金;韓利文;韓健;劉可春;;蘆薈大黃素對斑馬魚胚胎發(fā)育及運動行為學的毒性研究[J];山東科學;2015年03期

8 陳怡君;蒲韻竹;顏慧;鐘玉緒;王卓;李春杰;查曉丹;趙寶全;劉萍;;冰片對斑馬魚胚胎發(fā)育的安全性評價[J];中國藥房;2014年19期

9 劉迎;胡燕;姜蕾;潘波;秦涵淳;林勇;;5種酰胺類除草劑對斑馬魚胚胎發(fā)育的毒性效應[J];農藥;2014年11期

10 王雪;彭維兵;王希敏;劉可春;陳錫強;張云;;富馬酸二甲酯對斑馬魚胚胎早期發(fā)育的影響[J];動物學雜志;2013年04期

相關會議論文 前10條

1 沈自慧;吳德生;郭昱嵩;;基于斑馬魚胚胎進行化學品毒性評價的方法[A];2016年中國水產(chǎn)學會學術年會論文摘要集[C];2016年

2 陳錫強;韓利文;王希敏;王思鋒;侯海榮;劉可春;;促滲劑氮酮對斑馬魚胚胎的透皮作用及其毒性影響(英文)[A];2012年中國藥學大會暨第十二屆中國藥師周論文集[C];2012年

3 張利軍;郭家彬;苑曉燕;史慧勤;趙君;束玉磊;彭雙清;;應用斑馬魚胚胎和幼魚評價布洛芬的心臟毒性[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學年會暨藥物非臨床安全性評價研究論壇論文摘要[C];2013年

4 侯佳;桂永浩;張立鳳;王躍祥;宋后燕;鐘濤;;視黃酸缺乏對斑馬魚胚胎心臟發(fā)育的影響[A];中華醫(yī)學會第五次全國兒科中青年學術交流大會論文匯編（上冊）[C];2008年

5 常成;朱加進;孫啟;;瓶裝水對斑馬魚胚胎生長發(fā)育的影響[A];2017浙江省營養(yǎng)學會年會暨西湖營養(yǎng)學術論壇資料匯編[C];2017年

6 于永利;楊景峰;王思珍;董武;;高殘留農藥福美雙對斑馬魚胚胎體節(jié)以及脊索的影響[A];持久性有機污染物論壇2010暨第五屆持久性有機污染物全國學術研討會論文集[C];2010年

7 巴雅斯胡;楊景峰;于永利;王思珍;董武;;高殘留農藥代森鋅誘導斑馬魚胚胎脊索變形[A];持久性有機污染物論壇2011暨第六屆持久性有機污染物全國學術研討會論文集[C];2011年

8 楊維超;苑曉燕;張利軍;吳衛(wèi)東;彭雙清;;納米二氧化硅致斑馬魚胚胎發(fā)育毒性的初步研究[A];2014線粒體毒性與基于毒性通路的安全性評價新策略學術研討會暨中國毒理學會毒理學替代法與轉化毒理學專業(yè)委員會成立大會論文集[C];2014年

9 涂文清;徐超;劉維屏;;乙草胺對于斑馬魚胚胎在發(fā)育和免疫毒性方面的對映體選擇性[A];第四屆全國分子手性學術研討會暨2011綠色手性論壇論文摘要集[C];2011年

10 朱小山;朱琳;李燕;端正花;;富勒烯(C_(60))對斑馬魚胚胎發(fā)育毒性的初步研究[A];第三屆全國環(huán)境化學學術大會論文集[C];2005年

相關重要報紙文章 前7條

1 實習生 楊陽;斑馬魚可為癌癥病人試藥[N];科技日報;2017年

2 記者 張夢然;燃煤中發(fā)現(xiàn)未知潛在毒副產(chǎn)品[N];科技日報;2017年

3 記者 劉霞;科學家繪出首個脊椎動物發(fā)育藍圖[N];科技日報;2008年

4 記者 陳丹;研究發(fā)現(xiàn)一些3D打印物品有毒[N];科技日報;2015年

5 宗華 編譯;為細胞“立傳”[N];中國科學報;2018年

6 記者 毛黎;2008年10大科學突破[N];科技日報;2008年

7 本報駐日內瓦記者 陳建;“中國創(chuàng)新”領跑日內瓦發(fā)明展[N];經(jīng)濟日報;2015年

相關博士學位論文 前10條

1 葛舒超;穩(wěn)態(tài)強磁場延遲斑馬魚早期發(fā)育[D];中國科學技術大學;2019年

2 周作瓊;hprg1b基因的干細胞系建立及其作用研究[D];湖南師范大學;2017年

3 黨W

本文編號：2699356