【摘要】：潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)是炎癥性腸病的一種,病因尚不明確,多發(fā)于20-30歲人群,其病變部位位于乙狀結(jié)腸和直腸,其表現(xiàn)形式為腹痛、便血、體重減輕、里急后重、嘔吐等,臨床上其主要特點為結(jié)腸內(nèi)壁出現(xiàn)潰瘍。有部分研究表明鋅作為一種人體必需的微量元素,參與體內(nèi)多種酶、核酸和蛋白的合成,與人體內(nèi)細胞分裂,生長和再生息息相關(guān),還有一定的抑菌作用,而透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid,HA)在傷口愈合的過程中,具有降低炎癥介質(zhì)水平的作用,同時其能在潰瘍表面形成微酸性環(huán)境,抑制細菌生長。二者結(jié)合形成的透明質(zhì)酸鋅(Zinc hyaluronate,ZnHA)具有良好的協(xié)同作用,可治療角膜潰瘍和糖尿病足潰瘍等疾病。本論文摸索了ZnHA的制備工藝,對其進行了優(yōu)化及表征,并使用了能量色散X射線熒光(Energy dispersive X-ray fluorescence,EDXRF)法對其中的鋅含量進行了質(zhì)控,并成功構(gòu)建了UC的動物模型。并通過HE染色,免疫組化等動物實驗研究ZnHA對UC的抑制作用。主要研究內(nèi)容包括以下三個方面:(1)單因素考察透明質(zhì)酸鈉(Sodium hyaluronate,SH)分子量、鋅鹽種類、乙醇濃度、鋅鹽濃度、反應(yīng)溫度和反應(yīng)時間對ZnHA中葡萄糖醛酸含量的影響,然后通過正交實驗篩選優(yōu)化實驗方案,結(jié)果制備ZnHA的最佳試驗條件為:SH分子量為130萬、鋅鹽選用乙酸鋅、乙醇濃度80%、鋅鹽濃度2%、反應(yīng)時間40℃、反應(yīng)時間1小時,此條件下制備的ZnHA中葡萄糖醛酸含量為43.18%。(2)建立EDXRF法應(yīng)用于ZnHA中鋅含量的測定。用0.3%濃度的透明質(zhì)酸鈉溶液作為空白基質(zhì),精密加入不同量的硫酸鋅溶液,建立元素標(biāo)準曲線。以0.3%濃度的ZnHA溶液作為樣品溶液。在管壓為40KV,管流150mA,1號準直器,3號濾光片的條件下測定鋅含量。且本法與藥典中收載的EDTA-2Na測鋅元素方法比較,測定結(jié)果經(jīng)t檢驗無顯著性差異(P0.05)。(3)Balb/C小鼠40只隨機分為正常組,模型組,硫酸鋅組、透明質(zhì)酸鈉組、陽性藥柳氮磺吡啶組,低、中、高劑量ZnHA組,每組5只。除正常組外,其余各組自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉鹽(Dextran sodium sulfate,DSS)7天誘導(dǎo)UC,除模型組,給藥組均以灌胃的方式給藥。通過HE染色,免疫組化,炎癥因子和western blot來判斷ZnHA對潰瘍性結(jié)腸炎的抑制效果。結(jié)果HE染色顯示中劑量ZnHA組和柳氮磺吡啶組潰瘍較少,免疫組化結(jié)果顯示這兩組陽性率高于其他給藥組。與正常組相比,中劑量ZnHA組與柳氮磺吡啶組小鼠體內(nèi)炎癥因子水平與緊密連接蛋白含量之間沒有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:ZnHA對潰瘍性結(jié)腸炎有一定的抑制作用。綜上所述,本文確定了ZnHA的最優(yōu)制備工藝,建立了一種新型測定其鋅含量的方法,可以用于其制備過程控制,并成功構(gòu)造了潰瘍性結(jié)腸炎的動物模型,驗證了ZnHA對潰瘍性結(jié)腸炎的抑制作用。
【圖文】：

本論文研究方案

圖 2.1 ZnHA 結(jié)構(gòu)式Fig 2.1 The structure of zinc hyaluronate愈合的作用時，依賴葡萄糖醛酸為傷靠鋅殺菌、消炎，其在傷口表面停留時材料為確保其安全性和有效性，必須嚴來制備 ZnHA，開發(fā) ZnHA 工藝路線，，，通過正交實驗對其進行優(yōu)化，并對度、特性黏數(shù)、澄清度、熾灼殘渣等指備見表 2.1。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R943; R1;TQ460.1

【參考文獻】

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本文編號：2695357